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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第四节 血型鉴定与交叉配血试验,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第二章 临床血液学检测,第四节 血型鉴定与交叉配血试验,2,各种血液成分包括红细胞、白细胞、血小板及某种血浆蛋白在个体之间均具有抗原成分的差异,受独特的遗传基因控制。,血型,是,各种血液成分的,遗传多态性标记。,血型系统:,由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系。,1983,年,已发现,20,多个人类红细胞血型系统,,400,多种血型抗原。,“免疫血液学”,重点讲述与输血工作有密切联系的红细胞血型系统。,3,血型系统,红细胞血型系统,ABO,血型系统,,1900,年,,Landsteiner,发现,Rh,血型系统,,1940,年,,Landsteiner,和,Weiner,发现,其他血型系统,白细胞抗原系统,血小板抗原及抗体,血清蛋白成分的抗原特异性,4,(一),ABO,血型系统,1,、,ABO,血型系统的抗原和抗体,根据,红细胞表面是否具有,A,或,B,抗原,血清中是否存在抗,A,或抗,B,抗体,,,ABO,血型系统可分为四型:,ABO,三个基因,组成,六种基因型,:,AA,、,AO,、,BB,、,BO,、,AB,、,OO,;,A,、,B,为显性基因,,O,为隐性基因,所以只有,四种表现型,A,、,B,、,O,、,AB,。,一、红细胞血型系统,血型,红细胞上抗原,血清中抗体,基因型,A,A,抗,B,AA,或,AO,B,B,抗,A,BB,或,BO,O,无,抗,A,,抗,B,AB,AB,A,、,B,无,OO,5,一、红细胞血型系统,(一),ABO,血型系统,1,、,ABO,血型系统的抗原和抗体,A,或,B,抗原在胚胎期及出生时便能检出,但敏感性较低,到,20,岁左右时才达高峰。抗原性终身不变,但到老年敏感性有所下降。,A,和,B,血型物质除存在于红细胞和其他组织细胞表面外,还广泛存在于体液和分泌液中,以,唾液中含量最丰富,脑脊液中无,。,案例一,6,(一),ABO,血型系统,1,、,ABO,血型系统的抗原和抗体,人在出生前尚未产生抗体,出生后,3-6,个月才开始出现,至青春期达高峰。产生抗体的功能可延续终身,但其效价随着年龄增长而逐渐降低。,天然抗体:,无明确的抗原刺激而天然存在的抗体,主要是,IgM,。,环境中广泛存在的微生物、花粉、粉尘等与,A,或,B,血型抗原相似,通过隐性刺激产生血型抗体。,免疫性抗体:,由已知抗原刺激产生的抗体,,主要是,IgG,。,一般通过输血、妊娠、注射三种途径接触同种异体抗原,。,一、红细胞血型系统,7,天然抗体和免疫性抗体的区别,8,(一),ABO,血型系统,1,、,ABO,血型系统的抗原和抗体,抗,A,、抗,B,抗体:,抗,A,与抗,B,主要是,IgM,,也有少量的,IgG,和,IgA,类抗体。,分泌液和体液中多为,IgA,类抗体。,抗,A,、,B,抗体:,O,型人血清中,以,IgG,为主。,不是抗,A,和抗,B,的混合物。,识别,A,抗原和,B,抗原的共同表位。,一、红细胞血型系统,9,(一),ABO,血型系统,2,、,ABO,血型的亚型,(,1,),A,亚型,A,1,亚型红细胞上有,A,1,和,A,抗原,其血清中含有抗,B,抗体。,A,2,亚型红细胞上只有,A,抗原,血清中含有抗,B,抗体和少量抗,A,1,抗体。,A,X,亚型红细胞与,B,型血清不发生凝集或凝集反应甚弱,但却能与,O,型血清发生凝集。血型鉴定时,应加,O,型血清,以防将,A,X,型误定为,O,型。,(,2,),B,亚型,亚型不多见,临床意义不大。,一、红细胞血型系统,10,ABO,血型的亚型,11,(一),ABO,血型系统,3,、,ABO,血型鉴定和交叉配血试验,(,1,),ABO,血型鉴定,:,ABO,血型抗体能在生理盐水中与相应红细胞抗原结合而发生凝集反应。