实验3-糖耐量

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验三 口服葡萄糖耐量试验,Oral glucose tolerance test,OGTT,1.掌握,血糖测定原理,2.掌握,OGTT,的测定方法及临床应用,实验目的,3.,熟悉,OGTT,曲线绘制、分析及临床意义,来源,食物中糖消化吸收,肝糖原分解,非糖物质异生作用,其它己糖转变,血糖的代谢途径,血糖,3.9-6.1mmol/L,去路,彻底氧化分解,合成,肝、肌糖原,合成脂肪、氨基酸,转变为其它糖及衍生物,超过,肾糖阈（尿糖）,.,口服葡萄糖耐量试验,OGTT,是口服一定量葡萄糖后，作系列血浆葡萄糖测定，以评价机体对血糖调节能力的标准方法。,WHO,推荐法，葡萄糖,75g,，对于小孩，按,1.75g/kg,体重计，总量不超,75g,。清晨空腹坐位取血后，用水,250300ml,溶解,5min,内饮完，之后,30min,取血,1,次，共,4,次，历时,2h,。,临床上常用的方法是清晨空腹抽血后，开始饮葡萄糖水后,30min,、,60min,、,120min,和,180min,分别测定静脉血浆葡萄糖。,以测得的血清葡萄糖浓度为纵座标，时间为横座标，绘制成,糖耐量曲线图,。,口服葡萄糖耐量曲线,OGTT,是一种负荷试验，在明确诊断后不易再用。,相关状态,正常糖耐量,IFG,IGT,DM,FPG,6.1,6.16.9,7.0,7.0,服糖后,2h,7.8,7.8,7.811.0,11.1,OGTT,对,DM,相关状态的判定指标（静脉血糖,mmo1/L,）,实验仪器及试剂,小试管,7,支,5.0,ml,吸管 1支,加样器 1支,722分光光度计,空白管,（,B,）,标准管（,S,）,测定管（,T,0,）,测定管（,T,1,）,测定管（,T,2,）,测定管（,T,3,）,测定管（,T,4,）,血清（,ml,）,0.020,0.020,0.020,0.020,0.020,葡萄糖标准液（,ml,）,0.020,蒸馏水（,ml,）,0.020,工作试剂（,ml,）,2.50,2.50,2.50,2.50,2.50,2.50,2.50,实验操作步骤,混匀，置,37,水浴中，保温,20,min,，在波长,500nm,处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管,吸光度,。然后分别计算出葡萄糖浓度,C0,、,C1,、,C2,、,C3,、,C4,计算,:,血清葡萄糖（,mmol,/L,）,=,（,A,测定,/A,标准）*,C,标准,单位换算：,葡萄糖,mmol,/L,*,18=,葡萄糖,mg/,dL,将各次血糖测定结果，与相应的时间绘制成,糖耐量曲线图,，进行分析。,注意事项,加样准确，加样后立即摇匀。,反应结束，冷却至室温后及时比色。,实验前受试者应充分休息，避免体力活动，试验中亦不能吸烟、喝咖啡，以免影响实验结果。,葡萄糖氧化酶对,-D,葡萄糖高度特异，溶液中葡萄糖约,36%,为,型，,64%,为,型。葡萄糖的完全氧化需要,型到,型的变旋反应。新配制的葡萄糖标准液主要是,型，故需放置,2h,以上（最好过夜），待变旋平衡后方可应用。,注意事项,葡萄糖氧化酶法可以直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿液中尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰过氧化物酶反应，造成结果假性偏低。,因红细胞的酵解将导致测定结果偏低，建议测定样品以草酸钾,-,氟化钠做抗凝剂以抑制糖酵解。,严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液，然后再进行测定。,OGTT,临床意义,1.,诊断妊娠期糖尿病（,GDM,）。,2.,诊断糖耐量减退病,3.,无法解释的肾病，视网膜病，随机血糖,7.8,mmol,/L.,4.,人群筛查,.,