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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,皂角刺中黄酮提取及其抗氧化性研究,2024/11/14,皂角刺中黄酮提取及其抗氧化性研究2023/10/5,1,二、皂角刺概述,一、引言,三、实验中所用到的仪器,四、皂角刺中黄酮的测定,六、结论,五、皂角刺中黄酮的抗氧化性研究,目录,七、致谢,2024/11/14,二、皂角刺概述 一、引言 三、实验中所,2,一、引言,皂角刺中是一种传统的中药,在临床上有着大量的应用。它含有大量的黄酮,黄酮是一种很强的抗氧化剂,可有效清除体内的氧自由基,这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上,这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老,也可阻止癌症的发生。因此本文将对皂角刺中黄酮的含量进行了测定,并对其氧化性进行研究,以期对皂角刺药理作用的开发提供提供有用的资料。,2024/11/14,一、引言皂角刺中是一种传统的中药,在临床上有着大量的应用。它,3,二、皂角刺概述,皂角刺,(,Chinese honeylocust spine,),又称皂角针,为豆科落叶乔木植物皂荚树的棘刺。分布较广。,2024/11/14,二、皂角刺概述皂角刺2023/10/5,4,皂角刺概述,皂角刺化学成分,皂荚皂甙,黄酮,氨基酸,棕榈酸,硬酯酸,油酸,酚类,多元醇,2024/11/14,皂角刺概述 皂角刺化学成分皂荚皂甙黄酮氨基酸棕榈酸硬酯酸油酸,5,抗菌、抗炎作用,3,1,5,4,2,药理作用,6,降血脂等,治疗乳腺增生,等疾病,抗肿瘤作用,免疫调节与抗过敏作用,皂角刺药理作用,抗凝血作用,抗菌、抗炎作用31542药理作用6降血脂等治疗乳腺增生等疾病,三、主要仪器,电,子,天,平,HCR-3018,高速离心机,恒温水浴锅,2024/11/14,三、主要仪器电HCR-3018高速离心机恒温水浴锅2023/,7,三、主要仪器,超波清洗器,循环水真空泵,DJZ型粉碎机,2024/11/14,三、主要仪器超波清洗器循环水真空泵DJZ型粉碎机2023/1,8,四、皂角刺中黄酮测定,芦,丁,标,准,曲,线,绘,制,2024/11/14,四、皂角刺中黄酮测定芦2023/10/5,9,皂角刺中黄酮测定实验流程,称取2.00g皂角刺(加入20mL,60%,乙醇),超声30min,抽滤,定容过夜,离心取上清液,加入药品定容,测定,移取,1ml,40,皂角刺中黄酮测定实验流程称取2.00g皂角刺(加入20mL6,皂角刺中黄酮测定数据,2024/11/14,皂角刺中黄酮测定数据2023/10/5,11,五、皂角刺中黄酮抗氧化性研究,1、脂质体系中抗氧化能力测定,2、Fe,3+,还原能力测定,3、OH清除能力测定,4、DPPH清除能力,2024/11/14,五、皂角刺中黄酮抗氧化性研究1、脂质体系中抗氧化能力测定20,12,1、,脂质体系中抗氧化能力测定(抑制率),实,验,步,骤,1mL LLS+1mLFeCl,3,+1mLV,c,+1mL,样品,混,匀,避光,37,水浴,1h,加入,TCA-TBA-HCl,混合液,避光,沸水煮,15min,迅速,冷却,离心取上清液,在,532nm,处测定吸光度,As,以,1mL,蒸馏水为空白测定吸光度,Ac,2024/11/14,1、脂质体系中抗氧化能力测定(抑制率)实1mL LLS+1,13,1、,脂质体系中抗氧化能力测定(抑制率),测定数据以及抑制率,抑制率%=(A,c,-A,s,/A,s,)100,2024/11/14,1、脂质体系中抗氧化能力测定(抑制率)测定数据以及抑制率,14,1、,脂质体系中抗氧化能力测定(抑制率),以黄酮浓度,/,(,ug/mL,)为横轴,抑制率为纵轴作的曲线如下图,随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力(抑制率)也增加。