由于血液持续存在,ABO,抗体,所以血型鉴定必须正反定型。,直接试验(正定型、细胞定型):,用标准的抗,A,及抗,B,血清以鉴定被检者红细胞上的抗原。,反转试验(反定型、血清定型):,用标准的,A,型及,B,型红细胞鉴定被检者血清中的抗体。,只有抗原鉴定和抗体鉴定完全相符才能肯定其血型类别。,一、红细胞血型系统,12,患者在生病进行治疗的过程中,身体状况不是始终保持一致的,当血型抗原有一方表达减弱,有可能AB型就成了A型,或者B型就变异成了O型。因此,也许三家医院存在验错血型的可能,也可能三家医院都没有验错,而是病人血型出现了变异。,某些病人特别是肿瘤病人在生病治疗时可能发生血型变异。,案例二,13,加入,O,型血清:,检出抗原性较弱的,A,X,亚型红细胞。,加入,O,型红细胞:,检出被检者血清中是否含有与,ABO,血型系统无关的红细胞异常抗体。,14,血型鉴定方法,-,玻片法,15,血型鉴定方法,-,微柱凝胶法,凝胶为填充物,只允许游离红细胞通过,抗,A,管、抗,B,管、抗,D,管:含抗体的凝胶,用于红细胞上,A,、,B,及,D,抗原检测,A,细胞、,B,细胞及,Ctl,管:不含血型抗体凝胶,A,细胞、,B,细胞用于检测血浆中的抗体,Ctl,管用于自身对照,ABO/D,血型正反定型卡,16,一、红细胞血型系统,(一),ABO,血型系统,3,、,ABO,血型鉴定和交叉配血试验,(,2,)交叉配血试验,输血前必须进行交叉配血实验。,分别将供血者的,RBC,与受血者的血清及供血者的血清与受血者的,RBC,进行的配合试验。,交叉配血试验的意义,(,1,)检验血型鉴定是否有误。,(,2,)检验血清中是否有不规则抗体。,17,案例三,18,凝集,凝集,不凝集,不凝集,交叉配血试验,交叉配血的主侧,:,供血者红细胞,+,受血者血清,交叉配血的次侧,:,供血者血清,+,受血者红细胞,配血不合,不能输血,配血相合,可以输血,紧急情况少量缓慢输血,密切,观察,如有输血反应,立即停止,不凝集,19,一、红细胞血型系统,(一),ABO,血型系统,3,、,ABO,血型鉴定和交叉配血试验,(,2,)交叉配血试验,配血方法,1,、,生理盐水法,:,无输血史及妊娠史,2,、,间接抗人球蛋白法:,有反复输血史及妊娠史,尤其是有输血反应史、生育过新生儿溶血病婴儿的妇女、大量输血时须同时做供血者之间的交叉配血实验。,3,、,卡式微柱凝胶法,20,一、红细胞血型系统,(一),ABO,血型系统,4,、,ABO,血型系统的临床意义,(1),输血,:,坚持同型输血,。,(2),新生儿同种免疫溶血病,:,母亲与胎儿血型不合引起血型抗原免疫所致的一种溶血疾病。,主要见于,O,型母亲、,A,或,B,型胎儿,可发生在第一胎。,(3),ABO,血型与器官移植,(4),亲缘鉴定、,法医鉴定、疾病相关性调查等,案例四,案例七,案例八、九,案例五、六,21,案例四,22,案例五,孕妇陈某,24岁,血型O型RhD阳性;丈夫A型RhD阳性,预产期日入院。次日孕妇肝功能检查异常:ALT:369 U/L,TBIL:54mol/L。剖腹生1子。3h后 婴儿皮肤、巩膜黄染明显。肝功能检查:ALT:41 U/L,TBIL:298mol/L。,用蓝光照射及白蛋白注射治疗黄疸进行性加深,全身重度黄染,送上级医院,已错过换血治疗的最佳时间,婴儿病情进展成核黄疸,大脑运动中枢受损。,实验室检查见下表。,盐水法,木瓜酶法,抗人球蛋白试验,抗体放散试验,直接法,间接法,患儿,-,+,+,/,放散出,IgG-A,抗体,产妇,-,+,/,+,23,案例六,孕妇华某,,28,岁,血型,O,型,RhD,阳性,,3,年前曾因,IgG-,抗,A,抗体效价,1:256,致死胎。丈夫血型,A,型,基因型,AA,型,,RhD,阳性。怀孕前数月口服甘草、黄芩、茵陈、大茵等中药。,怀孕,1,个月,测,IgG-,抗,A,效价,1:8,,继续服中药,每半个月复查,孕期,IgG-,抗,A,抗体效价控制在,1:32,内。孕,8,个月剖腹产。