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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,专题,3,植物的组织培养技术,基础知识梳理,一、菊花的组织培养,1理论基础：植物细胞的,。,2基本过程：,全能性,再分化,脱分化,基础知识梳理,3影响因素,(1)材料：,、年龄、保存时间长短等,(2)营养,无机营养,a大量元素。,b,。,有机营养：,、甘氨酸、,、肌醇以及蔗糖等。,种类,微量元素,维生素,烟酸,基础知识梳理,(3)激素：,和细胞分裂素。,(4)pH：,左右。,(5)温度：1822。,(6)光照：每日光照12 h。,4实验操作步骤：,制备MS培养基外植体消毒,培养,栽培,生长素,5.8,接种,移栽,基础知识梳理,二、月季的花药培养,1理论基础：花粉具有,。,2花粉发育过程：,、单核期、,等阶段。,3产生花粉植株的两种途径：,全能性,四分体时期,双核期,基础知识梳理,4操作关键,(1)选材,要选择,、,的花蕾。,花粉最好处于,，花药培养的成功率最高。,确定花粉发育时期最常用的方法是,和,，可以将细胞核分别染成红色和,蓝黑,色。,初花期,完全未开放,单核期细胞核由中,央移向细胞一侧的时期,醋酸洋红法,焙花青铬矾法,基础知识梳理,(2)接种,剥离花药尽量不损伤花药，否则接种后容易,。,要,，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或,的形成。,(3)培养：花药培养一段时间后开裂，,或释放出胚状体。要将前者及时转移到分化培养基上，如释放出胚状体，要尽快在花药开裂后，将,，分别移植到新的培养基上。,从受伤部位产生愈伤组织,彻底去除花丝,胚状体,长出愈伤组织,幼小植株分开,核心要点突破,一、植物组织培养的基本过程及影响因素,1培养过程,(1)菊花组织培养过程,核心要点突破,(2)月季的花药培养,核心要点突破,2影响植物组织培养的因素,(1)内因：植物的种类，同一植物材料的年龄、保存时间的长短等。,(2)外因,营养,a矿质元素。,b有机物。,调节剂(生长素、细胞分裂素),a使用顺序不同结果不同。,b两者用量比例不同发育方向不同。,环境条件：温度、pH、光照等。,核心要点突破,【易误警示】,一旦发现培养物被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理。,11,、凡为教者必期于达到不须教。对人以诚信，人不欺我,;,对事以诚信，事无不成。,12,、首先是教师品格的陶冶，行为的教育，然后才是专门知识和技能的训练。,13,、在教师手里操着幼年人的命运，便操着民族和人类的命运。,2024/11/24,2024/11/24,24 November 2024,14,、孩子在快乐的时候，他学习任何东西都比较容易。,15,、,纪律是集体的面貌，集体的声音，集体的动作，集体的表情，集体的信念。,16,、一个人所受的教育超过了自己的智力，这样的人才有学问。,17,、好奇是儿童的原始本性，感知会使儿童心灵升华，为其为了探究事物藏下本源。,十一月 24,2024/11/24,2024/11/24,2024/11/24,11/24/2024,18,、人自身有一种力量，用许多方式按照本人意愿控制和影响这种力量，一旦他这样做，就会影响到对他的教育和对他发生作用的环境。,2024/11/24,2024/11/24,核心要点突破,3实验操作中应注意的几个问题,(1)材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。,(2)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。,(3)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照；而在后期均需光照。,核心要点突破,即时应用,1下列有关花药离体培养，说法错误的是(),A对材料的选择最常用的方法是焙花青铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色,B材料消毒时需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或次氯酸钙溶液浸泡，最后用无菌水冲洗,核心要点突破,C接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照,D若接种的花药长出愈伤组织或形成胚状体后，要适时转换培养基，以便进一步分化成再生植株,解析,：,选A。,确定花粉发育的时期最常用的方法是醋酸洋红法，有些植物细胞核不易着色时，需采用焙花青铬矾法。,核心要点突破,二、植物激素在组织培养过程中的重要作用,生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为：,核心要点突破,激素使用,实验结果,使用顺序,先生长素后细胞分裂素,有利于细胞分裂，但细胞不分化,先细胞分裂素后生长素,细胞既分裂也分化,生长素与细胞分裂素同时使用,分化频率提高,生长素用量与细胞分裂素用量的比例,该比值高时,利于根的分化，抑制芽的形成,该比值低时,利于芽的分化，抑制根的形成,该比值适中时,促进愈伤组织的生长,核心要点突破,即时应用,2利用植物组织培养的方法可快速、大量地繁殖植物。