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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,新知探究,酶的固定化技术,1,实验过程,2,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,酶的固定化技术,1,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,实验过程,2,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,随堂测试,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,课堂小结,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,实验,6 -,淀粉酶的固定化及,淀粉水解作用的检测,实验6 -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测,我们通常使用的高果糖浆，是用葡萄糖制造的，它采用了什么技术呢？,我们通常使用的高果糖浆，是用葡萄糖制造的，它采用了什么技术呢,我们日常使用的发酵粉是活的还是死的呢？它是通过什么技术制造的呢？,我们日常使用的发酵粉是活的还是死的呢？它是通过什么技术制造的,1.,认识固定化酶的概念，了解固定化酶的方法，学习制备固定化,-,淀粉酶。,2.,了解淀粉酶水解淀粉的过程，能够进行淀粉水解的测定。,1.认识固定化酶的概念，了解固定化酶的方法，学习制备固定化,.,酶制剂的生产,提取法,定义：采用一定的技术直接从,动植物或微生物,的组织、细胞中将酶提取出来,缺点：,要有充足的原材料，,广泛应用受到限制,.酶制剂的生产提取法定义：采用一定的技术直接从动植物或微,发酵法,常用方法,定义：通过,微生物发酵,获得所需要的酶。,优点：,易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。,化学合成法,缺点：,成本高、已知分子结构的酶,发酵法常用方法定义：通过微生物发酵获得所需要的酶。优点,.,酶在应用过程中存在的问题,天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件,非常敏感，容易失活,溶液中酶很难回收，不能再次利用，,提高了生产成本,反应后，酶会混在产物中，影响产品质量，,难以在工业生产中广泛应用,.酶在应用过程中存在的问题天然酶通常对强酸、强碱、高温,将水溶性的酶用,物理或化学的方法,固定在某种介质上，使之成为,不溶于水而又有酶活性,的制剂。,.,固定化酶,水溶性酶,非水溶性载体,非水溶性酶,（固定化酶）,固定化技术,将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶,吸附法,包埋法,共价交联法,共价偶联法,酶的固定化方法主要可分为四类,吸附法包埋法共价交联法共价偶联法酶的固定化方法主要可分为四类,优点,提高酶稳定性；,可反复或连续使用；成本降低,易于和反应产物分开；,产物溶液无酶残留，简化提纯工艺；,提高产物质量；,酶反应过程可严格控制。,缺点,固定化时酶活性有损失,酶的固定化优缺点,优点提高酶稳定性；缺点固定化时酶活性有损失酶的固定化优缺点,掌握,-,淀粉酶的,固定化；,检测固定化,-,淀粉酶的效果。,实验目的,掌握-淀粉酶的固定化；实验目的,实验原理,-,淀粉酶,-,淀粉酶,糖化淀粉酶,淀,粉,糊,精,麦,芽,糖,葡,萄,糖,实验原理-淀粉酶-淀粉酶 糖化淀粉酶 淀糊麦葡,运用吸附法将,-,淀粉酶的固定在石英砂,上。一定浓度的淀粉溶液经过固定化的,-,淀粉酶催化后，生成,糊精,，使流出液加入,KI-I,2,指示液后呈,红色,，表明水解产物糊精生产。,实验原理,运用吸附法将-淀粉酶的固定在石英砂上。一定浓度的淀粉溶液经,（,2,）,5mmol/L KI-I,2,溶液,称取,0.127g,碘和,0.83g,碘化钾。加蒸馏水,100ml,。,（,1,）可溶性淀粉溶液,取,50mg,可溶性淀粉溶于,100ml,热水中，搅拌均匀。,实验材料制备,（1）可溶性淀粉溶液实验材料制备,（,3,）,a-,淀粉酶的固定化,在烧杯中将,5mg a-,淀粉酶,溶于,4ml,蒸馏水中。再加入,5g,石英砂,，不时搅拌，,30,分钟后装入反应柱中。用,10,倍体积,的蒸馏水洗涤此反应柱以除去未吸附的游离淀粉酶，流速控制为,1ml/min,。,实验材料制备,（3）a-淀粉酶的固定化实验材料制备,固定化装置层析柱,固定化装置层析柱,a-,淀粉酶的固定化,可溶性淀粉溶液,KI-I2,溶液,实验步骤,反应柱,固定化酶,气门心,夹子,5ml,注射器,筛板,淀粉,收集流出液，鉴定,a-淀粉酶的固定化实验步骤反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射,用,50ml,小烧杯称取,5g,石英砂,，加入,4ml,淀粉酶溶液,，缓慢搅拌,30,分钟，使,淀粉酶固定到石英砂上，放入注射器中。,实验步骤,用50ml小烧杯称取5g石英砂，加入4ml淀粉酶溶液，,思考：怎样使石英砂不从注射器中漏出？,夹子、滤纸片,思考：怎样使石英砂不从注射器中漏出？夹子、滤纸片,用,10,倍蒸馏水清洗注射器,注：最后一次清洗时取其上清液,2,滴加到点样板上，同时滴加,1%,淀粉溶液混匀，再加入,KI-I,2,溶液，若溶液变为蓝色，说明未固定到石英砂上的,淀粉酶已完全除去。,用10倍蒸馏水清洗注射器注：最后一次清洗时取其上清液2滴加,将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上，用滴管加淀粉溶液，使淀粉溶液约以,0.3ml/min,的流速过柱。,将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上，用滴管加淀粉溶液，,在流出,1,2mL,反应液后接收约,0.5mL,流出液，加入,1-2,滴,KI-I,2,溶液，观察颜色,。用水稀释淀粉滤液,1,倍后再观察颜色。,实验后，用,10,倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱，放置在,4,冰箱,中，几天后再重复上述实验，看是否有相同的结果。,在流出12mL反应液后接收约0.5mL流出液，加入1-2,1,、,2mL,水,+12,滴,KI-I,2,溶液,2,、,2mL,淀粉液,+12,滴,KI-I,2,溶液,3,、,2mL,淀粉滤液,+12,滴,KI-I,2,溶液,4,、,2mL,淀粉滤液,+12,滴,KI-I,2,溶液,+,稀释,1,倍,实验结果,1、2mL水+12滴KI-I2溶液实验结果,实验结果,1 2 3 4,实验结果 1,实验注意事项,1.,控制滴灌流速。,0.3mL/min,的流速，我们就可以控制每分钟滴管流出量为,每分钟,6,滴,（,6=0.3mL/50uL,）。这样做的目的是控制流速让淀粉和淀粉酶充分接触，反应。,实验注意事项1.控制滴灌流速。,2.,显色,在流出,5mL,后接取,0.5mL,过滤液，然后向试管中加入,1-2,滴,KI-I,2,溶液。切记，,KI-I,2,溶液不要加入太多,，以免碘液颜色覆盖糊精淀粉反应后的颜色。,实验注意事项,2.显色实验注意事项,某一实验小组的同学，欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验，实验材料及用具齐全。,（,1,）酵母细胞的固定常用的方法是,。,包埋法,某一实验小组的同学，欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发,（,2,）该实验小组用所示的装置来进行葡萄糖发酵,图中,a,为固定化酵母；,b,是反应柱。,从上端漏斗中加入反应液的浓度不能过高的,原因是：,。,为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可反复运用，实验过程一定要在,条件下进行。,装置的长导管起到什么作用？,浓度过高酵母细胞因失水过多而死亡,无菌,释放,CO2,防止空气进入。,结束,（2）该实验小组用所示的装置来进行葡萄糖发酵浓度过高酵母细胞,
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