婴儿出生后肝功能检查见表。,ALT,(U/L),TBil,(mol/L),治疗,出生时,10,10,观察,2d,12,15,观察,5d,26,37,蓝光照,10d,22,45,蓝光照,20d,32,20,观察,30d,12,8,出院,正常值,40,10,案例七,25,案例八,父 母,子 子,AB,O,AB,O,26,案例九,父母,O,型,孩子,B,型?,27,一、红细胞血型系统,(二),Rh,血型系统,1,、,Rh,血型系统的抗原和抗体,抗原,主要有,5,种。抗原性强弱依次为,D,、,E,、,C,、,c,、,e,,以,D,抗原性最强。,粗略地称含,D,抗原的红细胞为,Rh,阳性,不含,D,抗原的为,Rh,阴性。我国,Rh,阴性者甚为少见。,Rh,抗体主要是不完全抗体,抗,D,抗体最常见,主要为免疫性抗体,,Rh,阴性者接受,Rh,阳性血后通过免疫产生。,绝大多数为,IgG,抗体,28,一、红细胞血型系统,(二),Rh,血型系统,1,、,Rh,血型系统的抗原和抗体,Rh,血型的亚型,弱,D,最有临床意义。弱,D,是,D,抗原的变异体,其免疫原性较弱。不能与所有的抗,D,血清发生反应,易被误定为,Rh,阴性。,做为供血者,弱,D,是,Rh,阳性。,如果将弱,D,血输给,Rh,阴性受血者时,仍有产生抗,D,抗体的可能性,因此不能将弱,D,输给,Rh,阴性的受血者。,做为受血者,弱,D,是,Rh,阴性。,当弱,D,型人接受输血时应是,Rh,阴性血,否则可能产生抗,D,。,29,一、红细胞血型系统,(二),Rh,血型系统,2,、,Rh,血型系统的鉴定,仅用,抗,D,血清,进行鉴定,粗略地分为,Rh,阳性和阴性两类。,鉴定方法,完全抗体:生理盐水凝集试验,不完全抗体:胶体介质法、木瓜酶法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法等,30,一、红细胞血型系统,(二),Rh,血型系统,3,、,Rh,血型系统的临床意义,(,1,),Rh,血型系统所致的溶血性输血反应:,Rh,血型系统一般不存在天然抗体,故在第一次输血时,不会发现,Rh,血型不合,,Rh,阴性的受血者接受了,Rh,阳性血液输入后便可产生免疫性抗,Rh,抗体,再次输入,Rh,阳性血液时,发生溶血性输血反应。,第一次输血不必考虑,Rh,血型,第二次输血需考虑,Rh,血型是否相同。,31,谢小榕,AB,型,Rh,阴性,1997,年,5,月,30,日,车祸。,天津医院抢救时,未做,Rh,血型鉴定,,输入了,AB,型,Rh,阳性的血。,第二次取钢板的手术不能再输,AB,型,Rh,阳性血。,以后存在生育障碍。,2002,年,9,月,3,日,二审判决要求天津医院对谢小榕因输血引起的损害后果承担,60%,的责任,肇事司机承担,40%,的责任。,但判决也同时要求谢小容有防止损害结果发生的注意义务。即尽量注意保护自身安全,防止各种危险情况发生,避免各种医学文献上记载的损害结果出现。,案例十,32,案例十一,33,(二),Rh,血型系统,3,、,Rh,血型系统的临床意义,(,2,)新生儿,Rh,溶血病,母亲为,RhD,阴性,胎儿,RhD,阳性,Rh,溶血病一般不发生在第一胎,由于自然界无,Rh,血型物质,第一次孕儿为,Rh+,,胎儿的,RBC,因某种原因,(,如胎盘绒毛脱落,),进入母体,或分娩时进行胎盘剥离过程中血液挤入母体,孕妇体内产生抗,Rh,的抗体。第二次妊娠时,孕妇体内的抗,Rh,的抗体,通过胎盘导致胎儿溶血,Rh,阴性母亲输过,Rh,阳性血、有流产或人工流产史,也可发生在第一胎,一、红细胞血型系统,34,35,案例十二,孕妇王某,,25,岁,孕,7,个月后死胎。病史:,10,岁时因贫血曾输血多次。,实验室枪查:孕妇血型为,O,型,RhD,阴性,抗,D,强阳性,滴度,1:128,。,脐血检查见表。,谱细胞,Rh-hr,盐水法,抗人球蛋,白试验,D,C,E,c,e,1,+,0,+,+,+,-,+
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