DNA的粗提取与鉴定51672

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,一、实验原理,1,、,DNA,提取的原理：利用,DNA,在不同浓度的,NaCl,溶液中溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使,DNA,充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。利用,DNA,不溶而蛋白质溶于酒精溶液，可将,DNA,与蛋白质进一步分离。,2,、,DNA,的鉴定：在沸水浴的条件下，,DNA,遇二苯胺会被染成蓝色。,此外，蛋白酶能水解蛋白质而不影响,DNA,，洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对,DNA,没有影响，,80,以下温度不会使,DNA,变性，都是,DNA,提取与鉴定时可利用的。,DNA,的粗提取与鉴定,0 0.14mol/L NaCl,浓度,溶解度,1,二、实验材料：,DNA,含量相对较高的生物组织，如鸡血、猪肝、香蕉、菜花、洋葱等,三、实验过程,（一）破碎细胞，获取含,DNA,的滤液,动物细胞破碎较容易，如在鸡血细胞中加一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。,如植物材料则加洗涤剂和食盐进行研磨。,（二）去除滤液中的杂质,在滤液中加,NaCl,，使,NaCl,溶液物质的量浓度为,2mol/L,，滤除不溶杂质，再调,NaCl,溶液到,0.14mol/L,，析出,DNA,，再滤去溶液中的杂质，再用,2mol/LNaCl,溶液溶解,DNA,。,也可在滤液中加蛋白质酶分解蛋白质。,2,（三）,DNA,的析出与鉴定,析出：在含,DNA,的,NaCl,溶液中加冷却的酒精溶液，溶液中会出现白色丝状物，再用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物（,DNA,）。,鉴定：将,DNA,丝状物溶于盛有,5ml,的,2mol/LNaCl,溶液中，向试管中加,4ml,的二苯胺试剂，水浴加热。,结果：溶液变蓝。,3,