范慧红-生化药品质量分析.

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,生化药品质量分析,范慧红,中检所生化药品及基因工程药物室,2010-3,生化药品特点,2010,版药典收载生化药品情况,生化药品质控特点,肝素钠和胸腺肽评价性抽验质量分析,一般系指从动、植物及微生物中提取、分离、纯化、或用生物化学半合成或用现代技术制得的具有生物化学活性的一类用于临床治疗的药物。,氨基酸及其衍生物,肽与蛋白,酶与辅酶,核苷酸及其衍生物,多糖,脂类,组织提取的多组分生化药物,生化药品的定义与分类,中国药典,2010,版二部生化药品标准（品种,),汇总,类别,2005,版标准,（品种）,2010,版标准,（品种）,增加标准,（品种）,增长,%,删除,氨基酸及其衍生物,43,（,21,）,50,（,25,）,7,（,4,）,13.7%,核苷酸及其衍生物,43,（,9,）,51,（,10,）,7,（,1,）,13.7%,酶与辅酶,28,（,11,）,33,（,13,）,5,（,2,）,15.2%,多肽、蛋白,24,（,10,）,28,（,13,）,4,（,3,）,40.3%,4,多糖,15,（,5,）,18,（,6,）,3,（,1,）,16.7%,脂 类,2,（,1,）,4,（,2,）,2,（,1,）,40.0%,1,总数,154,（,57,）,185,（,69,）,68,（,12,）,15.1%,5,氨基酸及其衍生物,-2010,版药典,品种全，包含国内外所有氨基酸类产品。,临床应用方便，制剂系列化。,固体制剂：片、胶囊、颗粒、散、口含片；,溶液制剂：口服溶液、滴眼液、注射液、冲洗液等。,增订、修订和统一内容、与国外同类标准接轨。,增订：检查项中统一用,TLC,检查其它氨基酸项；,有关物质检查：,HPLC,法。,修订：含量测定、非水滴定、比色法，及,HPLC,法。,核苷酸及其衍生物,-2010,版药典,临床上是主治病毒疾患，部分治疗心血管及脑损伤、缺氧等疾病。如阿糖胞苷、利巴韦林、阿昔洛韦、更昔洛韦、泛昔洛韦。,微生物发酵或半合成，化学结构清楚、成分明白、质量标准完善。,2010,版核酸类药物品种较齐，制剂较全，少的,2-3,种标准；多的,7-8,种，最高为,12,种之多。如利巴韦林产品有,12,种：固体制剂（,5,种）：原料、片、口含、胶囊、颗粒；液体制剂（,7,种）：滴眼液、滴鼻液、口服溶液、注射剂、氯化钠注射剂、葡萄糖注射剂、注射用。,增订的项目：在检查项中有：有关物质，异常毒性、渗透压、残留溶媒。,修订的项目：含量均匀度、热原修订为细菌内毒素、含测方法、,TCL,分离度、溶液澄清度和颜色用法、用量、注射途径、注射速度。,酶与辅酶,-2010,版药典,酶和辅酶是我国生化药物中发展比较快的一类，建国以来有长足的进步。凡国外药典有的本届药典都已载入。,大部分是从生物体的某些组织中提取、纯化和精制；少部分是从微生物经发酵、破壁、再从发酵液中提取、纯化和精制而得。,酶是蛋白质，具有生物活性，提取和纯化过程中，既要保持活性，又要得率高，在质量指标的制定中始终密切注意其酶的总活性、比活力和纯度的关系。而且每种酶均有自身的特点。,增修订内容：检查项有溶液的颜色、高分子物质检查、有关物质安全性普遍增加异毒，细内，微生物限度、无菌、过敏。,多肽、蛋白,-2010,版药典,蛋白质就是由许多氨基酸残基组成的多肽链。一般以,51,个氨基酸残基，分子量为,5733,的胰岛素划分，高于此分子量为蛋白，小于为肽,。,合成多肽：成份清楚、结构明确，是近年来生化药中崛起的新品种、新技术、高水平、高质量的产品,，,如重组人胰岛素和重组人生长激素。大部分与国际接轨，修订的项目较全，如新增的生长抑素。,从脏器提取的激素、肽，因工艺粗、纯度差、杂质多、质量差、安全性没法保障从药典中删去，尽管临床仍很需要。如垂体后叶粉、注射液、缩宫素溶液、甲状腺粉。