移液器的使用

Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,*,中国动物疫病预防控制中心下属企业,北京世纪元亨动物防疫技术有限公司,哈尔滨元亨生物药业有限公司（生产基地）,移液器的使用方法和日常保养,孙博,2015.11.05,移液器工作原理：,常规的移液器技术规格,准确性,通常 +/- 1%,重复性,通常 0.25% 到 0.33%,一般情况下，微量移液器要稍差一些,准确性和重复性都差,准确性差但重复性高,准确性好而且重复性高,移液操作循环,排液及吹液,不规范的移液操作可能带来0.1%到5%的移液误差，甚至更高！,移液操作相关技术,量程优化,吸头浸入,吸液,排液,一致性及手温影响,误差的影响,超过1的误差,所有操作者都需要注意,0.6% -1%的误差,一般操作者视实验的要求自行注意,小于 0.5%的误差,校准操作者需要避免所有可能的误差,最佳的量程,通常的量程：,一般在 10% - 100% 量程范围内可以操作,在 10% 量程操作需要较高的操作技巧,最佳的量程：,选择35% - 100% 量程范围进行操作,对操作技巧依赖更少,保证移液的准确性和精度,10%,100%,35%,选择合适的量程，可提高1%移液准确性！,量程设定,移液器量程的设定原则：由大到小！,当由小量程到大量程时：,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处,回调到所需量程处,在量程设定过程中,不要将旋钮旋出最大量程,否则可能会卡住内部机械装置而损坏了移液器,正确的量程设定可以提高0.5%的移液准确性！,吸头浸入角度,正确的吸头浸入角度,错误的吸头浸入角度,以正确角度进行吸液操作可提高0.5%的移液准确性 (微量程移液器可达 2.5%),吸头浸入深度,以正确吸头浸入深度进行吸液操作可提高1%的移液准确性 (微量程移液器可达 5%),移液器规格,吸头浸入深度,2,L和10,L,1 mm,20,L和100,L,2-3 mm,200,L和1000,L,3-6 mm,5000,L 和 10 mL,6-10 mm,深度,吸头浸入时间(针对大容量移液器),吸液后保持吸头浸入液面最少1秒,将吸头平缓移开液面,对吸取大容量样品或者高粘度样品尤为重要,吸液：润洗吸头,用同一样品对吸头进行润洗,先吸取样品，然后排回样品池或废液槽,润洗有助于提高吸头多次相同移液操作的一致性,润洗吸头可提高0.5%的移液准确性!,无润洗,无润洗,移取冷冻样品 (例如 冰浴样品),移取高温样品 (37,o,C),可以考虑使用活塞外置式移液器,当样品温度很高或者很低时，切勿润洗吸头！,吸液速度的影响,保持平顺，控制好吸液速度,过快的吸液速度，导致：,样品液进入套柄,对活塞和密封圈造成损伤,带入气雾,造成样品交叉污染,不正确的吸液速度会导致至少5%的准确性下降！,排液,常规排液操作,沿内壁排液（常规）,正确的排液技术提高1的移液准确,性,排液,常规排液操作,在液面上方排液,排液,常规排液操作,在液面下方排液,一致性,应保持吸液和排液节奏的一致性。,按压或释放按钮的速度平稳一致。,到达第一停止点的用力应保持一致。,吸头的浸入深度保持一致。,移液器倾斜角度一致,达到最好的操作一致性,使用电动移液器，只需很少的人为操作,操作的一致性可提高1的移液准确,性,手温的影响,手温对移液误差的影响可以达到0.2%以上,小结：,误差大小,误差范围 %,技术操作,大,1.0%- 5.0%,吸头浸入深度/角度不正确,(特别注意微量程移液器),错误的吸液速度,中,0.5% -1.0%,选择合适的量程,吸头浸入深度,吸液速度,排液技术,一致性,小,小于 0.5%,量程设定 (已选合适量程),吸头浸入角度,润洗,手温影响,正确的吸头安装方法,常见的错误安装方法,在将吸头套上移液器时，使劲地在吸头盒上敲几下。,可能导致地后果,1.移液器的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住 。,2.移液器套柄弯曲,正确的吸头安装方法:,单道移液器：移液器垂直插入吸头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合,如何防止液体进入套柄,利用带滤芯的吸头，它有内部疏水过滤器，避免气雾和液体进入套柄。,当吸头中有液体时，不要颠倒或平放移液器。,缓慢吸液，握住移液器保持垂直或20度以内倾角。,量程在5ml和5ml以上的移液器，配合使用厂家提供的专用安全过滤器。,移液器正确的放置方法,1.如不使用，要把移液器的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态,以保护弹簧,2.使用完毕，尽量将其竖直挂在移液枪架或挂钩上，但要小心别掉下来。这种保管方式可以延长移液器的使用寿命.,定期测漏和校准,定期检查是否有漏液现象。简易的方法如下：,吸取液体后将移液器垂直放置在枪架上，静止15秒，观察吸头顶端是否有液滴,如果漏液，原因大致有一下几方面：,1,、,吸头是否匹配；2、密封系统是否正常；3、如果是易挥发的液体（许多有机溶剂都如此），则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体，然后再移液。,比较专业的方法是使用瑞宁公司的测漏仪。,由厂家或专业机构提供定期的较准，通常一年一到两次,高粘度样品移液的窍门: 反向模式移液,适用于高粘度样品,不适用于水溶液,同常规移液操作相反的流程,第二零点吸液,第一零点排液,移液器的维护保养,敬请批评指正！,