药物含量测定方法与验证

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第四章 药物,的含量测定,方法,与,验证,定量分析方法的分类与特点,样品的前处理方法,药品分析方法的验证,10/10/2024,1,第,一,节 定量分析方法的,分类与,特点,定量分析方法的计算,药典对药物的,含量限度的表示方法,原料药：多以%表示，有二种情况,按原料药本身形式计算其含量,例 ：,阿司匹林,（P.,11,）按干燥品计不得少于9,9,.5%,对氨基水杨酸钠按干燥品计不得少于99.0%,凡未规定上限的，药典凡例中规定，其含量上限不得超过101.0%。,10/10/2024,2,由于药物组成不定，需以另一种稳定形式计算含量,例：氢氧化铝 Al(OH),3,以含三氧化二铝（Al,2,O,3,）计，不得少于48.0%,制剂：制剂的含量限度表示方法有三种情况,按标示量计算,标示量即规格量，生产厂家的处方量。它是以标示量为100%，将测得含量与之相比较，求出相对于标示量的百分含量。,例：维生素B,1,注射液含维生素B,1,应为标示量的95.0%105.0%,干酵母片含蛋白质不得少于标示量的40.0%,10/10/2024,3,直接用%含量规定范围（主药含量微）,例：复方碘溶液,含 I 应为4.5%5.5%,含 KI 应为9.5%10.5%,复方氯化钠注射液,含总Cl,-,量 0.52%0.58%,含KCl量 0.028%0.032%,含CaCl,2,2H,2,O 0.031%0.035%,10/10/2024,4,以重量规定含量范围（多为复方制剂）,例：复方炔诺酮片,炔诺酮 0.540.66mg /片,炔雌醇 31.538.5,g/片,复方磺胺甲噁唑片,SMZ 0.3600.440 g/片,TMP 72.088.0mg/片,10/10/2024,5,一、容量分析法,滴定法,aA+bB cC+dD,（A被测药物；B滴定液）,（一）、滴定度的概念,T-与1ml规定浓度的标准溶液所相当的被测物的mg数。,（二）、滴定度的计算,T=M,A,m,B,a/b（mg/ml）,10/10/2024,6,（三）含量计算,1、直接滴定法,原料药以%表示的制剂,样品%=VFT/W100%,F=N,实,/N,理,2、间接滴定法,（1）、剩余滴定法中须做空白,样品%=（V,空白,V,测,),样,FT/W100%,（2）、生成物滴定法,aA+bB=cC（生成物）+dD，cC+eE=fF+gG,找到A与E的关系，计算滴定度（p.,146,）（自学）,10/10/2024,7,相当于标示量%的计算公式,片剂：,VFT/W平均片重/标示量100%,针剂：,VFT/W/标示量（g/ml）100%,以重量/片计的计算公式,VFT/W平均片重=重量/片,10/10/2024,8,司可巴比妥钠胶囊含量测定：精密称取内容物0.1385g，置碘量瓶中，加水10mL，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25 mL，再加盐酸5 mL，立即密塞并振摇1分钟，暗处静置15分钟后，加碘化钾试液10 mL，立即密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L，F=0.992）滴定，至近终点时加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。已知：样品消耗硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）17.05 mL，空白试验消耗25.22mL，每1mL溴滴定液（0.05mol/L）相当于13.01mg的司可巴比妥钠。计算本品相当于标示量的百分含量（规格0.1g，20粒胶囊内容物重2.7506 g）？(p.90生成物滴定法),10/10/2024,9,司可巴比妥钠的滴定度计算,1摩尔,司可巴比妥钠与1摩尔溴相当,T=M,A,m,B,a/b260.20.051/113.01mg/ml,10/10/2024,10,(25.22,17.05)13.010.992,2.7506,0.1385,0.1,1000,20,100%,10/10/2024,11,精密量取维生素C注射液4mL（相当于维生素C 0.2g），加水15mL与丙酮2mL，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4mL与淀粉指示液1mL，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显蓝色，并持续30秒钟不退。已知：注射液规格2mL:0.1g，消耗0.05mol/L碘滴定液（F=1.005）22.45mL，维生素C的分子量为176.12，问：,（1）丙酮和稀醋酸分别起什么作用？,（2）每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相当于多少mg的维生素C？,（3）求本品相当于标示量的百分含量？,10/10/2024,12,维生素C,1摩尔维生素C与1摩尔碘相当,T0.05176.121/1=8.806mg/ml,标示量%=TFV/W标示量100%,8.80622.451.005,=410000.05 100%=99.34%,10/10/2024,13,二、光谱分析,（一）、UV法,1、标准对照法（一点法）,A,样,/A,标,=C,样,/C,标,，,样品%=A,样,/A,标,C,标,F/W100%,F=稀释倍数,W=取样量,2、百分吸收系数法（A=E,1%,cm,CL）,C%=A/E,1%,cm,样品%=A/E,1%,cm,F/W,F=稀释倍数和浓度换算因子,W=取样量,10/10/2024,14,3、标准曲线法（y=bxa）,由标准曲线或回归方程求出C,样,，再根据F，W求出样品%。,4、计算分光光度法,双波长法，差示法均可应用比尔定律的公式，以A代替吸收度A。,10/10/2024,15,差示分光光度法,原理：利用被测物在两种不同溶液中吸收光谱发生了特征性变化，而共存干扰物在该两种溶液中未引起光谱变化，测定两种溶液的吸收度差值（A值），根据A与被测物浓度C的线性关系进行定量测定。