常见凝血项目检测及临床意义

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,常见凝血项目的检测及临床意义解读,凝血瀑布学说,激活,XII XIIa,XI XIa,IX IXa,PF3,VIIIa,Ca,+,内源性途径,VII - TF,VIIa - TF,外源性途径,共同途径,II IIa,X Xa,PF3,Va,Ca,+,VIII,V,Fibrinogen,Fibrin,Ca,+,Ca,+,D-Dimer,E,纤维蛋白凝块,纤维蛋白原,D,E,D,纤维蛋白单体,+,纤维蛋白肽,可溶性纤维蛋白,聚合体,XIIIa,凝血酶,纤溶酶,凝血和纤溶,纤维蛋白降解产物,纤维蛋白原 降解,产物,凝血,我们实验室,凝血检测包括,PT,、,APTT,、,TT,、纤维蛋白原含量、,D-Dimer,、,AT-,和,FDP,的测定。现主要用于手术前患者、产前孕妇凝血功能筛查，某些凝血因子异常疾病的检测以及口服抗凝药物的监测等。,凝血检测的方法学,目前可开展的血栓,/,止血成分检测主要包括三种方法：凝固法、底物显色法、免疫比浊法。,Stago,公司：,PT,、,APTT,、,FIB,、,TT,：凝固法。,D-,二聚体,/ FDP,：免疫比浊法。,AT-,：发色底物速率法。,摆动磁珠法,摆动磁珠法,检测原理,D-,二聚体,/ FDP,检测原理,：免疫比浊法。,用光度计检测含有乳胶颗粒的悬浊液吸光度的变化。含有共价包被特异抗体的乳胶颗粒悬浊液与待检样本进行混合。抗原抗体发生反应，导致乳胶颗粒发生凝集，诱导反应介质浊度增加。浊度的增加反映在吸光度的增加上，用来测试样本中,D-,二聚体,/ FDP,的水平。,AT-,检测原理,:,发色底物速率法。,AT,在肝素存在时是快速有力的凝血酶抑制物。待测血浆与肝素和过量凝血酶（试剂,1,）共同孵育；剩余凝血酶通过对合成产色底物（试剂,2,）的酶促反应来定量。由于凝血酶的数量在第一步中被血浆,AT,成比例地消耗，因此剩余的凝血酶在第二步反应中与血浆,AT,水平呈反比。此测定不受治疗剂量肝素影响。,PT,PT,是检查涉及外源性和共同凝血途径的过筛实验，如因子,VII,，,X,，,V,，,II,和,I。,PT,同时用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标。,PT,试剂含肝素拮抗剂。,PT,TT,APTT,XII,XI,IX,VIII,VII,X,V,II,I,PT,一、,PT,延长：,1,、先天性因子,、,、,、,缺乏症和低（无）纤 维蛋白原血症；,2,、获得性凝血因子缺乏：,DIC,、原发性纤溶亢进、 肝病阻塞性黄疸和维生素,K,缺乏症；,3,、血循环中有抗凝物质：口服抗凝剂如肝素和抗凝血因子抗体,、,、,、,抗体。,二、,PT,缩短：先天性因子,增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病。,三、口服抗凝剂的检测：据报道，在口服抗凝剂过程中，维持,PT,在正常对照的,1-2,倍最为适宜。,PT,TT,APTT,XII,XI,IX,VIII,VII,X,V,II,I,APTT,APTT,是在体外模拟内源性凝血的全部条件，测定血浆凝固需要的时间，用以反应内源性和共同凝血途径凝血因子（因子,XII,，,XI,，,IX,，,VIII,，,X,，,V,，,II,和,I,）是否异常。,PT,TT,APTT,XII,XI,IX,VIII,VII,X,V,II,I,APTT,一、,APTT,延长：,见于血友病、凝血因子,、,、,、,和纤维蛋白原缺乏；口服抗凝剂、血循环中有凝血因子抑制物、狼疮抗凝物等。,二、缩短：,见于,DIC,早期，血栓前状态及血栓性疾病。