《DNA重组技术的基本工具》课件七（）（人教版选修3）

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,烟草,据,WTO,调查：,2004,年全世界因狂犬病致死人数约,5.5,万人,中国卫生部通报：,2004,年,月，狂犬病列法定报告传染病死亡数之首。,发病死亡率近,100%,能产生狂犬病抗体蛋白的转基因,烟草据WTO调查：2004年全世界因狂犬病致死人数约5.5,每,100kg,猪或牛的胰腺中仅可提取,45g,。,1979,年，美国将,人的胰岛素基因,重组到,大肠杆菌,内，实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。,治疗糖尿病特效药,据,WTO,调查：,2005,年全世界约有糖尿病患者,1.8,亿人，我国约,6000,万。,胰岛素,思考,：,转基因技术,实现了,一种生物,的某些,性状,在,另一种生物,中,表达,。,这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关？,密码子在生物界是的！,DNA(,基因,),mRNA,蛋白质,(,性状,),转录,翻译,通用,每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取45g。1979年,问题探讨：,苏云金杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。,让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达，可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。,想一想,需要做哪些关键工作？,苏云金杆菌,毒蛋白,普通棉花抗虫棉,问题探讨：苏云金杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。苏云,一,、,“,分子手术刀,”,二,、,“,分子缝合针,”,三,、,“,分子运输车,”,转基因,一、“分子手术刀”转基因,思考：,自然界是否存在一种生物的,DNA,进入另一生物的情况？,动物容易让外来,DNA,侵入自身而得以遗传吗？,为什么？植物呢？,单细胞生物，容易遭到入侵吗？,单细胞生物并没有在进化中灭绝，而是产生了一些特殊的酶来防范。这些酶应该有什么特点？,可能酶能识别外来侵入的,DNA,并将其分解，而对自身的,DNA,不能起作用。,“,分子手术刀,”,限制性核酸内切酶,思考：自然界是否存在一种生物的DNA进入另一生物的情况？,一、限制性核酸内切酶,“,分子手术刀,”,主要来源：,种类与命名：,作用特点：,作用结果：,原核生物,阅读“分子的手术刀”,2min,一、限制性核酸内切酶“分子手术刀”主要来源：原核生物阅,一、限制性核酸内切酶,“,分子手术刀,”,主要来源：,种类与命名：,作用特点：,作用结果：,识别,特定核苷酸序列,原核生物,产生黏性末端或平末端,Go on,切断,磷酸二酯键,几种最常用的限制酶及其识别和作用位点,EcoR,Sam,Hind,BamH,GAATTCCTTAAG,CCCGGGGGGCCC,AAGCTTTTCGAA,GGATCCCCTAGG,一、限制性核酸内切酶“分子手术刀”主要来源：识别特定核,种类与命名：,现在已经从约,300,种微生物中分离出了约,4000,种限制性内切酶,(,限制酶,),。,E,co,R,S,ma,粘质沙雷氏杆菌,（,Serratia,marcesens,）,大肠杆菌,（,Escherichia,coli,R,）,练习：流感嗜血杆菌的,d,菌株,(Haemophilus influenzae d),中先后分离到,3,种限制酶，则分别命名为,:,Hind,、,Hind,和,Hind,种类与命名：现在已经从约300种微生物中分,DNA重组技术的基本工具课件七（）（人教版选修3）,Sma,平末端平末端,Sma平末端平末端,EcoR,黏性末端,黏性末端,EcoR黏性末端黏性末端,EcoR,黏性末端,黏性末端,Go back,重复演示,EcoR黏性末端黏性末端Go back重复演示,GAATTC,CTTAAG,GAATTC,CTTAAG,EcoR,G,AATTC,CTTAA,G,G,AATTC,CTTAA,G,不同来源的,DNA,片段混合,将不同种来源的,DNA,片段连接起来,生物,A,基因片段,生物,B,基因片段,G,AATTC,CTTAA,G,G,AATTC,CTTAA,G,酶切,GAATTCGAATTCEcoRGAA,二、,“,分子缝合针,”,DNA,连接酶,分类：,E,coli DNA,连接酶,T,4,DNA,连接酶,作用：,P,5,二、“分子缝合针”DNA连接酶分类：,可把黏性末端之间的,缝隙“缝合”,起来，,Ecoli DNA,连接酶或,T,4,DNA,连接酶,即,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，Eco,T,4,DNA,连接酶,还可把,平末端之间的缝隙“缝合”,起来，但效率较低,T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效,DNA,连接酶与,DNA,聚合酶是一回事吗？为什么？,不是一回事。相同点：形成磷酸二酯键,但是：,1,）,DNA,聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键；而,DNA,连接酶是在两个,DNA,片段之间形成磷酸二酯键,2,）,DNA,聚合酶需要以一条,DNA,链为模板；而,DNA,连接酶不需要模板。,DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？不是一回事。,DNA重组技术的基本工具课件七（）（人教版选修3）,DNA重组技术的基本工具课件七（）（人教版选修3）,三、,“,分子运输车,”,基因进入受体细胞的载体,载体需要的条件：,有,1,多个限制酶切点,对受体细胞无害,导入基因,能在受体细胞中复制、表达,有某些标记基因，便于筛选,常用运载体：,细菌的质粒,噬菌体或某些动植物病毒,假如目的基因导入受体细胞后不能复制或不能转录，转基因生物能有预想的效果吗？,作为分子运输车,载体，如果没有切割位点将会怎样？,霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分子运输车吗？,目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？,三、“分子运输车”基因进入受体细胞的载体载体需要的条,最常用的质粒,大肠杆菌的质粒,试分析其作为载体的优点？,最常用的质粒大肠杆菌的质粒试分析其作为载体的优点？,DNA重组技术的基本工具课件七（）（人教版选修3）,2,7,4,8,3,6,1,5,27483615,