爱乙梅实验室快速检测-课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,预防艾滋病、梅毒,、,乙肝母婴阻断,实验室检测,预防艾滋病、梅毒、乙肝母婴阻断,1,目录,1.乙肝五项实验室快速检测。,2.HIV实验室快速检测。,3.梅毒螺旋体抗体非特异性反应检测（,TRUST,）。,4.,梅毒螺旋体抗体检测,(ELISA,法,),。,5.,乙肝人免疫球蛋白。,目录1.乙肝五项实验室快速检测。,2,乙肝五项实验室快速检测,试剂名称,：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）,检测原理,：HBsAg,HBeAg检测试纸条采用双抗体夹心法，试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的多克隆抗体和控制区(C)的相应抗体。HBsAb检测试纸条采用双抗原夹心法，试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的乙肝表面抗原和控制区(C)的相应抗体。测试时，血清/血浆标本滴入试剂板加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的待测物质，在测试区内（T）出现一条红色条带,则是阳性结果。如标本中不含有相应的待测物质，则测试区内（T）将没有红色条带，则是阴性结果。无论相应的待测物质是否存在于标本中，一条红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。HBeAb,HBcAb检测试纸条采用竞争抑制法，试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的单克隆抗体和控制区(C)的相应抗体。测试时，血清/血浆标本滴入试剂板加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体，则同膜上测试区(T)的单克隆抗体竞争与预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。如标本中没有相应的抗体，预包被在乳胶颗粒上的相应抗原则同膜上测试区(T)的单克隆抗体全部结合。强阳性标本，测试区内（T）将没有红色条带，弱阳性标本，测试,区内（T）将有一条非常弱的红色条带，阴性标本，测试区内（T）将会出现明显的红色条带。无论相应的抗体是否存在于标本中，一条红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。,乙肝五项实验室快速检测 试剂名称：乙型肝炎病毒表面,3,标本收集,：,标本收集后应尽快分离出血清或血浆以避免溶血。检测时应尽量使用新鲜的标本。标本若不能及时送检，可在2-8冷藏3天。长期保存需冷冻于-20，忌反复冻融。,操作步骤,：,在进行测试前必须先完整阅读使用说明书，使用前将试剂板和血样标本恢复至室温（20-30）。,1.从原包装铝箔袋中取出试剂板，在小时内应尽快地使用。,2.用吸管吸取血清/血浆标本，逐滴（每孔2-3滴）加入试剂板的五个加样孔中。,3.等待红色条带的出现，测试结果应在15分钟时读取。20分钟后判定无效。,检验结果判定：,阳性（+）：两条红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阳性结果表明：标本中含有待测物质。,阴性（-）：仅质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）内无红色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。,无效：质控区（C）未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试纸条已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。,注意：测试区（T）内的红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观察时间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判为阳性结果。,标本收集：标本收集后应尽快分离出血清或血浆以避免溶血。检测时,4,强阳,性（,+,）：仅质控区（,C,）出现一条红色条带，在测试区（,T,）内无红色条带出现。阳性结果表明：标本中含有待测抗体。,弱阳,性（,+,）：质控区（,C,）出现一条红色条带，在测试区（,T,）内有非常弱的红色条带出现。弱阳性结果表明：标本中含有少量待测抗体。,阴,性（,-,）：两条红色条带出现，一条位于测试区（,T,）内，另一条位于质控区（,C,）。阴性结果表明：标本中检测不出待测抗体。,无效：质控区（,C,）未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试纸条已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。,强阳性（+）：仅质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）,5,注意事项：,1.,乙肝两对半血清,/,血浆检测试剂板适用于测试血清,/,血浆标本。,2.,由于在技术上和操作上可能出现的失误，同时也由于标本中存在干扰物,试剂结果有可能错误。对可疑结果应作相应的进一步检测。,3.,乙肝两对半血清,/,血浆检测试剂板只是定性的筛选乙肝病毒血清标志物的存在，但不能确定其在标本中的含量。,4.,测试结果应在,15,分钟时读取，,20,分钟后判定无效。,注意事项：,6,HIV,实验室快速检测,试剂名称：,艾滋病毒,1/2,型抗体快速检测（胶体金法）,检测原理：,HIV1/2,试剂盒采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术来定性检测血液中是否含有,HIV1/2,抗体，试剂盒中含有被事先固定于膜上测试区,(T),的重组,HIV,抗原和质控区,(C),的相应抗体。