江早餐豆浆中12种异黄酮含量的初步研究

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,开 题 报 告,2010-6-1,九江早餐豆浆中,12,种异黄酮含量的初步研究,姓 名：杨波,刘贤德,指导老师：,王春娥,主要内容,一、引言,二、材料方法,三、研究进程,四、可预期的结果,五、创新点,六、需要克服的困难,七、参考文献,1.,引言,大豆异黄酮（,soybean,isoflavone,）,是大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物，属于黄酮类化合物中的异黄酮类成分,其母核为,3-,苯基苯并吡喃酮，共有,12,种异黄酮,分为游离型的苷元和结合型的糖苷两大类,分别是大豆苷（,daidzin,，,D,）、黄豆苷（,glycitin,，,GL,）、染料木苷（,genistin,，,G,）、丙二酰化大豆苷（,malonyldaidzin,，,MD,）、丙二酰化黄豆苷（,malonylglycitin,，,MGL,）、丙二酰化染料木苷（,malonylgenistin,，,MG,）、乙酰化大豆苷（,acetyldaidzin,，,AD,）、乙酰化黄豆苷（,acetylglycitin,，,AGL,）、乙酰化染料木苷（,acetylgenistin,，,AG,）、大豆素（,daidzein,，,DE,）、黄豆素（,glycitein,，,GLE,）和染料木素（,genistein,，,GE,），其中苷元约占大豆异黄酮总量的,2%,3%,糖苷约占总量的,97%,98%,。,最近美国营养和食品学会调查了美国和日本人的食谱，发现豆类食品中的三羟基异黄酮是日本人癌症发病率低的主要原因之一。尤其是乳腺癌和前列腺癌，美国人的发病率是日本人的,4,倍。由于大豆异黄酮作为植物雌激素具有抑制和协同的双向调节作用，对改善女性体内的雌激素平衡、减轻妇女更年期不适症、预防癌症、防止脂质过氧化、预防糖尿病、保护心血管和防止骨质疏松等方面具有重要生理活性。在激素替代治疗、激素依赖性肿瘤以及其他肿瘤的防治方面有着广阔的应用前景,有很高的保健价值。,正是由于大豆异黄酮许多的生理功效，国内已经将大豆异黄酮作为保健品、食品、特别是医药中间体，被用作食品添加剂、保健食品和药物组分。同时随着异黄酮的生理活性得到人们普遍认可，开展大豆异黄酮研究就具有了重要的理论和实际意义，而其中测定,保健品,、,大豆豆制品,和,大豆籽粒,中大豆异黄酮的含量则成为研究热点之一。,张艳舫等,（,1,）,利用高效液相色谱法对市场上销售的,5,种国产和进口大豆异黄酮保健食品中,12,种大豆异黄酮的含量进行测定。检测结果是产品,1,中为,(6.930.22)mg/g,胶囊,每粒的质量为,0.5 g,说明,(3.470.11)mg/,粒。产品,2,中为,(38.600.41)mg,总异黄酮,/g,胶囊,每粒的质量为,0.5g,即,(19.300.21)mg/,粒。产品,3,中为,(82.790.85)mg/g,胶囊,每粒的质量为,0.5 g,说明,(41.40.43)mg/g,胶囊。产品,4,中为,(81.721.94)mg/g,每片的质量为,0.6g,说明,(49.01.16)mg/,粒。产品,5,中未检出任何一种大豆异黄酮。,杨威等,（,12,）,利用反相高效液相色谱法分别测定了成都牧甫、,Archer,Dariels,Midland Co.,、成都欣宇、广汉生物、杭州德爱、四川德阳保健品原料中大豆苷含量分别为。,153mg/g,、,193mg/g,、,151mg/g,、,150mg/g,、,142mg/g,、,150mg/g,，染料木苷含量分别为,267mg/g,、,221mg/g,、,230mg/g,、,258mg/g,、,230mg/g,、,230mg/g,，,大豆素含量分别为,11.6mg/g,、,0.30mg/g,、,2.2mg/g,、,13.7mg/g,、,8.00mg/g,、,8.60mg/g,，染料木素含量分别为,21.6 mg/g,、,24.0mg/g,、,22.4mg/g,、,23.0mg/g,、,21.7mg/g,、,22.4mg/g.,魏锋等,（,7,）,利用,HPLC-DAD-MS,联用技术，以染料木素为对照,同时测定北京的市售大豆异黄酮类中药和保健食品中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素,6,种成分的含量。