呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶位

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶位,张国成,主任医师、教授,、,院长,博士生导师，享受国家政府特殊津贴,的专家,第四军医大学西京医院儿科原主任,中国武警后勤学院医学院武警儿童医院院长,天津市东方妇女儿童医院副院长,中华医学会儿科学分会感染学组原副组长,国家自然科学基金会评审专家,国家教育部学位论文评审专家,全军儿科学专业委员会顾问,原主任委员,陕西省儿科学会原副主任委员,陕西省预防医学儿童保健学会副主委,临床儿科杂志副主编，中国当代儿科学杂志副主编发育医学电子杂志副主编,负责国家自然科学基金课题,3,项，国家,863,合作课题,1,项，国家十一五科技支撑计划课题,1,项，军队、省攻关课题,5,项，国家临床药物验证项目,6,项。,发表论文,352,篇，其中,SCI,论文,12,篇，主编国家教育部十五规范教材儿科学和军事儿科学，参编国家研究生教材儿科学,、,儿科感染性疾病诊疗规范,和实用儿科手册等著作,10,部,获省、军队科技进步二等奖项，三等奖,5,项，国家发明专利,5,项。,RSV,研究的五大进展,2,呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶,位,RSV,研究的未来靶位,3,RSV,研究的重要性,1,RSV,研究的重要性,RSV,是儿童呼吸道感染的主要病原体,RSV,感染与未成熟儿,RSV,感染导致喘息及支气管哮喘,2024/9/10,RSV-,儿童呼吸道感染的主要病原,单股负链,RNA,病毒,颗粒大小约为,150nm,，较副流感病毒小,对乙醚敏感，无血球凝集性,一个,血清型,，二个亚型,(A,、,B),胞浆内增殖,，,形成合胞（,syncytium,）,及包涵体,2024/9/10,RSV,基因组为长约,编码,11,种蛋白，包括,3,种跨膜包膜糖蛋白,(F,G,和小疏水蛋白,SH),1,种基质蛋白,(M),4,种核衣壳蛋白,(N,P,L,和,M2-1),2,种非结构蛋白,(NS1,和,NS2),为,I,型干扰素拮抗剂,1,种,RNA,调节因子,(M2-2),G,和,F,为主要中和抗原，能刺激机体产生血清中和抗体和呼吸道粘膜的分泌型,sIgA,N,，,F,，,P,，,NS2,和,M,等蛋白可诱导机体产生,CD8+,细胞毒性,T,细胞,(CTLs),RSV-,儿童呼吸道感染的主要病原,2024/9/10,RSV,主要导致,肺炎及毛细支气管炎,北京，,48%,的病毒性肺炎和,58%,的毛细支气管炎系由合胞病毒引起（,1980,1984,）,广州，小儿肺炎及毛细支气管炎的,31.4%,由合胞病毒引起（,1973,1986,）,美国，,20%,25%,的婴幼儿肺炎和,50%,75%,的毛细支气管炎由合胞病毒引起,每年全世界至少有,300,万婴幼儿因为,RSV,病毒感染而入院，其中至少有,16,万人死亡。,2024/9/10,RSV,是我国儿童呼吸道感染的主要病原体,门诊,住院,病例数,1050,1016,样本,咽拭子,咽拭子或鼻咽吸取物,检测方法,RT-PCR,检测,刘春艳，申昆玲等,.2010,至,2012,年门诊和住院儿童急性呼吸道感染病毒病原比较分析,J.,中华儿科杂志, 2013, 51(4):255-259,.,RSV,是我国儿童呼吸道感染的主要病原体,约有,25%,到,40%,受感染的婴儿和儿童，会发生毛细支气管炎或肺炎,5%,到,20%,需要住院治疗。,特别是那些需要到,PICU,治疗者，通常年龄小于,6,个月,慢性心脏病或肺部疾病或免疫系统低下者能,RSV,再感染，有发生严重呼吸道病的高风险。