在培养过程中，取该植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中，花芽的生长状况如下表所示：,核心要点突破,核心要点突破,请据表回答下列问题：,(1)在此过程中能实现脱分化的花芽是_组。从实验结果可以看出，能诱导新芽形成的条件是_,_。,核心要点突破,(2)上述实验结果表明，在植物组织培养过程中，诱导芽和根形成的关键是_,_。,在生产实践中，欲快速、大量获得此植物的花芽，可选用_组的培养基进行大量生产。,核心要点突破,答案,：(1)BCD细胞分裂素浓度大于生长素浓度(2)培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比)D,(2009年高考山东卷)人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：,高频考点例析,考点一 植物组织的培养过程及应用,例1,高频考点例析,高频考点例析,请回答：,(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行,。接种前，要对人参根进行,。,(2)用于离体培养的根切块，叫做,。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于,污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于,污染。,高频考点例析,(3)用少量,酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。,(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用方法，操作时应采用,加热。,高频考点例析,【解析】,(1)灭菌是指用强烈的物理或化学的方法，杀死物体内外的一切微生物，包括芽孢和孢子。消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。在组织培养过程中要防止杂菌的污染，需要对固体培养基进行灭菌，对人参根进行消毒。,高频考点例析,(2)用于离体培养的离体的植物组织或器官(根切块)称为外植体。单个或少数微生物细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。我们可以根据菌落的特征判断微生物的种类。霉菌的菌落较大，肉眼可见许多毛状物，呈棕色、青色等，细菌菌落常表现为湿润、黏稠，有光泽。,高频考点例析,(3)果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间层，使愈伤组织分离。,(4)人参皂苷溶于水溶性有机溶剂，可以用萃取法从培养物干粉中提取。萃取时要采用水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，用明火加热容易引起燃烧、爆炸。,【答案】,(1)灭菌消毒(2)外植体真菌(霉菌)细菌(3)果胶(4)萃取(浸取)水浴,高频考点例析,考点二 植物激素在组织培养过程中的作用,例2,(2009年高考上海卷)回答下列有关植物组织培养的问题。,(1)用于植物组织培养的植物材料称为_。,(2)组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的过程称为_。,高频考点例析,(3)在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系：,高频考点例析,高频考点例析,当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时，_,_；,_；,_。,高频考点例析,(4)若植物激素Y是生长素，在植物组织培养中其主要作用是,；则植物激素X的名称是,。,(5)生产上用试管苗保留植物的优良性状，其原因是,。,高频考点例析,【解析】,(1)植物组织培养时所取材料称为外植体。,(2)让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程，称为脱分化。,(3)据图可得当激素X与激素Y的浓度比为1时，未分化的细胞群形成愈伤组织；当激素X与激素Y的浓度比大于1时，未分化的细胞群分化形成芽；当激素X与激素Y的浓度比小于1时，未分化的细胞群分化形成根。,高频考点例析,(4)生长素的作用是促进细胞生长、分裂和分化；激素X能促进细胞分裂，是细胞分裂素。,(5)试管苗为无性繁殖系，能够保持亲本的一切性状，不发生性状分离。,高频考点例析,【答案】,(1)外植体(2)去分化(脱分化),(3)未分化细胞群经分裂形成愈伤组织当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，未分化细胞群分化形成芽当植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时，未分化细胞群分化形成根,(4)促进细胞的生长(伸长)、分裂和分化细胞分裂素,(5)组织培养形成试管苗的过程属于无性繁殖，后代不发生性状分离,随堂即时巩固,点击下载,
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