,三、监测肝素治疗：,肝素治疗期间，,APTT,维持在正常对照的,1.5-3.0,倍为宜。,肝素通过,AT-,发挥抗凝作用，,AT-,是抑制,XII,、,XI,、,IX,、,X,等,发挥作用，主要是和内源性凝血途径相关。,TT,TT,是一评估纤维蛋白形成过程的检测项目，,TT,同样也是一用于补充,PT,和,APTT,的筛选实验。,原理：在预定量凝血酶作用下，正常血浆会在有限的和稳定的时间内发生凝固。,TT,TT,延长表示,F,IB,异常,质量（异常纤维蛋白原血症）,数量：,先天性低或无纤维蛋白原血症；,获得性低纤维蛋白原血症（肝病，,DIC,）；,存在肝素、水蛭素；,存在,FDP,。,FIB,纤维蛋白原在肝脏和巨核细胞内合成，半衰期为,3-5d,，含量，成人：,2-4g/L,；新生儿：,1.25-3g/L,。,在过量凝血酶的作用下，稀释血浆的凝固时间与血浆中的纤维蛋白原水平有直接关系。,F,IB,临床应用,手术前的筛选试验,诊断,质量缺陷（异常纤维蛋白原血症）,数量缺陷（先天性或获得性）,FIB,水平升高,炎性综合征，糖尿病，肥胖，血栓性相关性疾病。,D-Dimer,交联纤维蛋白的特异性降解产物,(,FnDPs,),继发性纤溶特有代谢产物，反映凝血与纤溶激活的标志物。,生理性：抗血栓；,降解纤维蛋白,/,原；,降解凝血因子（,FV,、,FVIII,、,FX,、,FVII,、,FXI,、,FXIII,）；,病理性：纤溶亢进出血。,FDP,FgDPs,和,FnDPs,（,D-Dimer,）,统称纤维蛋白（原）降解产物（,FDPs,），具有抗血小板聚集和抗凝作用。,FgDPs,：,Fg,降解产物。,AT-,检测的临床应用,AT-,是一种由肝脏合成的分子量约为,58000,道尔顿的糖蛋白，是一种凝血酶的抑制剂。,一、诊断遗传或获得性,AT-,缺乏症；,二、疑难,DIC,诊断标准；,三、监测肝素是否有效：,肝素抗凝作用依赖,AT,；,四、肝病（,AT,合成不足）,：,与肝功能受损程度或病情严重程度相关。,影响凝血指标的相关因素,1.,放置时间对检测结果的影响与性别和年龄无统计学意义。,2.,样本量过少,2ml,样本存放时间过长，,采血部位为输液同侧，,标本含有凝块。,样本量,结论：血量减少使凝固时间延长，血量增加使凝固时间缩短。,放置时间长短（,4,）,结论：,PT,在,0-8h,呈现下降趋势，可能与因子,活化有关，,PT,在,24h,略有升高；,APTT,（,4h,）,随时间有逐渐上升的趋势，各时间点的均值均高于基线水平，,可能与,因子活性逐渐降低有关,；,TT,随时间呈逐渐上升的趋势。,FIB,值随时间的增加呈现逐渐下降的趋势，但差异并无统计学意义，,PT,、,APTT,与,TT,在多次测量的时间点上差异均由统计学意义。,输液同侧采血,凝块,凝固反应曲线,整个反应过程包括基线期、加速器、减速期和平台期（终点）。基线期代表凝血因子被激活，生成凝血酶的过程，也就是凝血的启动阶段，时间相对较长；加速和减速期代表凝血酶发挥作用，纤维蛋白凝块形成的过程；平台期凝固反应完成。,研究表明：在正常情况下，,20%-50%,的凝原物质就能满足凝血要求。所以体外实验时，一部分凝血因子消耗在一定范围对凝血影响相对较小。,血液有凝块，反应基线期几乎是没有的，反应开始前，凝血因子大部分已经处于活化状态，缩短的基线期时间可能远远大于因为凝血因子减少而延长的时间。,样本采集,另外，样本采集时，长时间扎止血带，静脉穿刺不能一次成功，会造成血管损伤，或组织因子进入血液，使凝血酶形成，加速血液凝固，影响检测结果。,血液有凝块，条件允许就会启动继发性纤溶系统，,D-Dimer,就会形成，必然会有,D-Dimer,升高。,谢谢大家！,欢迎指教！,