实验一微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,实验一,微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌,目的要求,实验原理,实验材料,实验程序,结果与思考题,目 的 要 求,认识微生物实验所需要的各种器皿，了解常用工具和仪器的名称、用途。,掌握对玻璃器皿的清洗、包扎方法与干热灭菌的操作过程。,实验原理,微生物学实验要求较高的无菌状态，因此，实验所用的器皿，大多数要进行消毒、灭菌从而用以培养微生物，所以对其质量、规格、洗涤和包扎方法均有一定要求。,清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件，包扎方法要能保证防止污染杂菌。,空的玻璃器皿一般用干热灭菌,.,实 验 材 料,玻璃仪器：,每人数：,培养皿,3,套；,大试管,3,只。,每组数：,三角瓶,6,只；,烧杯（,500ml,）,2,只；,烧杯（,1000ml,）,1,只；,小试管,6,只；,吸管（,0.2ml 2,支，,0.5ml 2,支，,1ml 2,支，,5ml 2,支）共,8,支,每橱数：,量筒（,500ml,）,1,只；,洗涤用品：,去污粉、肥皂、清洗剂、毛刷等。,包扎用品：,棉花、扎绳、包扎纸等。,实验程序,（,仪器的认识、清洗与包扎,）,（一）学习下列常用仪器的种类、规格和应用范围：,培养皿,；,试管,；,三角瓶,；,烧杯；,吸管；,量筒。,（二）学习,玻璃器皿的洗涤方法,：,（三）学习,各种器皿的包扎：,由一底一盖组成一套，常用的培养皿皿底,直径,90 mm,，高,15mm,皿底皿盖均为玻璃制成。,制成平板，可用于,分离、纯化、鉴定菌种、活菌计数,以及,测定抗生素,、,噬菌体的效价,等。,根据其大小和用途不同，,有下列三种型号,：,(1),大试管,(,约,18mm180mm):,可装倒平板用的培养基,;,可作制备斜面用（需要大量菌体时用）,装液体培养基用于微生物的振荡培养。,(2),中试管,(13,15)mm(100,150)mm:,装液体培养基培养细菌或做斜面用,用于细菌、霉菌、病毒等的稀释和血清学试验,。,(3),小试管,(10,12)mm100mm:,一般用于糖发酵或血清学试验，和其它需要节省材料的试验。,三角瓶,:,100mL,、,250mL,、,500mL,和,1000 mL,用来装,无菌水、培养基和振荡培养微生物,等。,烧杯,:,50mL,、,100mL,、,250mL,、,500mL,和,1000mL,用来,配制培养基与各种溶液,等。,玻璃吸管,:,1mL,、,2mL,、,5mL,、,10mL,玻璃器皿的洗涤方法,:,1,、新玻璃器皿的洗涤,在,2%,的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干净。,2,、旧玻璃器皿的洗涤,（,1,）试管、培养皿、三角瓶,：,洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗,A,装有固体培养基：,刮掉，洗涤,B,带菌的器皿：,2%,来苏尔或,0.25%,新洁尔灭消毒液中浸泡,24,小时或煮沸,0.5,小时，然后洗涤,C,带病原菌培养物的器皿,：,先高压蒸汽灭菌，倒去培养物,（,2,）玻璃吸管,：,吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，反复冲洗,a,吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：,立即投入盛有自来水的容器中浸泡，实验后集中冲洗。,b,塞有棉花的吸管：,用水将棉花冲出，然后冲洗,c,吸过含有微生物培养物的吸管：,2%,来苏尔或,0.25%,新洁尔灭消毒液中浸泡,24,小时然后洗,d,吸管内壁有油垢：,洗涤液中浸泡数小时，再冲洗,洗涤后，若内壁的水均匀分布成一,薄层,，表示完全洗净，若还挂有水珠，则需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水冲洗。,洗净后的试管倒置于试管筐内，三角瓶倒置于洗涤架上，培养皿的皿底和皿盖分开，依次压着皿边排列倒扣在桌上,晾干,.,培养皿的包扎：,牛皮纸或旧报纸包紧，一般以,5,8,套,培养皿包成,1,包,吸管的包扎：,1,在上端约,0.5cm,处，塞入一小段,1.5 cm,长的棉花（勿用脱脂棉），目的是避免将外界或嘴中杂菌吹入管内，或不慎将菌液吸出管外。,2,4,5 cm,宽的长纸条,.,试管和三角瓶等的包扎：,实验程序,（,干热灭菌的原理和操作方法,）,干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而,达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有,关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝,固就越快，反之含水量越少，凝固缓慢。,与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要高（,160,170,），,时间要长（,1,2h,），但干热灭菌温度不能超过,180,，否则，,包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。,原理,实验程序,（,干热灭菌的原理和操作方法,）,1,装入待灭菌物品,将包好的待灭菌物品（培养皿、吸管等）放入电烘箱内，关好箱门。物品,不要摆得,太挤，,以免妨碍空气流通；,不要接触电烘箱内壁的铁板,，以防包装纸烤焦起火。,2,升温,接通电源，拨动开关，,打开电烘箱排气孔,，让温度逐渐上升。,当温度升至,100,时，关闭排气孔。,3,恒温,当温度升达到,160,170,时，恒温调节器会自动控制调节温度，保持此温度,2h,。,干热火菌过程，严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。,4,降温,切断电源、自然降温。,5,开箱取物,待电烘箱内温度降到,70,以下后，打开箱门,，取出灭菌物品。,操作方法,结果与思考题,1,、通过本次实验你认识了微生物学实验常用的哪些器皿？,2,、简述玻璃器皿洗涤的基本要求。,3,、简述干热灭菌的操作步骤。,