含量测定方法与验证7版

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第四章 药物的含量测定方法与验证,定量分析方法的分类与特点,样品的前处理方法,药品分析方法的验证,第一节 定量分析方法的分类与特点,定量分析方法的计算,药典对药物的,含量限度的表示方法,原料药：多以%表示，有二种情况,按原料药本身形式计算其含量,例 ：阿司匹林（P.,11,）按干燥品计不得少于9,9,.5%,对氨基水杨酸钠按干燥品计不得少于99.0%,凡未规定上限的，药典凡例中规定，其含量上限不得超过101.0%。,由于药物组成不定，需以另一种稳定形式计算含量,例：氢氧化铝,Al(OH),3,以含三氧化二铝（,Al,2,O,3,）计，不得少于,48.0%,制剂：制剂的含量限度表示方法有三种情况,按标示量计算,标示量即规格量，生产厂家的处方量。它是以标示量为,100%,，将测得含量与之相比较，求出相对于标示量的百分含量。,例：维生素,B,1,注射液含维生素,B,1,应为标示量的,95.0%,105.0%,干酵母片含蛋白质不得少于标示量的,40.0%,直接用,%,含量规定范围（主药含量微）,例：复方碘溶液,含,I,应为,4.5%,5.5%,含,KI,应为,9.5%,10.5%,复方氯化钠注射液,含总,Cl,-,量,0.52%,0.58%,含,KCl,量,0.028%,0.032%,含,CaCl,2,2H,2,O 0.031%,0.035%,以重量规定含量范围（多为复方制剂）,例：复方炔诺酮片,炔诺酮 0.540.66mg /片,炔雌醇 31.538.5,g/片,复方磺胺甲噁唑片,SMZ 0.3600.440 g/片,TMP 72.088.0mg/片,2024/10/11,6,一、容量分析法,滴定法,aA+bB cC+dD,（,A,被测药物；,B,滴定液）,（一）、滴定度的概念,T-,与,1ml,规定浓度的标准溶液所相当的被测物的,mg,数。,（二）、滴定度的计算,T=M,A,m,B,a/b,（,mg/ml,）,（三）含量计算,1、直接滴定法,原料药以%表示的制剂,样品%=V,F,T/W,100%,F=N,实,/N,理,2、间接滴定法,（1）、剩余滴定法中须做空白,样品%=（V,空白,V,测,),样,FT/W100%,（2）、生成物滴定法,aA+bB=cC（生成物）+dD，cC+eE=fF+gG,找到A与E的关系，计算滴定度（p.146）（自学）,相当于标示量,%,的计算公式,片剂：,VFT/W,平均片重,/,标示量,100%,针剂：,VFT/W/,标示量（,g/ml,）,100%,以重量,/,片计的计算公式,VFT/W,平均片重,=,重量,/,片,司可巴比妥钠胶囊含量测定：精密称取内容物,0.1385g,，置碘量瓶中，加水,10mL,，振摇使溶解，精密加溴滴定液（,0.05mol/L,）,25 mL,，再加盐酸,5 mL,，立即密塞并振摇,1,分钟，暗处静置,15,分钟后，加碘化钾试液,10 mL,，立即密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（,0.1mol/L,，,F=0.992,）滴定，至近终点时加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。已知：样品消耗硫代硫酸钠滴定液（,0.1mol/L,）,17.05 mL,，空白试验消耗,25.22mL,，每,1mL,溴滴定液（,0.05mol/L,）相当于,13.01mg,的司可巴比妥钠。计算本品相当于标示量的百分含量（规格,0.1g,，,20,粒胶囊内容物重,2.7506 g,）？,(p.90,生成物滴定法,),2024/10/11,10,司可巴比妥钠的滴定度计算,1,摩尔,司可巴比妥钠与,1,摩尔溴相当,T=M,A,m,B,a/b,260.20.051/1,13.01mg/ml,(25.22,17.05)13.010.992,2.7506,0.1385,0.1,1000,20,100%,精密量取维生素,C,注射液,4mL,（相当于维生素,C 0.2g,），加水,15mL,与丙酮,2mL,，摇匀，放置,5,分钟，加稀醋酸,4mL,与淀粉指示液,1mL,，用碘滴定液,(0.05mol/L),滴定至溶液显蓝色，并持续,30,秒钟不退。