结果显示大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素在样品,1,中含量分别为,0.05%,、,0.05%,、,0.04%,、,1.67%,、,0.93%,、,0.25%,，样品,2,中含量分别为,0.06%,、,0.04%,、,0.07%,、,1.49%,、,0.87%,、,0.20%,，样品,3,中含量分别为,0.07%,、,0.09%,、,0.04%,、,1.59%,、,0.94%,、,0.21%,，样品,4,中含量分别为,0.74%,、,0.04%,、,3.69%,、,0.32%,、,0.15%,、,5.70%,，,样品,5,中含量分别为,0.03%,、,0.52%,、,0.90%,、,0.15%,、,0.26%,、,0.19%,，样品,6,中含量分别为,0.08%,、,0.33%,、,0.71%,、,0.21%,、,0.19%,、,0.12%,，样品,7,中含量分别为,0.17%,、,0.47%,、,0.52%,、,0.33%,、,0.13%,、,0.15%,。,孙卫等,（,4,）,利用高效液相色谱法对大豆异黄酮胶囊,(,华北制药,批号,:070916,070917,070918),中的,6,种有效成分（大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄、素染料木素）,的含量进行测定，结果显示,070916,批号中,6,种大豆异黄酮成分含量分别为,12.712%,、,6.599%2.845%,、,0.185%,、,0.168%,、,0.002%,异黄酮总含量为,22.511%,，,070917,批号中分别为,12.594%,、,6.487%,、,2.717%,、,0.187%,、,0.167%,、,0.016%,异黄酮总含量为,22.168%,070919,批号中分别为,12.930%,、,6.710%,、,2.953%,、,0.184%,、,0.172%,、,0.003%,，异黄酮总含量为,22.952%,。,返回,徐淑玲等,（,3,）,利用紫外分光光度法对来自周口粮油公司的大豆、大豆粕,(CP:43%),、大豆粕,(CP:48%),来自广联饲料公司的大豆粉、膨化大豆以及来自吉安的赣中南小黑豆等不同豆类饲料原料中的大豆异黄酮含量进行测定，结果得出,不同豆类饲料原料中大豆异黄酮含量不同,大豆中大豆异黄酮含量为,2004.63 92.98(,g,/g),大豆粕,(CP:43%),中大豆异黄酮含量为,2201.73 36.82(,g,/g),大豆粕,(CP:48%),中大豆异黄酮含量为,2265.54 60.07(,g,/g),大豆粉中大豆异黄酮为,2333.55 60.00(,g,/g),膨化大豆中大豆异黄酮含量为,2264.75 24.61(,g,/g),赣中南小黑豆中大豆异黄酮含量为,2239.44 24.8(,g,/g),。,张静等,（,5,）,利用高效液相色谱法对淡豆豉、黄大豆及黑大豆中染料木苷、大豆苷元、染料木素三种成分的含量进行检测，结果显示每,g,淡豆豉中染料木苷、大豆苷元、染料木素的含量为分别为,1076.8g,、,310.48g,、,141.93g,，,每,g,黄大豆中三种异黄酮含量为,580.23g,、,27.43g,、,14.99g,，每,g,黑大豆中三种异黄酮含量为,603.42g,、,13.48g,、,5.26g,。,史桂玲,（,6,）,等利用紫外分光光度法对不同豆制品中大豆异黄酮总含量进行测定并比较，这些豆制品包括豆水、豆腐、豆粕、豆芽、大豆、豆豉、豆浆、豆渣。