,多糖,-2010,版药典,品种,来源,类别,剂型,右旋糖酐,20,发酵,血浆代用品,原料,右旋糖酐,20,葡萄糖注射液,右酐,20,、葡萄糖,血浆代用品,注射剂,右旋糖酐,20,氯化钠注射液,右酐,20,、氯化钠,血浆代用品,注射剂,右旋糖酐,40,发酵,血浆代用品,粉剂,右旋糖酐,40,葡萄糖注射液,右酐,40,、葡萄糖,血浆代用品,注射剂,右旋糖酐,40,氯化钠注射液,右酐,40,、氯化钠,血浆代用品,注射剂,右旋糖酐,70,发酵,血浆代用品,原料,右旋糖酐,70,葡萄糖注射液,右酐,70,、葡萄糖,血浆代用品,注射剂,右旋糖酐,70,氯化钠注射液,右酐,70,、氯化钠,血浆代用品,注射剂,右旋糖酐铁,络合物,抗贫血药,原料,右旋糖酐铁片,右酐铁,抗贫血药,片剂,右旋糖酐注射液,右酐铁,抗贫血药,注射剂,肝素钠,猪、牛肠粘膜,抗凝血药,原料,肝素钠注射液,肝素钠,抗凝血药,注射剂,肝素钠乳膏,肝素钠,抗凝血药,软膏,硫酸软骨素钠,猪喉骨、鼻中骨、气管,降血脂及镇痛药,原料,硫酸软骨素钠片,硫酸软骨素钠,降血脂及镇痛药,片剂,硫酸软骨素钠胶囊,硫酸软骨素钠,降血脂及镇痛药,胶囊剂,脂类,-2010,版药典,前列地尔，注射用前列地尔,多烯酸乙酯软胶囊,采用新的质控指标使多烯酸乙酯的质量与,EP,，,JP,一致。,存在问题：,缺乏原材料的来源要求及质控标准,缺乏提取物溶液的质控标准,各企业的生产工艺差异较大,缺乏病毒工艺验证,缺乏专属性的鉴别项目,缺乏有效性的检测指标（如活性测定）,含量没有上限,组织提取的多组分生化药物,组织提取的多组分生化药物,建议：,1,、由于多组分生化药注射剂的组成、质量与原材料和制备工艺密切相关，因此质量标准难以进行全面控制，建议将原材料、中间体及原液的质量要求及工艺过程收入终产品质量标准，以尽可能控制起始原料、制备工艺对终产品的组成和含量的影响，实现全过程控制。,2,、多组分肽注射剂的组分复杂，难以确定其有效成分，建议增加活性测定，通过活性测定指标来反映产品的有效性。,3,、有多家企业生产、同时执行相同的标准的品种，建议统一生产工艺。,4,、参照中药的指纹图谱，开展多组分生化药品的反相特征图谱研究，通过特征图谱来鉴别产品真伪及确保产品的批与批之间的一致性。,生化药品质控特点,原材料质量控制,培养或提取过程的质量控制,纯化工艺过程的质量控制,制剂工艺过程的质量控制,终产品的质量控制,对生产全过程进行质量分析与控制,生化药品中的生物测定和安全性检查,采用生物测定的约,20,品种,约占总数的,28%,（,酶与辅酶,，,多肽、蛋白,、少数多糖）,包括：在,体,生物,测定,、,体外,生物,测定,安全性检查,-,覆盖几乎所有,生化药,品,有待改进的品种：,肝素纳：效价测定仍沿用兔全血法和羊血浆法,USP,新版,已改为理化测定分光光度法，测定抗,F,a,和抗,F,a,取代生物测定,本实验室参加了,WHO,组织的针对这一替代方法的肝素钠,6th IS,的国际协作标定，为肝素纳的理化测定替代生物测定积累经验,硫酸鱼精蛋白,：,EP6.0,已经、,USP,即将,采用滴定法以分光光度法测试终点，理化测定取代了生物测定,安全性,检查,试验,（,无菌、微生物限度、热原、细菌内毒素、异常毒性、降压物质、过敏等,）,考虑,生化药,来源于人、动物组织，或通过发酵而得,产品成分,复杂、,有关物质成分有的不明确,来源、工艺,等任何环节的微小变化,可能会引发不可预测的不良反应,少量生化药注册上市的历史过程复杂，其安全性和有效性尚不确切,我国,GMP,实施的现状,近年来药,害,事件的教训,2010,版,对生化药,终产品严格质量控制,、,采取更严,厉,措施,除,2005,版,原有指标外，原,标准,没有的大部分都增修订生物安全检查项,安全性,检查,试验,-,制法要求,、,特殊安全性检查,编号,品种,乙肝表面抗原,制法要求,1,肝素钠,本品应从检疫合格的猪或牛肠粘膜中提取，生产过程均应符合现行版,GMP,要求。