已知：注射液规格,2mL:0.1g,，消耗,0.05mol/L,碘滴定液（,F=1.005,）,22.45mL,，维生素,C,的分子量为,176.12,，问：,（,1,）丙酮和稀醋酸分别起什么作用？,（,2,）每,1mL,碘滴定液,(0.05mol/L),相当于多少,mg,的维生素,C,？,（,3,）求本品相当于标示量的百分含量？,2024/10/11,13,维生素,C,1,摩尔维生素,C,与,1,摩尔碘相当,T,0.05176.121/1,8.806mg/ml,T,V,F,维生素,C,标示量,4,0.05,100,8.806,22.45,1.005,4,0.05,1000,100,99.34,二、光谱分析,（一）、,UV,法,1,、标准对照法（一点法）,A,样,/A,标,=C,样,/C,标,，,样品,%=A,样,/A,标,C,标,F/W100%,F=,稀释倍数,W=,取样量,2,、百分吸收系数法（,A=E,1%,cm,CL,）,C%=A/E,1%,cm,样品,%=A/E,1%,cm,F/W,F=,稀释倍数和浓度换算因子,W=,取样量,3,、标准曲线法（,y=bx,a,）,由标准曲线或回归方程求出,C,样,，再根据,F,，,W,求出样品,%,。,4,、计算分光光度法,双波长法，差示法均可应用比尔定律的公式，以,A,代替吸收度,A,。,差示分光光度法,原理：利用被测物在两种不同溶液中吸收光谱发生了特征性变化，而共存干扰物在该两种溶液中未引起光谱变化，测定两种溶液的吸收度差值（,A,值），根据,A,与被测物浓度,C,的线性关系进行定量测定。,方法：,一定量,+,酸 一定体积（测定）,A,测,同样量,+,碱 同样体积（参比）,A,参,A,测,A,参,=,A,样,干扰物在两种溶液中吸收光谱无变化，即,A,杂,=0,，,A,样,只与样品浓度,C,呈线性关系。,供试品,220 240 260 280nm,A,pH10,溶液，,240nm,pH13,溶液，,255nm,酸性溶液，无,max,A,样,=A,pH13,-,A,pH10,A,标,=A,pH13,-,A,pH10,C,样,=A,样,/A,标,C,标,特点：具备一般分光光度法简易、快速、直接读数的优点,;,无需事先分离，又能消除干扰,;,提供一个近似理想的参比溶液。,A,2024/10/11,18,（二）、FLU法,以荧光强度R代替吸收度A,1、对照品溶液与空白溶液的,荧光强度之差（,R,对,）,2、供试品溶液与空白溶液的,荧光强度之差（,R,样,）,R,样,C,样,C,对,R,对,称取己酸孕酮,0.0105g,加无水乙醇溶解后,置,10ml,容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。吸取,1.00ml,置,100ml,容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,置,1cm,吸收池内进行测定,根据下列数据,求出按干燥品计算的己酸孕酮百分含量。,A=0.390,E,1%,1cm,=393,0.390,10,393,0.0105,100%,=,含量,%,复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑（,SMZ,）的含量测定：,精密称取本品（每片含,SMZ,为,0.4g,）,10,片，总重量为,5.5028g,。精密称取,SMZ,对照品,0.0501g,、片粉,0.0756g,，按双波长分光光度法测定,SMZ,含量。在,257nm,波长处测得：对照品溶液的吸收度,A,对,为,0.330,，供试溶液的吸收度,A,样,为,0.372,。在,304nm,波长处测得：对照品溶液的吸收度,A,对,为,0.009,，供试溶液的吸收度,A,样,为,0.021,。