测定结果显示每,2.5g,样品中含有的异黄酮总量分别为,33.06,、,29.61 mg,、,36.68 mg,、,33.65 mg,、,18.61 mg,、,16.31 mg,、,16.75 mg,、,1.47 mg,。,马方励,（,8,）,等利用反相高效液相色谱法测定,4,种酱油制品中黄豆苷元与染料木素这两种异黄酮苷元的含量，样品酱油由李锦记有限公司提供，结果显示黄豆苷元含量分别为,0.0244%,、,0.0195%,、,0.006%,、,0.0045%,，染料木素含量,0.0288%,、,0.227%,、,0065%,、,0.0043%,。,井乐刚,（,10,）,等 采用高效液相色谱法检测、分析大豆乳清提取物中的染料木苷和大豆苷的含量。用,NovaPak C,18,色谱柱分析大豆乳清提取物，流动相为甲醇一,0.4,磷酸水溶液,(30,：,70,，,v,v),，流速,0.7 ml,min,，柱温,30,，检测波长,260 nm,。试验结果表明，大豆乳清提取物中的大豆异黄酮含量为,72.5,，其组成以染料木苷和大豆苷为主，二者比例接近,1,：,1.,何莉萍等,（,11,）,利用高效液相色谱法对浸泡后的大豆、浸泡豆子水、豆腐渣、熟豆浆、豆腐、黄浆水中游离大豆异黄酮总量占原料豆中游离大豆异黄酮总量的百分比进行测定，结果分别为：,93.8%,，,0.50%,，,30.0%,，,66.9%,，,34.2%,和,20.3%,。,返回,谢皓等,（,2,）,利用高效液相色谱分析法,对收获于北京地区的,53,个大豆品种种子中的,3,种异黄酮组分,(,大豆苷元、染料木素和黄豆黄素,),含量进行测定，结果表明,品种间异黄酮含量存在较大多样性,大豆苷元为,39.21,2 363.65g/g,染料木素为,77.35,1 149.50g/g,黄豆黄素为,0.0,51.30g/g,3,种异黄酮总量为,146.73,2 845.60g/g,。来自山西和山东品种的异黄酮含量显著高于其他地区的品种。,李辉等,（,9,）,利用,HPLC,法对黑龙江省,46,个主栽大豆品种,(,系,),和,6,个特用豆品种的大豆异黄酮含量进行分析,筛选出,3,个高异黄酮含量的主栽品种和,2,个特用豆品系。,52,个大豆品种经,HPLC,分析测定结果表明,黑龙江省大豆异黄酮含量的总含量变幅为,1259,5284.6g/g,。品种平均含量为,2700g/g,含量低品种如绥农,10,合丰,25,等,含量高品种如垦丰,5,黑农,37,。从中得到异黄酮含量在,4000g/g,的栽培大豆品种,(,系,)5,份,。,目前，国内对大豆异黄酮含量的检测,也,主要集中对大豆籽粒，大豆制品及相关保健食品等方面。而其中在类似与检测豆浆中全部,12,种大豆异黄酮含量的研究相对较少，而江西九江地区在这一方面更是一个空白区域，因此本次课题选择对九江早餐豆浆中,12,种大豆异黄酮含量的检测方面进行初步的研究。,2.,材料与方法,2.1,供试材料,本次研究的样品豆浆将在九江市内的浔阳区、庐山区及所管辖的湖口县这三个地区进行取样，每个地区分别取三批样品，三批样品都取自三个区域内的不同地点，同时所取的样品豆浆尽可能是不同的品牌，每次取样的量大约为,500mL,。,2.2,主要仪器与试剂,Agilent 1200,型高效液相色谱系统,(,包括四元泵、在线真空脱气机、,DAD,检测器、柱温箱、自动进样器,Zorbax,SB-C18,柱,(5m,4.6 mm x 15 cm),、,1.5,mL,色谱自动进样小瓶、,Milli,-Q,超纯水系统、离心机、,KQ-300DB,型数控超声波清洗器、多头控温搅拌器、分析天平、有机相针式滤器,(13mm,0.45m),、移液器。,甲醇、乙酸、超纯水。标准品,:7,4,二羟基异黄酮,7,4,二羟基异黄酮,7,葡萄糖苷,6,O,乙酰基,7,4,二羟基异黄酮,-,葡萄糖苷,;6,O,丙酰基,7,4,二羟基异黄酮一糖苷,5,7,4-,三羟基异黄酮、,5,7,4,-,三羟基异黄酮一,7,一葡萄糖苷,6,O,乙