X8月季的花药培养讲解

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,*,专题三 植物的组织培育技术,课题2 月季的花药培育,秋水仙素处理,花药离体培育,单倍体育种,AABBaabb,P,AaBb,F,1,AAbb,AB,Ab,aB,ab,单倍体,植株,AABB,AAbb,aaBB,aabb,原理：,细胞的全能性,植株矮小，高度不育,月季,(,Rosa chinensisJacq.,),玫瑰,(Rosa rugosaThunb.),一年多生，花朵较大，花茎光滑、茎上刺少而粗，香味寡淡，果实圆形。,一年一生，花朵较小，花茎有刚毛、茎上刺多而小，香味浓郁，果实扁圆形。,被子植物：,种子,有果皮和种皮,包被的植物,。,被子植物和裸子植物,裸子植物：,种子,没有果皮,，,但有种皮,包被的植物。,实例：,向日葵、梨、月季等,开花并结果的植物,。,实例：松、杉、柏,等。,花的构造,花丝：输送养分,花药：囊状构造，内有很多花粉(细胞,2,、花粉母细胞,(,小孢子母细胞,),花粉,(,未成熟,),即：,单倍体的生殖细胞,3,、发育阶段：,四分体时期、单核期、双核期,一被子植物的花粉发育,1,、雄蕊,根底学问,减数分裂,花粉管细胞核,生殖细胞核,花粉发育过程图,小孢子母细胞,花粉母细胞,4,个小孢子,减数分裂,小孢子,四分体,时期,单核居中期,单核靠边期,双核期,有丝分裂,2,个精子,有丝分裂,养分细胞,单核期,生殖细胞,1花粉母细胞2n,4个小孢子(小孢子四分体)n,减分,有分,1个花粉管细胞核n,1个生殖细胞核n,有分,2,个精子,单核居中期n,单核靠边期n,即,4,个单倍体细胞,双核期,单核期,花粉发育过程,基因型一样,雌蕊的构造,二产生花粉植株(单倍体植株)的两种途径,花粉,花粉,胚状体,愈伤组织,丛芽,生根,移栽,脱分化,分化,再分化,诱导,脱分化,说明：两种途径之间并没有确定的界限，主要取决于培育基中激素的种类及其浓度的配比。,根底学问,花粉,花粉,胚状体,愈伤组织,丛芽,生根,移栽,脱分化,分化,再分化,诱导,脱分化,根底学问,胚状体(体细胞胚或花粉胚,组织培育过程中，某些离体的体细胞或花粉细胞转变成的与胚特别相像的构造。(也具有胚芽、胚根、胚轴等构造,胚状体的发育过程和正常胚类似。,二产生花粉植株(单倍体植株)的两种途径,三影响花药培育的因素,1、材料的选择,此外，亲本生长条件、材料低温预处理、接种密度等,2、培育基的组成,从,花药,所处时期看：,从,花粉,发育时期看：,从,花蕾,开放程度看：,初花期,(,花期早期,),的花药,单核期,(,单核靠边期,),的花粉,完全未开放的花蕾,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？,想一想,为什么选择完全未开放的花蕾作花药离体培育的材料？,花瓣松动，微生物可能侵入到花药,，给消毒带来困难。,2,、含菌少、易消毒,1、可选择到单核期的花药,试验操作,1,、材料的选取,2,、材料的消毒,3、接种和培育,4,、,鉴定和筛选,1,、材料选取,通过镜检确定花粉是否处于适宜的发育期：,最常用的方法：醋酸洋红法(将细胞核染成红色,某些植物的花粉细胞核不易着色：焙花青-铬矾法，将花粉细胞核染成蓝黑色。,从花药的时期看：,从花粉发育期看：,从花蕾开程度看：,选择适宜的月季花药,初花期的花药,单核期的花粉,完全未开放的花蕾,2,、材料的消毒,花,蕾,70酒精,约30s,无菌水,清洗,无菌吸水纸 吸干水分,0.1氯化汞溶液,无菌水,冲洗,提示：用于培育花药的花蕾，外面有花萼、花瓣爱护，通常处于无菌状态，所以只需将整个花蕾消毒即可。,思考：月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比，二者有何不同？,在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。,在,无菌条件下,除去,花蕾的萼片和花瓣，取出花药,b,、要彻底去除花丝,取出花药后马上接种于培育基上，每瓶接种花药7-10个。,剥取花药,a,、尽量不损伤花药,接种,留意：,3、接种和培育,温度掌握在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。,培育,培育20-30天后，花药分裂形成愈伤组织或胚状体,假设形成胚状体：一个花药会产生大量幼小植株，必需尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培育基上。,假设形成愈伤组织：应准时将愈伤组织转移到分化培育基上，以便进一步分化出再生植株,在花药培育中，特殊是通过愈伤组织形成的花粉植株，染色体组的数目常常会发生转变。主要缘由是养分核和生殖核融合造成的,4,、鉴定和筛选,菊花组织培育与月季花药离体培育的比较,比较项目,菊花组织培养,月季花药离体培养,原理,植物激素,染色体倍性的鉴定,材料,培养结果,细胞的全能性,体细胞,花药(花粉,正常植株,单倍体植株,不必添加,需要添加,不需要,需要,Thanks!,提示：,二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。精子在花粉管中形成,三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞再进展一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个养分核和两个精子。,