生产工艺要经病毒灭活验证，并能去除有害的污染物，生产过程中应确保不被外来物质污染。,2,胰岛素,本品应从检疫合格猪的冰冻胰脏中提取，生产过程均应符合现行版,GMP,要求。,3,糜蛋白酶,应从检疫合格的,牛或猪胰提取,，生产过程均应符合现行版,GMP,要求。,4,尿促性素,+,本品应从健康人群的尿中提取，生产过程应符合现行版,GMP,要求，本品在生产过程中需经适宜的工艺方法处理，以使任何病毒如肝炎病毒和人免疫缺陷病毒等灭活。,5,绒促性素,+,如上,6,尿激酶,+,本品应从健康人群的尿中提取，生产过程应符合现行版,GMP,要求，本品在生产过程中需经,60,加热,10h,，以使病毒灭活。,7,乌司他丁,+,如上,肝素钠注射液；,胸腺肽注射液和注射用胸腺肽,评价性抽验质量分析介绍,肝素钠注射液,背景：,肝素是高度硫酸化的糖胺聚糖，为抗凝血药，主要从猪的肠粘膜中提取得到。自上世纪三十年代应用于临床，已经使用了七十多年；,我国是肝素生产大国，为肝素原料的主要出口国。肝素产品是一大类产品，包括肝素钠（钙）、低分子肝素钠（钙）、类肝素等等。一直以来，我国的肝素产品存在着原料出口而制剂进口的问题；,2008,年年初，美国百特公司生产的肝素钠注射液在美国发生了严重的不良反应；,对我国的肝素钠注射液进行评价性抽验，可以更好的了解我国肝素钠注射液的生产情况和质量情况，对新的检验检测技术进行研究，可以提高我国肝素的检验检测水平，与国际接轨。这对推动我国肝素产业的发展有深远的意义。,法定检验小结：,按法定标准检验，发现样品在可见异物、,pH,值、装量等方面的一些问题，在一定程度上反映产品质量。,但目前的法定标准缺乏专属性鉴别反应、杂质检查方法及对辅料的检查方法等，所以还不能全面反映和控制产品质量。,肝素钠注射液,探索性研究：,1,、离子色谱法检查有关杂质,2,、毛细管电泳法检查有关杂质,3,、体积排阻色谱法检查样品纯度,4,、反相色谱法检查防腐剂苯酚含量,5,、旋光度测定检查样品纯度,6,、微量生色底物法测定抗,FXa,和抗,FIIa,活性,7,、渗透压测定考察处方及工艺稳定性,肝素钠注射液,通过质量分析发现的主要问题：,质量标准方面,（,1,）法定检验标准缺乏专属的鉴别反应,有关物质检查,对辅料的检查。,（,2,）抗凝效价不能完全反映样品中含有杂质的情况，建议使用抗,FXa,因子和抗,Fa,因子效价。,（,3,）建议修订药典,pH,值限度，从,“,5.5,8.5,”,修订为,“,5.5,8.0,”,。,（,4,）建议修订装量检查限度，从,“,不少于标示量,”,修订为,“,2.0ml,2.2ml,”,肝素钠注射液,肝素钠注射液,原材料,部分批次样品中含有较高含量的多硫酸软骨素和硫酸皮肤素。,生产工艺,（,1,）对可见异物的控制不够，出厂检验时可见异物存在漏检现象。,（,2,）样品批间差异较大，质量稳定性不够。,（,3,）同一个企业产品有的批次含苯酚，有的不含苯酚，生产工艺有一定的随意性。,处方,生产企业的处方不统一，处方合理性还有待探讨。,包装,有的企业安瓿包装纸盒不够牢固，安瓿破损率较高。,建议：,1.,肝素钠注射液标准修订,增加杂质检查方法,增加防腐剂检查,增加渗透压检查,修订,pH,值检查限度,修订装量检查限度,修订效价测定方法为底物法,2.,规范肝素钠注射液的生产工艺和处方,3.,注重对肝素原料的质量控制（粗品、精品,),4.,继续肝素的质量研究工作,杂质分析、结构分析（核磁、离子色谱法单糖组成、游离和结合硫酸根含量等）、分子量与分子量分布测定等工作,肝素钠注射液,胸腺肽,背景：,胸腺肽是从健康猪或牛胸腺中提取的分子量小于,10000,道尔顿的的混合多肽类药物；,具有调节人体细胞免疫功能的作用，能促进,T,淋巴细胞成熟。用于各种原发性或继发性,T,细胞缺陷、各种细胞免疫功能低下的疾病和肿瘤的辅助治疗；,临床上常用的制剂有：胸腺肽注射液、注射用胸腺肽，临床上使用：皮下或肌肉注射、静脉滴注；,目前在临床用药的过程中胸腺肽注射剂还存在过敏等