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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,精选ppt,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,二级,三级,四级,五级,精选ppt,*,课题,1,微生物的实验室培养,微生物的实验室培养条件：,合适的营养和环境条件,确保其他微生物无法混入,1,精选ppt,课题1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养条件：合适的营,一,.,培养基,1.,概念：,按照微生物对,营养物质,的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。,需要加入琼脂（凝固剂）,多糖,2,精选ppt,一.培养基 1.概念：按照微生物对营养物质的不同需,2.,种类：,按物理形态分,液体培养基、半固体培养基,固体培养基,应用微生物分离、鉴定、计数和,菌种保存等方面,按照培养基用途（功能）分,基础培养基,选择培养基,鉴别培养基,按照培养基的成分来分,合成培养基、天然培养基、半合成培养基,各自优缺点？,3,精选ppt,2.种类：液体培养基、半固体培养基应用微生物分离、鉴定、计,选择培养基,不加氮源的无氮培养基,:,分离固氮菌,不加含碳有机物的无碳培养基,:,分离自养型微生物,加入四环素等抗生素的培养基,:,分离导入了目的基因的受体细胞,不加氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基,:,分离杂交瘤细胞,加入高浓度食盐的培养基,:,分离金黄色葡萄球菌,4,精选ppt,选择培养基不加氮源的无氮培养基:4精选ppt,从成分上判断：,牛肉膏蛋白胨培养基,麦芽汁培养基,葡萄糖铵盐培养基,马铃薯蔗糖培养基,天然培养基,天然培养基,合成养基,半合成养基,5,精选ppt,从成分上判断：牛肉膏蛋白胨培养基天然培养基天然培养基合成养基,3.,成分：,水、无机盐、碳源、氮源、（生长因子）,+,满足微生物对,pH,、特殊营养物质、氧气的要求,培养乳酸菌 添加 维生素,培养霉菌,PH,调至 酸性,培养细菌,PH,调至 中性或微碱,6,精选ppt,3.成分：水、无机盐、碳源、氮源、（生长因子）+满足微生物,C,7,精选ppt,C7精选ppt,C,8,精选ppt,C8精选ppt,二,.,无菌技术,1.,无菌技术,2.,消毒和灭菌有何不同？,泛指培养微生物操作中，所有防 止杂菌污染的方法。,无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。,9,精选ppt,二.无菌技术1.无菌技术泛指培养微生物操作中，所有防 止,3.,常用的,消毒,方法：,煮沸消毒法,巴氏消毒法,紫外线,化学药剂消毒法,70-75,30,分钟,80,15,分钟 牛奶,接种室、接种箱或超净工作台,酒精、氯气（水）,10,精选ppt,3.常用的消毒方法：煮沸消毒法70-75 30分钟接种室,11,精选ppt,11精选ppt,接种环,接种针,12,精选ppt,接种环接种针12精选ppt,4.,常用的,灭菌,方法：,灼烧灭菌,干热灭菌,高压蒸汽灭菌,培养基,100kPa 121,15-30min,接种环、接种针、试管口、瓶口,玻璃器皿和金属,13,精选ppt,4.常用的灭菌方法：灼烧灭菌 接种环、接种针、试管,判断下列各项是否需要消毒或灭菌。如需要，选择合适方法。,1,）豆浆,2,）游泳池,3,）超净工作台,4,）玻棒、试管、吸管、锥形瓶,5,）培养细菌用的培养皿,6,）无菌水,7,）牛肉膏蛋白胨培养基,8,）接种环、接种针,9,）实验操作者的双手,14,精选ppt,判断下列各项是否需要消毒或灭菌。如需要，选择合适方法。14精,微生物实验室培养的基本操作程序,计算、称量,溶化,灭菌,倒平板（分装）,接种（方法）,培养,保存,制备培养基,纯化,细菌,调节,PH,15,精选ppt,微生物实验室培养的基本操作程序计算、称量制备培养基纯化调节P,4,、倒平板,冷却至,50,16,精选ppt,4、倒平板冷却至5016精选ppt,1,、为什么需要使锥形瓶口通过火焰？,2,、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？,17,精选ppt,1、为什么需要使锥形瓶口通过火焰？17精选ppt,3,、如何知道灭菌后的培养基是否还有杂菌？,4,、接种细菌后，培养基还需倒置培养吗？,问题讨论,18,精选ppt,问题讨论18精选ppt,复习：,1,、按照用途分培养基可分为哪几类？,其中添加青霉素的培养基为哪种类型？添加伊红,美蓝的为哪种培养基？,2,、培养基的成分都含有哪些？,3,、配制培养基时是先调节,PH,值，还是先灭菌？,4,、无菌操作是如何实现的？,19,精选ppt,复习：1、按照用途分培养基可分为哪几类？19精选ppt,5,、接种：,方法,接种针 穿刺接种,接种环,平板划线,法,玻璃刮铲,稀释涂布,平板法,20,精选ppt,5、接种：20精选ppt,平板划线法,通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌种逐步,稀释分散,到培养基的表面,.,在数次画线后,可以分离到由,一个细胞繁殖,而来的肉眼可见的子细胞,群体,这就是,菌落,.,21,精选ppt,平板划线法21精选ppt,22,精选ppt,22精选ppt,23,精选ppt,23精选ppt,1.,为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在最后一次划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？,操作的第一步灼烧接种环：,每次划线前灼烧接种环：,最后一次划线结束后灼烧接种环：,避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；,杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。,及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。,24,精选ppt,1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在最,2.,在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？,3.,在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？,以免接种环温度太高，杀死菌种。,划线后，线条,末端,细菌的数目比,线条起始处,要,少,，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落,25,精选ppt,2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？以免接种,稀释涂布平板法,菌液,稀释度足够高的菌液里，微生物被分散成,单个细胞,，从而在培养基表面形成,单个菌落,系列梯度,稀释,涂布,到,培养基,26,精选ppt,稀释涂布平板法菌液系列梯度稀释涂布到26精选ppt,27,精选ppt,27精选ppt,28,精选ppt,28精选ppt,问题讨论,涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第,2,步应如何进行无菌操作？,应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。,29,精选ppt,问题讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平,将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入恒温培养箱中培养，,12,h,和,24,h,后观察,观察菌落的,颜色，形状，大小,是否符合某种细菌的菌落特征,未接种的培养基表面如果有菌落生长，说明什么？,30,精选ppt,将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入恒温培养箱中培养，,微生物的恒温培养,微生物的恒温培养,31,精选ppt,微生物的恒温培养微生物的恒温培养31精选ppt,微生物的恒温培养,32,精选ppt,微生物的恒温培养32精选ppt,大肠杆菌菌落特征：绿色有金属光泽,伊红美蓝培养基,33,精选ppt,大肠杆菌菌落特征：绿色有金属光泽伊红美蓝培养基33精选ppt,菌种的保存,1,、临时保藏：,接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于,4,冰箱保存。,2,、长期保存：,甘油冷冻管藏法,34,精选ppt,菌种的保存1、临时保藏：34精选ppt,感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，,如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！,感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，,
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