,方法：,一定量+酸 一定体积（测定）,A,测,同样量+碱 同样体积（参比）,A,参,A,测,A,参,=,A,样,干扰物在两种溶液中吸收光谱无变化，即,A,杂,=0，,A,样,只与样品浓度C呈线性关系。,供试品,10/10/2024,16,220 240 260 280nm,A,pH10溶液，,240nm,pH13溶液，,255nm,酸性溶液，无,max,A,样,=A,pH13,-,A,pH10,A,标,=A,pH13,-,A,pH10,C,样,=A,样,/A,标,C,标,特点：具备一般分光光度法简易、快速、直接读数的优点;无需事先分离，又能消除干扰;提供一个近似理想的参比溶液。,A,10/10/2024,17,称取己酸孕酮0.0105g,加无水乙醇溶解后,置10ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。吸取1.00ml,置100ml容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,置1cm吸收池内进行测定,根据下列数据,求出按干燥品计算的己酸孕酮百分含量。A=0.390,E,1%,1cm,=393,0.390,10,393,0.0105,100%,=,含量%,10/10/2024,18,复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑（SMZ）的含量测定：,精密称取本品（每片含SMZ为0.4g）10片，总重量为5.5028g。精密称取SMZ对照品0.0501g、片粉0.0756g，按双波长分光光度法测定SMZ含量。在257nm波长处测得：对照品溶液的吸收度A,对,为0.330，供试溶液的吸收度A,样,为0.372。在304nm波长处测得：对照品溶液的吸收度A,对,为0.009，供试溶液的吸收度A,样,为0.021。计算SMZ的含量相当于标示量的百分含量。,10/10/2024,19,257nm,304nm,对照品,供试品,0.330,0.372,0.009,0.021,0.372-0.021,0.0501 5.5028,0.330-0.009,0.0756 10 0.4,100%,=99.69%,10/10/2024,20,对乙酰氨基酚片剂,溶出度,测定：,取标示量为0.3g的本品6片，依法在1000mL溶剂中测定溶出度。经30分钟时，取溶液5mL滤过，精密吸取续滤液1mL，加0.04%氢氧化钠溶液稀释至50mL，摇匀，在257nm波长处测得每片的吸收度分别为0.345，0.348，0.351，0.359，0.356和0.333，按其百分吸收系数为715计算出各片的溶出量。限度为标示量的80%。并判断其溶出度是否符合规定。,0.345,50,1000,715,0.3,=80.4%,片1：,片2,10/10/2024,21,三、色谱分析（HPLC和GC）,内标法：,F=A,内,/A,标,C,标,/C,内,样品%=A,样,/A,内,FC,内,稀释倍数/W100%,或C,样,=,R,样/内,/R,标/内,C,标,（R代表峰面积比值）,外标法（同光谱法）:,标准曲线法,标准对照法,(,一点法),10/10/2024,22,系统适用性试验,柱效（理论板数）n=5.54(t,R,/W,h/2,),2,分离度 R=,拖尾因子 T=,重复性 取对照品或样品溶液，连续进样5次，测得峰面积相对标准差RSD应小于2.0%,2(t,R2,-t,R1,),W,1,+W,2,W,0.05h,2d,1,(R 1.5),(T=0.951.05),10/10/2024,23,T=,W,0.05h,/2d,1,d,1,h,W,0.05h,0.05h,10/10/2024,24,HPLC测定复方SMZ片中SMZ含量，以SG为内标，测得,标准液中：SMZ峰高14.90cm，浓度8.0mg/mL，SG峰高13.80cm，浓度4.0mg/mL。,样品液中：SMZ峰高11.92cm，SG峰高16.20cm，浓度4.0mg/mL。,求样品液中SMZ的浓度为多少？（进样量均为5,l）,13.8,8.0,14.9,4.0,F=,样品（,mg/mL）,=,11.92,4.0,16.2,=1.852,F=5.45,10/10/2024,25,用HPLC法测得某药保留时间为12.54min，半高峰宽3.0mm（纸速5mm/min），计算柱效？,N=5.54（12.54/3.0）,2,？,N=5.5412.54/（3.0/5）,2,？,N=2420,10/10/2024,26,丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成每1mL中约含1mg的溶液。精密量取该溶液和内标溶液（1.6mg/mL苯丙酸诺龙甲醇溶液）各5mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取10,L注入液相色谱仪，记录色谱图。另取本品适量，同法测定，内标法计算含量。已知对照品溶液为1.052mg/mL，样品溶液为1.032mg/mL，测得对照液中丙酸睾酮和内标准的峰面积分别为54678和61258，样品液中丙酸睾酮和内标准的峰面积分别为52213和61228，计算丙酸睾酮的含量？,52213/61228,54678/61258,1.052/1.032=？,97.4%,10/10/2024,27,第,二,节 样品,分析,的前处理方法,一、概述,含金属药物有：富马酸亚铁、葡萄糖酸锑钠、枸橼酸铋钾、葡萄糖酸锌、酒石酸锑钾等。,含卤素药物有：泛影酸、三氯叔丁醇、碘番酸、磺溴酞钠等。,根据所含金属或卤素在分子中结合的牢固程度，分析前采用不同方法进行预处理。,10/10/2024,28,不经有机破坏处理的分析方法,直接测定法,金属原子不与碳直接相连的或C-M键结合不牢固的有机金属药物，在水溶液中电离，可选用适当方法直接测定。例：,富马酸亚铁在热的稀矿酸中溶解，释放出亚铁离子，用硫酸铈滴定液直接滴定。,10/10/2024,29,葡萄糖酸锑钠为组成不定的五价锑化合物，采用间接碘量法测定锑的含量，在酸性条件下，葡萄糖酸锑钠与碘化钾试液作用，,Sb,5+,可氧化KI，析,出I,2，,用Na,2,S,2,O,3,滴定液滴定。,枸橼酸铋钾、葡萄糖酸锌EDTA滴定法测定含量。,10/10/20