,2024/11/14,1、脂质体系中抗氧化能力测定(抑制率)以黄酮浓度/(ug/m,15,2、Fe,3+,还原能力测定,实,验,步,骤,1mL,样品,+2.0mL PBS,缓冲液,+2.0mL,铁氰化钾,摇匀,50,水浴,20min,迅速冷却,加入,2mLTCA,混匀,3000r/min,离心,10min,取,2mL,上清液,+0.4mLFeCl,3,+2.0mL,蒸馏水,以蒸馏水调零 以,Vc,代替样品作为阳性对照,在,700nm,测定吸光度,2024/11/14,2、Fe3+还原能力测定实1mL样品+2.0mL PBS缓冲,16,2、Fe,3+,还原能力测定,Fe3+,还原能力测定表格,.doc,以黄酮浓度,/,(,ug/mL,)为横轴,样品吸光度为纵轴作的曲线如下图,随着皂角刺黄酮浓度的升高样品吸光度逐渐增大,,即,Fe,3+,还原能力随着黄酮浓度的增加越来越强,2024/11/14,2、Fe3+还原能力测定Fe3+还原能力测定表格.doc以黄,17,3、OH清除能力测定,实,验,步,骤,硫酸亚铁铵、水杨酸,-,乙醇溶液,和样品各,1mL+0.03mLH,2,0,2,摇匀,37,水浴,30min,510nm,测定吸光度,Ax,以蒸馏水代替样品作空白对照测吸光度,A0,以,Vc,作为阳性对照,样品本底吸光度用蒸馏水代替双氧水测定吸光度,Ax0,每个浓度平行测定,3,次,2024/11/14,3、OH清除能力测定实硫酸亚铁铵、水杨酸-乙醇溶液摇匀37,18,3、OH清除能力测定,OH,清除能力测定表格,.doc,以黄酮浓度,/,(,ug/mL,)为横轴,清除率,%,为纵轴作的曲线如下图,随着黄酮浓度的增加,皂角刺的,OH,清除能力越来越弱。,2024/11/14,3、OH清除能力测定OH清除能力测定表格.doc以黄酮浓,19,4、DPPH清除能力,DPPH,清,除,能,力,数,据,及,计,算,DPPH清除率=(1-(A,i,-A,j,/A,e,)100,2024/11/14,4、DPPH清除能力DPPHDPPH清除率=(1-(Ai-,20,DPPH清除能力,以黄酮浓度,/,(,ug/mL,)为横轴,,DPPH,清除率,%,为纵轴作的曲线如下图,随着黄酮浓度的增加,皂角刺的,DPPH,的清除率越来越强。,2024/11/14,DPPH清除能力以黄酮浓度/(ug/mL)为横轴,DPPH,21,六、结论,根据芦丁标准曲线A=0.0379C+0.0003,稀释倍数为25,,黄酮含量为3.48mg/mL;,算出皂角刺黄酮提取率为8.70%。,1、皂角刺中黄酮的提取,2024/11/14,六、结论根据芦丁标准曲线A=0.0379C+0.00031、,22,六、结论,1)随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力(抑制率)也增加,2)随着皂角刺黄酮浓度的升高样品吸光度逐渐增大,即Fe,3+,还原能力随着黄酮浓度的增加越来越强;,3)随着黄酮浓度的增加,皂角刺的OH清除能力越来越弱,4)随着黄酮浓度的增加,皂角刺的DPPH的清除率越来越强。,2,、皂角刺黄酮抗氧化性研究,2024/11/14,六、结论1)随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力(抑制率),23,七、致谢,感谢老师百忙之中给予指导,2024/11/14,七、致谢感谢老师百忙之中给予指导2023/10/5,24,
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