DNA重组技术的基本工具923426532课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,二级,三级,四级,五级,2020/4/25,#,DNA重组技术的基本工具,DNA重组技术的基本工具,1,烟草,中国卫生部通报：,2004,年,月，狂犬病列法定报告传染病死亡数之首。,发病死亡率近100%,能产生狂犬病抗体蛋白的转基因,烟草中国卫生部通报：2004年月，狂犬病列法定报告传染,2,每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取45g。,1979年，美国将,人的胰岛素基因,重组到,大肠杆菌,内，实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本,，提高了胰岛素的供应量。,治疗糖尿病特效药,据WTO调查：,2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿人，我国约6000,万。,胰岛素,每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取45g。1979年,3,基因工程的产物,基因工程的产物,4,定向基因改造设想,设想一,能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？,能否让细菌“吐出”蚕丝？,设想二,能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？,设想三,定向基因改造设想 设想一能否让禾本科的植物也能够固定空气中的,5,基因工程的概念,DNA重组技术,生物体外,基因,DNA分子水平,人类需要的新生物类型和产品,剪切,拼接,导入,表达,基因工程的概念DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平人类需,6,转基因技术,实现了,一种生物,的某些,性状,在,另一种生物,中,表达,。,普通棉花抗虫棉,转基因技术实现了一种生物的某些性状普通棉花抗,7,问题探讨：,苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。,让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达，可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。,想一想,需要做哪些关键工作？,苏云金芽孢杆菌,毒蛋白,问题探讨：苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。,8,关键步骤：,一：,抗虫基因从苏云金芽孢杆,菌,细胞内,提取出来,二：,抗虫基因,与,载体,DNA,、,棉,花,DNA“缝合”,三：,抗虫基因,进入棉花细胞,关键步骤：一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来二：抗虫,9,上述,关键步骤需要哪些工具？,一：,“分子手术刀”,限制性核酸内切酶,二：,“分子缝合针”,DNA连接酶,三：,“分子运输车”基因进入受体细胞的,载体,上述关键步骤需要哪些工具？一：“分子手术刀”限制,10,一、限制性核酸内切酶“分子手术刀”,1,主要来源：,原核生物,2,种类与命名：,现在已经从约300种微生物中分离出了约4000种限制性内切酶(限制酶)。,粘质沙雷氏杆菌,（,Serratia,marcesens,）,S,ma,大肠杆菌,（,Escherichia,coli,R,）,E,co,R,一、限制性核酸内切酶“分子手术刀”1 主要来源：,11,3,作用特点：,识别,特定核苷酸序列,切断,磷酸二酯键,具有特异性,。,一种,限制酶,只能识别一种,特定的,核苷酸序列，并且能在特定的切点上,切割,DNA分子,3 作用特点：识别特定核苷酸序列,切断磷酸二酯键,12,T,磷酸二酯键,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,A,T磷酸二酯键1234512345 A,13,Go back,Go back,14,限制酶的识别序列：,Go back,限制酶的识别序列：Go back,15,限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条,中心轴线,（如图），中轴线两侧的双链DNA上的碱基是,反向、对称、重复,排列的。,想一想限制酶所识别的序列有什么特点？,限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱,16,5.,作用结果：,产生黏性末端或平末端,5.作用结果：产生黏性末端或平末端,17,Sma,平末端平末端,Sma平末端平末端,18,EcoR,黏性末端,黏性末端,Go back,EcoR黏性末端黏性末端Go back,19,EcoR,黏性末端,黏性末端,Go back,重复演示,EcoR黏性末端黏性末端Go back重复演示,20,二、“分子缝合针”DNA连接酶,作用:,把切下来的DNA片段拼接成新的DNA，即将,脱氧核糖和磷酸,连接起来.,作用原理：,催化磷酸二酯键形成,二、“分子缝合针”DNA连接酶作用:,21,可把黏性末端之间的,缝隙“缝合”,起来，,Ecoli DNA连接酶或T,4,DNA连接酶,即,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，Eco,22,T,4,DNA连接酶,还可把,平末端之间的缝隙“缝合”,起来，但效率较低,T,4,DNA连接酶,T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效,23,常用的载体：质粒,能复制并带着插入的目的基因一起复制,有切割位点,有标记基因的存在，可用含氨苄青霉素的培养基鉴别,常用的载体：质粒能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点,24,课下作业,1.整理、复习本节课的学习的内容；构建知识框架。,2.,做课后作业：思考与探究,。,课下作业1.整理、复习本节课的学习的内容；构建知识框架。,25,DNA重组技术的基本工具923426532课件,26,1,、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。,10月-24,10月-24,Monday,October 21,2024,2,、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。,12:08:53,12:08:53,12:08,10/21/2024 12:08:53 PM,3,、越是没有本领的就越加自命不凡。,10月-24,12:08:53,12:08,Oct-24,21-Oct-24,4,、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。,12:08:53,12:08:53,12:08,Monday,October 21,2024,5,、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。,10月-24,10月-24,12:08:53,12:08:53,October 21,2024,6,、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。,21 十月 2024,12:08:53 下午,12:08:53,10月-24,7,、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。,十月 24,12:08 下午,10月-24,12:08,October 21,2024,8,、业余生活要有意义，不要越轨。,2024/10/21 12:08:53,12:08:53,21 October 2024,9,、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。,12:08:53 下午,12:08 下午,12:08:53,10月-24,10,、,你要做多大的事情，就该承受多大的压力,。,10/21/2024 12:08:53 PM,12:08:53,21-10月-24,11,、,自己要先看得起自己，别人才会看得起你,。,10/21/2024 12:08 PM,10/21/2024 12:08 PM,10月-24,10月-24,12,、,这一秒不放弃，下一秒就会有希望,。,21-Oct-24,21 October 2024,10月-24,13,、,无论才能知识多么卓著，如果缺乏热情，则无异纸上画饼充饥，无补于事,。,Monday,October 21,2024,21-Oct-24,10月-24,14,、,我只是自己不放过自己而已，现在我不会再逼自己眷恋了,。,10月-24,12:08:53,21 October 2024,12:08,谢谢大家,1、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。8月-238月-2,27,