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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,课件药物血浆半衰期测定,实验目的,1.,测定磺胺,噻唑,钠半衰期(,t,1/2,)等药动学参数的基本方法。,2.,理解常用药动学参数的临床意义。,9/28/2024,2,实验原理,药物在机体内由于代谢、排泄等原因,血液中药物浓度逐渐下降。多数药物的血液浓度变化呈一级反应,即药物血液浓度的对数与相应时间呈直线关系。,9/28/2024,3,实验原理,磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物,在酸性溶液中,可与亚硝酸钠起重氮反应,产生重氮盐。在碱性溶液中,重氮盐可与酚类化合物(麝香草酚)起偶氮反应,形成橙红色的偶氮化合物。可在,525nm,波长下进行比色测定。根据,Beer-Lamber,定律,浓度与光密度成正比关系。其化学反应式如下:,橙红色,9/28/2024,4,材料与方法,一、,实验动物,:家兔,1,只。,二、,器材,:,注射器,2ml 4,支,,离心管(,8,支),,EP,管(,3,个),蒸馏水,废液杯,废物杯,(,放废弃枪头,),,酒精棉球(干、湿)、标记笔,手套(,2,副),移液器(,1mL,、,100uL,)及相应的枪头,,试管架,离心机,分光光度计。,三、,药品,:10%,磺胺噻唑钠,磺胺噻唑钠,,8.1%,三氯醋酸,,0.5%,亚硝酸钠,,0.5%,麝香草酚(,20%NaOH,新鲜配),、肝素注射液。,9/28/2024,5,方法与步骤,1.,取试管,4,只,依次用,A,、,A,标,、,A,1,、,A,2,标记,各加入,8.1%,三氯醋酸备用。,2.,取,EP,管,3,只,依次用,B,0, B,1, B,2,标记。,3.,取试管,4,只,依次用,、,标,、,1,、,2,标记,注射器、针头及,EP,管经肝素处理,以抗凝。,4.,取家兔,称重,计算给药剂量,: 10%,磺胺噻唑钠溶液,1ml/kg,(,100mg/kg,),。,5.,食指轻弹兔耳根部,使耳缘静脉充盈。,6.,以酒精棉球消毒后进行静脉穿刺,耳缘静脉注入,10%,磺胺噻唑钠溶液,,记录注完时间(,准确到秒,)。,6,.,给药前,(0 min),、给药后,5min,、,35min,,分别从耳缘静脉采血,1ml,(给药前采血量要求达到,1ml,),,分别置于,EP(,B,0, B,1, B,2,),管,记录取血标本的准确时间(,准确到秒,)。,.,从,EP,管中吸取,400l,加入相应的各,A,管(,A,和,A,标,管均取自从,B,0,管),各管以,3000,转,/,分离心,10min,(,注意配平,);分别取离心后的上清液至标记管(,取上清至,标,管,),加,0.5%,亚硝酸钠溶液,0.5 ml,,摇匀,再加,0.5%,麝香草酚,1ml,,可见橙红色反应。以给药前血样作空白对照,分光光度计于,525nm,波长下测,OD,值。,.,标准管的准备:在,标,管中加入,磺胺噻唑钠溶液(,0. 2mg/ml,),,,其它反应步骤同上。,9/28/2024,7,静脉取血约大于,准确移液,.,%,三氯醋酸,混匀,1500,转,/,分离心,5min,准确移上清液,加亚硝酸钠,加,0.5%,麝香草酚,1ml,525nm,测光密度,A,B,C,偶氮反应,橙红色,9/28/2024,8,分光光度计使用,给药后不同时间点的磺胺,噻唑,钠浓度,管号,标准管,给药时间,光密度值,磺胺,噻唑,钠浓度,磺胺,噻唑,钠对数浓度,9/28/2024,10,计算,9/28/2024,11,计算,第,1,次取血的药物浓度,第,2,次取血的药物浓度,给药后两次取血的时间间隔,9/28/2024,12,计算,体内药物总量,/kg,9/28/2024,13,注意事项,注射器、,EP,管全用肝素,溶液过,一遍,所有管子牢记要做好标记,。,耳缘静脉穿刺尽量从远端开始,进针后水平推进。给药前先抽血,接着推注药物可减少一次穿刺。,消毒用酒精棉球,压迫止血用干棉球。,给药时间及各取血点均要准确记录,加样精确,减少误差。,离心所得上清液加入亚硝酸钠充分摇匀后方可加入麝香草酚。,离心注意配平,9/28/2024,14,药物浓度,OD,值,0,0,0.000667,0.29,0.001333,0.566,0.002667,1.045,0.005333,1.684,0.010667,2.4,9/28/2024,15,Thank You !,不尽之处,恳请指正!,
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