计算,SMZ,的含量相当于标示量的百分含量。,257nm,304nm,对照品,供试品,0.330,0.372,0.009,0.021,0.372-0.021,0.0501 5.5028,0.330-0.009,0.0756 10,0.4,100%,=99.69%,对乙酰氨基酚片剂,溶出度,测定：,取标示量为,0.3g,的本品,6,片，依法在,1000mL,溶剂中测定溶出度。经,30,分钟时，取溶液,5mL,滤过，精密吸取续滤液,1mL,，加,0.04%,氢氧化钠溶液稀释至,50mL,，摇匀，在,257nm,波长处测得每片的吸收度分别为,0.345,，,0.348,，,0.351,，,0.359,，,0.356,和,0.333,，按其百分吸收系数为,715,计算出各片的溶出量。限度为标示量的,80%,。并判断其溶出度是否符合规定。,0.345,50,1000,715,0.3,=80.4%,片,1,：,片,2,复方苯巴比妥散中苯巴比妥的测定,主要成分：苯巴比妥，阿司匹林,原理：在,pH 5.91,和,pH 8.04,条件下，阿司匹林及水解产物水杨酸等的紫外吸收光谱重合，,A=0,，而苯巴比妥在此两,pH,条件下的差示光谱在,240nm,处,A,值最大，因此可测定此波长处的,A,值，采用标准曲线法定量。,方法：取样品,0.12g,，加无水乙醇,20ml,，振摇，加水至,200ml,，取,5ml,两份，分别用,pH 5.91,和,pH 8.04,的缓冲液稀释至,50ml,，以试剂为空白，在,240nm,处测定吸收度，代入回归方程计算含量。,三、色谱分析（,HPLC,和,GC,）,内标法：,F=A,内,/A,标,C,标,/C,内,样品,%=A,样,/A,内,FC,内,稀释倍数,/W100%,或,C,样,=,R,样,/,内,/R,标,/,内,C,标,（,R,代表峰面积比值）,外标法（同光谱法）,:,标准曲线法,标准对照法,(,一点法,),系统适用性试验,柱效（理论板数）,n=5.54(t,R,/W,h/2,),2,分离度,R=,拖尾因子,T=,重复性 取对照品或样品溶液，连续进样,5,次，测得峰面积相对标准差,RSD,应小于,2.0%,2(t,R2,-t,R1,),W,1,+W,2,W,0.05h,2d,1,(R 1.5),(T=0.95,1.05),T=,W,0.05h,/2d,1,d,1,h,W,0.05h,0.05h,HPLC,测定复方,SMZ,片中,SMZ,含量，以,SG,为内标，测得,标准液中：,SMZ,峰高,14.90cm,，浓度,8.0mg/mL,，,SG,峰高,13.80cm,，浓度,4.0mg/mL,。,样品液中：,SMZ,峰高,11.92cm,，,SG,峰高,16.20cm,，浓度,4.0mg/mL,。,求样品液中,SMZ,的浓度为多少？（进样量均为,5,l,）,13.8,8.0,14.9,4.0,F=,样品（,mg/mL,）,=,11.92,4.0,16.2,=1.852,F=5.45,用,HPLC,法测得某药保留时间为,12.54min,，半高峰宽,3.0mm,（纸速,5mm/min,），计算柱效？,N=5.54,（,12.54/3.0,）,2,？,N=5.5412.54/,（,3.0/5,）,2,？,N=2420,丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成每,1mL,中约含,1mg,的溶液。精密量取该溶液和内标溶液（,1.6mg/mL,苯丙酸诺龙甲醇溶液）各,5mL,，置,25mL,量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取,10,L,注入液相色谱仪，记录色谱图。另取本品适量，同法测定，内标法计算含量。已知对照品溶液为,1.052mg/mL,，样品溶液为,1.032mg/mL,，测得对照液中丙酸睾酮和内标准的峰面积分别为,54678,和,61258,，样品液中丙酸睾酮和内标准的峰面积分别为,52213,和,61228,，计算丙酸睾酮的含量？,52213/61228,546