,人们对,RSV,不能形式持久免疫力，在一生中可反复感染,2024/9/10,RSV,感染与未成熟儿,35,周胎龄的早产儿,RSV,感染的住院率,11-28%,35,周胎龄出生儿比,32,周胎龄早产儿,RSV,感染更常发生呼吸暂停,系统性并发症,需要插管,机械通气,氧气补充,住,ICU,及更长的住,ICU,时间,RSV,感染后,2,年内有更高的发病率、死亡率和或原因不明的猝死,B. Paes & I. Mitchell & A. Li & K. L. Lanctt,Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2012) 31:27032711,2024/9/10,早产儿RSV呼,吸道感染,RSV,与,院内,感染,RSV,感染,继发,感染,(30%,50%),院,内感染,2024/9/10,母传抗体,不能完全地预防感染,母传抗体脐带血,RSV-IgG,阳性率,93%,，出生至,1,个月为,89%,，,1,6,个月为,40%,2,岁及,3,岁,体内,RSV-IgG,抗体,阳性率达,70%,以上,4,岁直至,14,岁,RSV-IgG,阳性率为,80%,左右阳性,母传抗体,不能完全地预防感染的发生，合胞病毒肺炎在出生后任何时候都可能发生。多见于,3,岁以下，,1,6,个月可见较重病例，男多于女。,抗体不能完全,防止感染,，合胞病毒的再感染极为常见，再感染发生率高达,65%,2024/9/10,RSV,感染导致喘息及支气管哮喘,RSV infection during the first 6 months (and especially the first 3 months) of life may lead to wheezing and asthma later in life.,The exact reason why is not known, but there may be a genetic predisposition for it.,2024/9/10,Jackson DJ. et al; Am J Respir Crit Care Med. 2008 Oct 1; 178(7):667-72,*,*,*,*,P0.05 vs.,无,+P0.05 vs.,仅,RSV,3,岁前,喘息,6,岁时的哮喘发生率,%,鼻病毒,(RV),或,/,合胞病毒感染,6,岁时发生哮喘的危险增大,RSV,感染诱发喘息的机制,病变以,嗜中性粒细胞和淋巴细胞浸润,为主,病变部位主要在,平滑肌发育差,的,细支气管,，,气,道平滑肌收缩不是引起喘息的主要原因,病毒感染 - 小气道,、,细支气管炎性细胞浸润、上皮细胞坏死脱落、,粘液腺增生致粘液分泌增多、管壁水肿,炎性狭窄,Th,2,反应占优势,或Th,2,细胞因子分泌增强-暂时性气道高反应 (AHR).,Quizon A,Colin AA,Pelosi U,Rossi GA. Curr Pharm Des, 2012,18(21):3061-3085.,RSV,研究的五大进展,RSV,感染后机体干扰素产生异常,RSV,感染的疫苗进入临床验证,Palivizumab,免疫预防,RSV,感染,SP,应用于早产儿,RSV,感染的治疗,重组人干扰素,1b,治疗,RSV,感染有重要作用,2024/9/10,儿童病毒感染后的,干扰素,产生异常,RSV,感染后很少或没有干扰素的产生,Respiratory syncytial virus nonstructural proteins decrease levels of multiple members of the cellular interferon pathways,Swedan S, Musiyenko A, Barik S.,PIV,感染可抑制内源干扰素的产生,Attenuating mutations in the P/C gene of human parainfluenza virus type 1 (HPIV1) vaccine candidates abrogate the inhibition of both induction and signaling of type I interferon (IFN) by wild-type HPIV1,Van Cleve W, Amaro-Carambot E, Surman SR, et al.,J Virol. 