微生物学基础知识及消毒灭菌知识

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,微生物学基础知识,1,微生物学基础知识,微生物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。(一般个体0.1mm),特点：个体微小、结构简单、进化地位低等,2,微生物包括的种类：,微生物包括的种类：,n,原核生物类：,单细胞-细菌、放线菌、支原体、衣原体等,n,真核生物类,：,单细胞-酵母,多细胞-霉菌、原生动物、藻类,n,非细胞类,：病毒、类病毒、朊病毒,3,微生物的五大共性：,体积小、比面大（最基础特征）,吸收多、转化快,生长旺、繁殖快,适应强、易变异,分布广、种类多,4,如何控制有害菌,5,注意以下三个概念的区别：,n,灭菌（sterilization）,是指对所有微生物的杀灭作用，包括所有微生物的繁殖体和芽孢或孢子。,n,消毒（disinfection）,是指对病原微生物繁殖体的杀灭作用，但不能杀死芽孢等全部微生物。,n,防腐（antisepsis）,是指抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止物品发生霉腐的措施。,6,灭菌,7,介绍几种常用的灭菌方法,n,干热灭菌法,n,湿热灭菌法,n,辐射灭菌法,n,过滤灭菌法,n,气体灭菌法,8,干热灭菌法,用于能耐受较高温度，却不宜被蒸汽穿透，或者易被湿热破坏的物品的物品的灭菌。由于空气热穿透力差，所以温度高，时间长,。,n,焚烧法： 是将被灭菌物品在火焰中燃烧，使所有的生物质碳化。 简单、彻底。 如接种环、镊子、传染病人衣物。,n,干燥热空气灭菌法 ：将物品放入烘箱内，然后升温至150170 ，维持12小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品灭菌,。,9,湿热灭菌法,湿热灭菌法：,在饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽中进行灭菌的方法。具有温度低、时间短、灭菌效果高的特点 。,原理：,n,蒸汽冷凝会放出潜热；,n,饱和水蒸汽穿透力强；,n,湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，主要破坏氢键结构。,10,常压法,n,巴氏消毒法 eg：牛奶,n,煮沸消毒法 eg：饮用水,n,间歇灭菌法 eg：塑料餐具,11,加压法,n,常规加压蒸汽灭菌法,条件：121,（0.1MPa,） 1520min 115 （0.1MPa） 20-30min。,适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品,n,连续加压蒸汽灭菌法（又称“连消法”）,条件：135140 加热5秒15秒， 保温5-10分 。,12,影响湿热灭菌的因素,n,细菌的种类和数量,不同细菌，同一细菌的不同发育阶段对热的抵抗力有所不同。多数细菌和真菌的营养体在60，510分钟即死亡；,酵母菌和真菌的孢子稍耐热，80以上才会死亡；而细菌的芽孢一般在120，维持15分钟才能杀死。细菌数越少，灭菌时间越短。,n,药物性质与灭菌时间,灭菌温度越高灭菌时间越短。但应根据被灭菌物的稳定性，应在达到有效灭菌的前提下尽可能降低灭菌温度或缩短灭菌时间,13,n,蒸汽的性质,蒸汽有饱和蒸汽、湿饱和蒸汽和过热蒸 汽。饱和蒸汽热含量较高，热穿透力较大，因此灭菌效力高。湿饱和蒸汽带有水分，热含量较低，穿透力差，灭菌效力较低。过热蒸汽温度高于饱和蒸汽，但穿透力差，灭菌效率低。,n,介质的性质,制剂中含有营养物质，如糖类、蛋白质等，增强细菌的抗热性。细菌的生存能力也受介质pH值的影响。一般中性环境耐热性最大，碱性次之，酸性不利于细菌发育。,14,辐射灭菌法,n,紫外线灭菌法,n,射线灭菌法,15,紫外线灭菌法,定义：是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。,原理：紫外线作用于生物体的DNA，促其形成胸腺嘧啶二聚体，造成菌体死亡。 另外，它可使空气中氧形成臭氧（O3），臭氧也会与生物体的活性成分发生氧化反应，造成它们失活。,适用范围：由于紫外线进行直线传播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水。因此只适用于物体表面、洁净室的空气及水的灭菌，而不适用于药液的灭菌、固体物质深部的灭菌。