醌类化合物的提取分离实例

单击此处编辑母版标题样式,*,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,醌类化合物的提取,提取方法,1.,水蒸气蒸馏法,适用于小分子的游离醌类化合物的提取，由于其具有挥发性，可随水蒸气馏出，故可用此法提取，如,白雪花,中,蓝雪,醌的提取。,实例 白雪花粗粉加水浸泡水蒸气蒸馏馏出液放置 结晶抽滤 结晶甲醇重结晶蓝雪醌（,mp,：,75,76,）,2.,有机溶剂提取法,常用甲醇或乙醇提取，可将不同极性或类型的醌类成分都提取出来，得到总醌类再进行分离。,1,、用于提取苷元（游离醌类）。,2,、可用苯、氯仿等极性较小的溶剂提取,。,实例： 大黄中总蒽醌成分的提取,大黄粗粉,100g,置,1000ml,圆底烧瓶中，加入,95%,乙醇,250ml,，回流提取,2hr,，趁热抽滤,醇液,药渣,加入,95%,乙醇,200ml,，回流提取,1.5hr,，趁热抽滤,醇液,药渣,乙醇提取液,静置冷却，抽滤,滤液,减压回收乙醇至糖浆状，将浓缩物转移至,250ml,三角瓶中,乙醇总提物,放冷，加入乙醚,60ml,冷浸，振摇,20,将乙醚液倾入,500ml,三角瓶中,乙醚层,浸膏,40ml,乙醚,+16ml,丙酮冷浸三次（每次,15,）,乙醚层,浸膏,乙醚总提液,实例,3.,碱提酸沉法,适用于具有酚羟基的醌类化合物，由于其可溶于碱液，加酸后又沉淀出。,1,、用于提取带游离酚羟基的醌类化合物。,2,、利用酚羟基与碱成盐溶于碱水中，酸化后沉淀析出。,4.,超声提取法,研究超声波技术对大黄中蒽醌类成分提取率的影响,并与传统提取方法做比较,.,方法,:,以超声波强化提取法为试验组,以常规煎煮法及乙醇回流法对对照组,进行平行试验,.,结果,:,以水为提取溶剂,采用超声波强化提取,10 min,对游离蒽醌的提取率即与水煎煮法煎煮,60 min,提取效果相当,;,以乙醇为提取溶剂的提取效果明显好于水,几种方法相比较,以乙醇作为提取溶剂超声波萃取法对大黄蒽醌的提取效果最好,.,结论,:,超声波法提取大黄蒽醌类成分具有提取效率高、操作简便、省时等优点,值得推广应用,.,5.,微波提取法,优选微波技术提取大黄游离蒽醌的工艺。,方法：先采用单因素考察,然后采用正交试验法考察微波输出功率、乙醇浓度、浸出时间、料液比,4,个因素对提取率的影响,优选大黄游离蒽醌的最佳浸出方案。,结果：采用,70%,乙醇溶液在微波输出功率中高火,用,70%,乙醇,料液比为,18,提取,5 min,提取,2,次,大黄游离蒽醌提取率为,1.31%,相对提取率达到,88.52%,。,结论：用微波浸提法提取大黄中的蒽醌类成分效率高、操作简便、省时。,游离醌类化合物的分离,分离方法,1,、羟基蒽醌的酸性差别很大时，采用,PH,梯度萃取法。,由于蒽醌羟基位置、数目及羧基的有无，其酸度大小是有区别的，可分别溶于不同碱性的水液，故可采用梯度,PH,萃取法。此法为分离游离蒽醌衍生物的经典方法，也为常用方法。,5%NaHCO3,液,含,-COOH,及两个以上,-,酚,OH,5%Na2CO3,液 含一个,-,酚,OH,蒽醌类,1%NaOH,液 ,含两个,a-,酚,OH,蒽醌类,5%,NaOH,液 含一个,a-,酚,OH,蒽醌类,实例 大黄中蒽醌类化学成分的提取分离技术,根据大黄中的羟基蒽醌苷经酸水解成游离苷元，苷元可溶于氯仿而被提出的原理。再利用各羟基蒽醌类化合物酸性不同，采用,pH,梯度萃取法,分离而得各单体苷元。,五、应用举例,实例 番泻叶中蒽醌类化学成分的提取分离技术,番泻苷,A,不溶于水、苯、乙醚或氯仿，难溶于甲醇、乙醇或丙酮，但在与水相混的有机溶剂中的溶解度随含水量的增加而增大，溶剂中含水量达,30%,时,溶解度,最大。,采用,大孔吸附树脂法,进行分离。,PH,梯度萃取法对蒽衍生物进行初步分离，对性质相似，酸性强弱相差不大的羟基蒽醌类则不能很好分离，故初分后再结合色谱法进一步分离。 多用硅胶为吸附剂，有时也用聚酰胺，不宜用氧化铝，尤其是碱性氧化铝，因为羟基蒽醌能与氧化铝形成牢固螯合物，难以洗脱。,2,、羟基蒽醌的酸性差别不大时，采用色谱方法，可得到彻底分离。,实例：建立了以苯酚为原料合成对苯二酚过程中各物质的高效液相色谱,(HPLC),及气相色谱,(GC),分析方法。