实验五化学因素对微生物生长的影响

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验五 化学因素对微生物生长的影响,一、实验目的,了解化学药剂的杀菌和消毒作用，掌握消毒剂的浓度和使用方法。,二、实验原理,一些化学药剂对微生物的生长有抑制或杀死作用。因此，在实验室内和生产生活中常利用某些药剂进展杀菌或消毒。不同的药剂或同一药剂对不同微生物的杀菌能力不同。此外，药剂浓度、作用时间及环境条件不同，其效果也不同。,常用的化学药剂有重金属及其盐类、有机溶剂醇、酚、醛等、卤族元素及其化合物、染料和外表活性剂等。,重金属离子,汞、铜、银,等,机制：,与菌体蛋白质结合使之变性,某些酶蛋白的巯基相结合而使酶失活，,蛋白质沉淀,鳌合作用,有机溶剂酚、醇、醛,机制：可使蛋白质或核酸变性，也可破坏细胞膜通透性使内含物外溢,卤族元素碘可与蛋白质酪氨酸残基不可逆结合而使蛋白质失活，氯气与水发生反响产生的强氧化剂也具有杀菌作用,染料在低浓度条件下可抑制细菌生长，革兰氏阳性菌比革兰氏阴性菌更敏感,外表活性剂能降低溶液外表张力，可改变微生物细胞膜的通透性，也能使蛋白质变性,实验器材,菌种：大肠杆菌E.coli、枯草杆菌Bvacillus subtilis。,培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,溶液或试剂：2.5%碘酒、5%石炭酸、75%乙醇、100%乙醇、0.005%龙胆紫、0.05%龙胆紫、0.1AgNO3。,实验步骤,1,、制平板,：取无菌平皿,4,个,，将已熔化并冷却至,50,左右的牛肉膏蛋白胨培养基按无菌操作法倒入平皿中，水平放置待凝固。,2,、制备菌悬液,：取无菌水试管,2,支,，用接种环分别取大肠杆菌、枯草杆菌,各,1,2,环,接入无菌水中，充分混匀，制成菌悬液。,3,、接种,：用,微量移液器,分别吸取已制好的菌悬液,0.1ml,接种于平板上，用无菌玻璃涂布棒涂均匀。,4、加药剂：将已涂布好的平板底皿划分为46等份，每一等份注明一种消毒剂的名称。用无菌打孔器打孔，注入10微升抑菌剂。用微量移液器参加等量消毒剂。平板中间小孔加无菌水为作对照。,5、培养：将平皿倒置放入37培养箱中，24h后取出观察抑杀菌圈的大小。,实验结果和实验报告,测量、记录抑菌圈直径大小。,比较分析不同消毒剂的杀菌能力，三种菌对同种消毒剂的耐受力,完成思考题1、2。,消毒剂,抑（杀）菌圈直径（,mm,）,消毒剂,抑（杀）菌圈直径（,mm,）,2.5%,碘酒,0.25%,新洁尔灭,5%,石炭酸,0.005%,龙胆紫,75%,乙醇,0.05%,龙胆紫,100%,乙醇,0.1,AgNO,3,测量、记录抑菌圈直径大小。,比较分析不同消毒剂的杀菌能力，三种菌对同种消毒剂的耐受力,完成思考题1、2。,实验结果和实验报告,预备下周实验,每组包扎1ml、10ml移液管各1支，100ml量筒一个，灭菌,每组配制三倍乳糖胆盐蛋白胨培养基200ml，分装2个50ml锥形瓶，10支5ml试管加倒置的杜氏小管，115灭菌15min；灭菌,配置100ml牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。,