,16,用紫外线灭菌时要注意以下问题,n,紫外线的杀菌力，随使用时间增加而减退。因此一般使用时间达到额定时间70时应更换紫外线灯管，以保证杀菌效果。,n,紫外线的杀菌作用因菌种而异。,n,紫外线照射通常按相对湿度为60的基础设计，室内湿度增加时，照射量应相应增加,n,紫外线灭菌效果与照射的时间长短有关。,n,紫外线灭菌照射的时间应视空间大小而定，而且距离不能太远，一般为30cm1m左右。,17,臭氧消毒法,原理：臭氧（O3）在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O2）和单个氧原子（O），后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为普通氧分子（O2），不存在任何有毒残留物，故称为无污染消毒剂。它不但对各种细菌（包括肝炎病毒、大肠埃希菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，而且对霉菌也很有效。,18,过滤灭菌法,是用过滤方法除去活的或死的微生物的方法，是一种机械除菌方法，这种机械叫除菌过滤器。主要用于对热不稳定的药物溶液、气体、水的灭菌。,繁殖型细菌很少小于1m的，芽孢大小为0.5m或更小些。所以，对于以过筛作用滤过的滤器，其孔径大小必须小到足以阻止细菌和芽孢进入滤孔之内。常用除菌滤器有微孔薄膜器，折叠式纤维素滤棒，一般选用孔径0.22m。,19,高压蒸汽灭菌（热压灭菌）,超过一个大气压时，水的沸点高于,100,，反之亦然。高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。,常用条件为：,115.5,、,30min,；,121.5,、,20min,；,126.5,、,15min,。,20,注意事项,a.,必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的要求。,b.,注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是一致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产品，应制定一固定的灭菌曲线（像冻干曲线一样）。,c.,定期检查灭菌器内温度的准确性。,21,类别,名称,浓度,消毒用途,性质,酚类,甲酚皂,（来办）,3-5%,地漏,溶与水，呈碱性反应，有除垢作用，杀菌力强、有毒性，消毒手有麻木感,醇类,乙醇,70,75,皮肤、工具、设备、容器,能使蛋白质变性，有挥发性，无残留，作用时间短，对芽孢无效,醛类,甲醛,每立方米用,37,40,甲醛液,8,9ml,，加,4,5g,高锰酸钾,熏蒸无菌室,能破坏细菌繁殖体及许多芽孢、病毒、真菌；有挥发性，对眼睛及皮肤有刺激性。,表面,新洁尔灭,0.1,0.2,皮肤、工具,破坏细胞膜，使蛋白质,22,23,选择消毒剂的原则,n,在使用条件下高效、低毒、无腐蚀性，无特殊的嗅味和颜色，不对设备、物料、产品产生污染,n,在有效抗菌浓度时，易溶或混溶于水，与其他消毒剂无配伍禁忌,n,对大幅度温度变化显示长效稳定性，贮存过程中稳定,n,消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株,n,价格便宜,24,除热原技术,热原,是指注射后能引起人体特殊致热反应的物质。 是微生物细胞壁破裂释放出的一种内毒素，是由磷脂、脂多糖和蛋白质组成的复合物。,热原的危害,人体被注入含有热原的注射液后，大约半小时就能产生发冷、寒战、体温升高、恶心呕吐等不良反应，严重者出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。,25,热原的性质,a耐热性：100加热不降解，在18034小时、20060min、2503045min才能彻底破坏。,b可滤过性：热原体积小（约15nm），可通过一般的滤器和微孔滤器。可被活性炭吸附而除去。 c水溶性：热原溶于水,d不挥发性：热原可随水蒸气进入注射用水中。,e其他：可被强酸、强碱、强氧化剂、超声波破坏。,26,除热原的方法,a高温法适用于针筒、其它玻璃器皿。洗涤后，干热250、30min。 b酸碱法适用于玻璃容器、用具。用洗液或稀NaOH液处理。 c吸附法适用于注射液。常用的吸附剂有活性炭、白陶土等。 d滤过法适用于注射液。滤过法包括交联葡聚糖凝胶滤过、反渗透法滤过、超滤法滤过。,27,谢谢大家,28,