,HPLC,方法采用,Kromasil,C18,色谱柱,(4.6 mm,250 mm,10m),流动相组成,:V(,甲醇,):V(,水,):V(,改性剂,)=20:80:0.15,流动相流速为,1.0,mL,/min,定量环进样,20L,Prostar,紫外检测器检测波长为,254 nm,实现了对低含量对苯二酚、对苯醌、邻苯二酚及苯酚,4,种物质的分离测定,;,同时,采用氢火焰离子化检测器对上述,4,种物质在较高浓度下进行了,GC,分析,测定快速准确。,实例：建立了同时测定化妆品中蒽醌类含量的,HPLC,法，以评价化妆品的美容功效。采用甲醇超声提取，,HPLC,法分离测定。结果为,3,种被测物在,11min,内均得到良好的分离。在,1g,mL-250g,mL,均与其各自对应的峰面积呈良好线性关系（,R0,9997,）。在添加质量浓度为,0,5g,mL,5,0g,mL,，回收率在,92,0,-102,5,，精密度,RSD2,1,，最低检出限（,S,N=3,）为芦荟苷,0,5160g,mL,，芦荟大黄素,0,0864g,mL,，大黄酚,0,1016g,mL,。该法简便、快速、准确，可用于化妆品中蒽醌类含量的检测。,实例：硅胶柱色谱法分离大黄酚、大黄素,-6-,甲醚,装柱：用石油醚乙酸乙酯（,9.8:0.2,）浸泡,200,300,目硅胶约,20 g,，搅拌均匀，尽量赶出气泡。一次性倒入,1.8 cm X 28 cm,的层析柱中，轻轻敲打使硅胶均匀下沉，至硅胶界面不再下降为止。,上样：将离大黄酚和大黄素,-6-,甲醚的混合物用乙醇加热溶解，伴入少量硅胶，水浴,60,左右烘干，加到已装好的硅胶柱顶端，最后在样品带上盖上一层硅胶或棉花，以保护样品界面不受干扰。,洗脱：先用,100 ml,石油醚乙酸乙酯（,9.8:0.2,）洗脱，至第一条黄色色带洗下来，再换用,100 ml,石油醚乙酸乙酯（,9.5:0.5,）洗脱下第二条色带。,（一）从大黄中提取分离羟基蒽醌类还可采用下列方法,用,80%,乙醇室温渗漉提取，回收溶剂，得浸膏后依次以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到的石油醚部分和三氯甲烷部分再分别上硅胶色谱柱以石油醚,-,乙酸乙酯（,955,）和（,9010,）洗脱，分离得到大黄素甲醚、大黄酚及大黄素、芦荟大黄素单体。工艺流程如下：,（二）从大黄中提取分离总蒽醌类可采用下列方法,工艺一：,工艺二：,3. PH,梯度萃取法对蒽衍生物进行初步分离，对性质相似，酸性强弱相差不大的羟基蒽醌类则不能很好分离，故初分后再结合层析法进一步分离。多用吸附柱层析，以硅胶、磷酸氢钙、聚酰胺粉为吸附剂，不宜用氧化铝，尤其是碱性氧化铝，因为羟基蒽醌能与氧化铝形成牢固螯合物，难以洗脱,。,蒽醌苷类的分离,由于蒽醌苷类水溶性较强，分离精制较困难，故现多需进行预处理。,溶剂法是用中等极性的有机溶剂如乙酸乙酯、正丁醇等，从除去游离蒽醌衍生物的水溶液中，将蒽醌苷萃取出来，再作进一步分离。,虎杖浸膏的水溶液,氯仿回流,氯仿液,（含大黄素等,游离蒽醌,脂溶成分）,水液,EtOAc,萃取,EtOAc,液,（含大黄素苷等,蒽醌苷,极性成分）,溶剂法：,铅盐法：,中药粉,90%,乙醇加热提取,提取液,浓缩,浓缩液,氯仿（或乙醚、苯）萃取,氯仿液,（游离蒽醌）,水层,加,醋酸铅溶,液，过滤,滤液,沉淀,水洗，悬浮于水中，通,H,2,S,脱铅过滤,沉淀（,Pb,2,S,）,滤液,蒽醌苷,补充实例 用不同浓度的乙醇回流提取茜草粗粉，得到浸膏采用不同极性溶剂萃取，再使用色谱法分离。茜草中主要化学成分提取分离方法：,结晶,：,1,3,6-,三羟基,-2-,甲基蒽醌,结晶,：,1,3,6-,三羟基,-2-,甲基蒽醌,-3-,O,-,D-,吡喃葡萄糖苷,结晶,：,1,3,6-,三羟基,-2-,甲基蒽醌,-3-,O,-,D-,吡喃木糖（,12,）,-,（,6-O-,乙,酰基）吡喃葡萄糖苷,结晶,：,1,2-,二羟基蒽醌,-2-,O,-D-,吡喃木,糖（,16,）,-D-,吡喃葡萄糖苷,结晶,：,1,3-,二羟基,-2-,羟甲基蒽醌,-3-,O,-,D-,吡喃木糖（,16,）,-D-,吡喃葡,萄糖苷,流程说明：,采用溶剂提取法进行提取，系统溶剂法进行粗分，得到不同极性部分。对各极性部分应用色谱法如硅胶色谱法、反相柱色谱法进行分离。,（一）从决明子中提取分离蒽醌类化合物还可采用下列方法,实例,工艺一：,工艺二：,流程说明：,决明子蒽醌可用干柱色谱予以分离。,决明子用氯仿和,20%H2SO4,提取后，合并氯仿提取液，浓缩，然后拌在少量磷酸氢钙上，把它加在预,先装好的磷酸氢钙（干装）上。用苯洗脱，先在柱上出现,5,个色带，继续用苯洗脱，分别收集各色带的,洗脱液分别进行处理。,实例,