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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,课题,2,月季的花药培养,1,、被子植物定义:,凡是种子有果皮包被着,胚珠有子房壁包被着的植物,就叫做被子植物,被子植物和裸子植物,2,、裸子植物定义:,凡是胚珠裸露,外面没有子房壁包被,种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物,实例:哈密瓜、杏、桃子,实例:松、紫衫、铁树,被子植物,哈密瓜,桃子,裸子植物,月季:被子植物,花丝,花药,一、被子植物的花粉发育,雄蕊,被子植物的花粉发育,花丝:支撑着花药的结构,花药:,囊状结构,,内有很多花粉粒,花粉是花粉母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是,单倍体的生殖细胞,。,花粉的发育要经历:小孢子四分体时期、单核期(居中、靠边)、双核期,雄蕊,花粉粒,小孢子,四分体时期,单核,居中期,单核,靠边期,双核期,小孢子,母细胞,1,花粉母细胞,4,个小 孢子,减数分裂,有丝分裂,4,个营养细胞核,4,个生殖细胞核,有丝分裂,8,个精子,4,个花粉粒,二、产生花粉植株的两种途径,移栽,花药中的花粉,胚状体,脱分化,愈伤组织,花药中的花粉,脱分化,分化,丛芽,再分化,丛芽,诱导,生根,取决于:培养基中激素种类及其浓度配比,二倍体,单倍体,愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞(细胞排列疏松、无规则)。,体细胞胚:,在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为,体细胞胚,。,花粉胚:,最后发育成单倍体植株,胚状体,植物类型,:,不同种植物诱导成功率不同,生理状态,:,花期早期的花药反应能力较好,花粉发育时期,:,单核靠边期,三、影响花药培养的因素,其他因素,完全未开放的月季花蕾(选),略微开放的月季花蕾,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?,花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。,四、实验操作,(一)材料的选取,焙花青,-,铬矾法,蓝黑色,最常用:醋酸洋红法,红色,1,、方法,醋酸洋红的配置,2,、醋酸洋红法,染色操作,3,、焙花青,铬钒法,卡诺氏固定液的配制方法,焙花青,铬钒溶液的配制方法,染色操作,(二)材料的消毒,1,、酒精处理,酒精:,70%,的酒精,浸泡,,30,秒,无菌水清洗,无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分,2,、消毒液处理,放入,质量分数为,0.1%,的氯化汞,溶液中,24,分钟(也可质量分数,为,1%,的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液,),无菌水冲洗,35,次,(三)接种和培养,要彻底去除花丝,1,、剥取花药(无菌条件),勿损伤花药,注意:,每瓶,接种花药,7-10,个,。,2,、接种,培养条件:温度,:,25,左右,不需要光照,3,、培养,培养,注意:,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,主要原因:,营养核和生殖核融合,4,、鉴定和筛选,选材是否恰当,选材是否成功是花药培养成功的关键。应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。,五:课题成果评价,无菌技术是否过关,如果出现了污染现象,说明某些操作步骤,如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。,接种是否成功,如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体,花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基,以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。,植物组织培养技术与花药培养技术的异同点:,项目,相同点,不同点,植物组织培养技术,离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。,外植体为体细胞,染色体数无需加倍。,花药培养技术,取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。,
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