测试时，血标本滴入试剂盒加样孔（,S,）内，血标本中的,HIV1/2,抗体与预包被在膜上的重组抗原,-,乳胶结合物反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析，在测试区（,T,）与固定在膜上的重组,HIV,抗原反应。如果血液中含有抗,HIV-1,或,HIV-2,抗体，在测试区内（,T,）会出现一条红色条带，表明是阳性结果。如果在测试区内（,T,）没有出现红色条带，则血液中不含有抗,HIV1/2,抗体，表明是阴性结果。无论抗,-HIV1/2,抗体是否存在于血液中，混合物都会继续向上层析至质控区（,C,），质控区的相应抗体与乳胶结合物反应出现一条红色条带。质控区内（,C,）所显现的红色条带是判定层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。,HIV实验室快速检测试剂名称：艾滋病毒1/2 型抗体快速检测,7,结果判定：,阳,性（,+,）：两条红色条带出现。一条位于测试区内（,T,），另一条位于质控区内（,C,）。,阴,性（,-,）：仅质控区（,C,）出现一条红色条带，在测试区内（,T,）无红色条带出现。,无效：质控区（,C,）未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。,注意：由于样本中抗,-HIV,抗体滴度的不同，测试区（,T,）内的红色条带会显现出不同深浅的颜色。但是，本试剂盒的测试结果不能做为判定样本中抗体滴度高低的依据。,爱乙梅实验室快速检测-课件,8,标本收集,：,血标本的采集：指尖、耳垂末梢或静脉标本采集后应尽可能立即使用，抗凝血应在,24,小时内使用以避免融血。血清,/,血浆标本的收集：血清,/,血浆标本由静脉采血后离心获得，标本在,2-8,可保存一周。如长期保存需冷冻。避免反复冻融。,操作步骤：,在进行任何测试前必须先完整阅读使用说明，使用前将检测试剂盒和全血,/,血清,/,血浆标本恢复至室温（,20-30,），取出反应缓冲液并放置,20,分钟使其恢复至室温。,1,从原包装铝箔袋中取出试剂盒（注意：在打开铝箔袋前应先恢复至室温）。在,1,小时内应尽快地使用，特别是在室温高于,30,或是在高度潮湿的环境中应尽快地使用。,在一小时内测试将会得到最佳效果。,2,将试剂盒置于干净平坦的台面上，用吸管吸取指尖血或静脉血后滴入,1,滴全血,/,血清,/,血浆（约,25ul,）于加样孔,S,中，随后加入,1,滴缓冲液于加样孔,S,中。切勿将指尖血直接滴入加样孔内。,3,等待红色条带的出现，在,15,分钟左右读取测试结果。关键要注意，在红色条带出现以前，背景要清晰，特别当样本中含有低滴度的抗,-HIV1/2,抗体，会导致出现的,T,线颜色很淡，此时更需注意背景要清晰。在,20,分钟后读取的结果无效。,标本收集：,9,注意事项：,HIV1/2,乳胶层析法检测试剂盒仅用于体外诊断，并适用于检测全血,/,血清,/,血浆样本中的抗,-HIV1/2,抗体。这项测试仅表示样本中抗,-HIV1/2,抗体的存在，而不能作为机体感染,HIV-1,或,HIV-2,的标准。为了确保结果的准确性，可对样本用,ELISA,或,WesternBlot,作进一步的分析。同所有的诊断试剂一样，检测结果必须结合内科医生得出的其它临床症状进行诊断。,如果测试结果呈阴性并有临床症状存在，可建议使用其他临床方法进行测试。阴性结果并不能排除感染,HIV-1,或,HIV-2,的可能性。,注意事项：,10,梅毒螺旋体抗体非特异性反应检测（,TRUST,）,检测方法：,甲苯胺红不加热血清学试验（,TRUST,）,实验原理,：,采用性病研究所实验室玻片试验（,VDRL,）抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成。将可溶性抗原先吸附于适当大小的颗粒性载体的表面，然后与相应抗体作用，在适当的电解质存在的条件下，出现凝集现象，既可定性检测，又能半定量测定。该方法简便，敏感度较高，在临床检验中被广泛应用。,标本收集：,用无抗凝管抽取静脉血,2-3ml,，离心（,1500-3000,转,/,分）分离出血清。不能立即测定的标本应保存于,2-8,的冰箱，于,3,内检测，超过,3,天应分离出血清于,2-8,的冰箱，一周内检测完毕。,梅毒螺旋体抗体非特异性反应检测（TRUST）检测方法：甲苯胺,11,操作步骤：,1,分别吸取,50ul,梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸片的两个圆圈中。,2,取待检血清,50ul,（不需灭活）置于纸片的另一圆圈中。,3,用专用滴管和吸头垂直分别滴加,TRUST,试剂,1,滴于上述血清中。,4,按每分钟,100,转摇动,8,分钟，肉眼观察结果。,结果判定：,1,阳性反应（,+,+,）：可见中等或较大的红色凝集物。,2,弱阳性反应（,+,+,）：可见较小的红色凝集物。,3,阴性反应（,）：可见均匀的红色抗原颗粒而无凝集物。,操作步骤：,12,注意事项：,1.,操作前请仔细阅读操作规程。,2.,试剂盒存放于,2-8,摄氏度环境中；使用前将试剂盒置于室温下平衡，试验应在室温,23-29,条件下进行。,3.,批号不同的试剂盒不能混用。,4.,待测标本必须符合要求，溶血标本不能进行检测。,5.,如做半定量试验，可将待检血清用生理盐水作倍比稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。,6.,本试验系非特异性反应需结合临床进行综合分析，必要时作特异性密螺旋体试验进行确认。,7.,使用后所有物品，应按传染源处理。,8.TRUST,抗原在使用前必须充分摇匀。,注意事项：,13,检测方法：,酶联免疫吸附试验（,ELISA,）,实验原理：,双抗原夹心法,用精制的基因工程表达的酶毒螺旋体特异性抗原色被酶粒板及标记辣根过氧化酶，同时加入待测血清或血浆与酶标记抗原以,TMB,显色。本方法适用于献血员筛选，婚检和临床诊断梅毒螺旋体感染。,标本收集：,用肝素锂抗凝管抽取静脉血,2,3ml,，离心（,1500,3000,转分）,15,分钟分离出血浆，不能立即测定的标本应保存于,2,8,于,3,日内检测，超过,3,天应分离出血浆于,2,8,的冰箱内保存，一周内检测完毕。,梅毒螺旋体抗体检测,(ELISA,法,),检测方法：酶联免疫吸附试验（ELISA）梅毒螺旋体抗体检测,14,操作步骤：,1,取出酶标板条固定于板架上，按顺序编号，室温平衡,18-2