2009.,Virology. 2006.,stimulating,nuclear,NS protein,RSV,IFN,stimulating,nuclear,P/C gene,PIV,Inhibiting,Inhibiting,IFN,Palivizumab,免疫预防,RSV,感染,RSV F,蛋白单克隆抗体,帕利珠单克隆抗体,(palivizumab),：具有减少,RSV,感染导致的住院率和明显减少重症发生率的作用,推荐可以将其应用于有发生重症风险的高危儿的预防，如早产儿、合并有慢性肺部疾病或者先天性心脏病患儿,RSV,感染高发季节开始，每公斤体重,15 mg,肌注，,x5,个月，能降低,RSV,感染住院率,39%,78%,2024/9/10,SP,成为治疗,RSV,感染肺炎的有效手段,肺表面活性蛋白（,SP,）包括,SP-A,、,SP-B,、,SP-C,、,SP-D4,种蛋白,存在多个等位基因和基因多态性位点,研究发现,SP-A,、,SP-B,和,SP-D,蛋白及其基因多态性与严重的,RSV,感染相关,SP-D,应用于早产儿,RSV,感染的治疗,RJ Derscheid,，,MR AckermannVeterinary Pathology,2013,50(5):827-841,CME Saleeby,，,R Li,，,GW Somes,，,MK Dahmer,，,MW Quasney Journal of Pediatrics, 2010, 156(3):409-414,2024/9/10,重组人干扰素,1b,治疗,RSV,感染有重要作用,雾化吸入运德素治疗,RSV,感染，,药效显著,且优于利巴韦林与中药注射剂,正常对照组,感染模型组,运德素,(50,g),*,利巴韦林,喜炎平,炎琥宁,利巴韦林与中药注射剂,雾化吸入运德素,治疗,5,天后，肺组织,RSV,病毒载量及电镜下肺组织切片观察,与腹腔注射利巴韦林、中药注射剂相比：,雾化运德素，肺组织,RSV,病毒载量下降最为明显；,雾化运德素，肺组织炎性损伤恢复最为显著。,正常对照组,感染模型组,运德素,(3.125,g),运德素,(12.5,g),运德素,(50,g),随着药物剂量增加，肺组织病理性炎性损伤表现逐渐减轻；,50 g,剂量组,(,人用剂量,4,g/kg),小鼠肺组织炎性损伤程度趋向正常，治疗效果最佳。,气管腔内大量分泌物及炎性细胞渗出；,肺泡壁明显增厚，可见大量炎性细胞浸润；,毛细血管明显扩张充血。,RSV,感染病理改变,用药后改善,22,重组人干扰素,1b,治疗,RSV,感染有重要作用,雾化吸入运德素治疗,RSV,感染，,药效显著,且优于利巴韦林与中药注射剂,正常对照组,RSV,感染阳性组,运德素,(12.33,g),腹腔,运德素,(12.5,g),雾化,运德素,(25,g),雾化,利巴韦林腹腔,喜炎平腹腔,炎琥宁腹腔,23,实验结果（二）,.,电镜下病理学结果,图示：干扰素,25,g,组效果,最显著；,优于利巴韦林、,炎琥宁、喜炎平。,组别,RSV,载量,阴性对照组,RSV,感染阳性组,95178.2513097.17,运德素腹腔注射,30704.78,12458.06,运德素雾化（,12.5g,）,6739.85,2590.18,运德素雾化（,25g,）,491.21,55.27,利巴韦林腹腔注射,15173.07,2731.50,喜炎平腹腔注射,5768.37,1973.51,炎琥宁腹腔注射,5889.68,1488.29,F,62.8,P,0.05,运德素,25,g,组,(,人用剂量,2,g/kg),病毒载量最低；,抑制病毒效果,优于利巴韦林、炎琥宁和喜炎平,24,实验结果（三）,.,肺组织,RSV,病毒载量,组别,CD3,+,CD4,+,(%),CD3,+,CD8,+,(%),CD3,+,CD4,+,/ CD3,+,CD8,+,正常对照组,71.700,1.050,25.375,1.230,2.833,0.178,感染模型组,79.225,1.103,17.000,1.327,4.734,0.238,运德素（,3.125g,）,77.763,1.350,18.763,0.872,4.154,0.245,运德素（,12.5g,）,76.000,1.586,19.338,0.877,3.940,0.253,运德素（,50g,）,72.825,1.368,23.313,1.126,3.133,0.219,F,值,47.895,71.013,91.915,P,值,0.01,0.01,0.01,随着运德素剂量增加，免疫调节效果更加显著；,50,g,组（相当于,人用,4,g/kg,）恢复至正常状态,运德素，有效恢复,T,淋巴细胞亚群的比例失调,25,肺、肝、肾放射,计数检测,(,单位：,CPM/g),雾,化,吸,入,肌,肉,注,射,0.5h 2h 4h 8h 12h,0.5h 2h 4h 8h 12h,干扰素雾化吸入与肌肉注射，药动学特征不同,（,运徳素雾化吸入的药代动力学研究）,雾化吸入后，运德素在肺部的浓度高，且滞留时间长，,更利于发挥局部的治疗作用。,肌肉注射后，运德素主要通过肾脏代谢，在肺部浓度很低，进入肺组织慢，且滞留时间短。,26,肌肉注射,雾化吸入,研究表明，雾化吸入的运德素也会进入血液，但比肌肉注射缓慢，血药浓度平缓上升，使儿童易于耐受，不良反应更轻。,0,2000,4000,6000,8000,10000,12000,0.5h,1h,2h,3h,4h,8h,12h,CPM/,g,医药导报，,2013,从血药浓度上看：,雾化,运德素,入血更缓慢，应用更安全,27,0.6g,1.0g,1.5g,2.0g,3.0g,4.0g,1,组,2,组,3,组,4,组,5,组,6,组,7,组,8,组,剂,量,爬,坡,0.3g,国家注册临床,I,期安全试验证明：,雾化（,4g/kg,）、肌注（,2g/kg,），安全性、耐受性良好,单剂量组：,多剂量组：,每日,2,次，间隔,6h,以上，连续雾化给药,7,日；,观察指标,结,果,1.,生命体征,呼吸、血压、脉搏均,正常,，,且给药前后波动很小，,极个别轻度发烧,2.,胸片,、,心电图,均基本,正常,3.,血、尿常规,尿常规检查结果,正常,。,一小部分受试患儿血小板高于正常值，判断为原感染疾病引起，与运德素药物治疗无关,4.,血清生化,未见,有临床意义的改变,5.,局部刺激,呼吸道,粘膜检查用药前后亦无变化,前瞻性、多中心、大样本的,干扰素,1b,（,运德素,）治疗,RSV,研究,序号,研究单位,主要研究者,1,中国医科大学附属盛京医院（,PI,）,尚云晓,2,首都儿科研究所附属儿童医院,曹玲,3,上海市儿童医院,陆敏,4,南京医科大学附属南京儿童医院,赵德育,5,重庆医科大学附属儿童医院,黄英,6,昆明医科大学附属儿童医院,吴澄清,7,武汉市儿童医院,王莹,8,江西省儿童医院,李岚,9,兰州大学第一医院,李宇宁,10,绵阳市中心医院,余静,11,四川大学华西第二医院,刘瀚旻,雾化吸入重组人干扰素,1b,治疗小儿急性毛细支气管炎多中心研究,中国实用儿科杂志,. 2014,临床试验给药方案,病例入选：,2,岁（最小患儿,45d,），发病,96h,内的毛支患儿；无其他合并症,对照组 ：,100,例，基础用药：,雾化吸入,5%,沙丁胺醇和布地奈德,。,低剂量组,：,100,例，基础用药,+,运德素,2.0g /kg,次,雾化吸入,，每日,2,次，疗程,5-7,天，观察,7,天,。,高剂量组 ：,100,例，基础用药,+,运德素,4.0g /kg,次,雾化吸入，每日,2,次，疗程,5-7,天，观察,7,天,。,30,提高全部疗效指标,（,喘息,、喘鸣,音,、三凹症,、咳嗽、水泡,音,）的,总改善,率,对,主要疗效指标,（,喘息、,喘鸣音、,三凹症,）的改善更明显；,4,g/kg,组疗效优于,2g/kg,组,与常规治疗比较，,提高临床症状的,总改善率,*组间比较,尚云晓等中国实用儿科杂志，,2014.,*,*,*,*,*,用药组和对照组,主要症状改善,每日评分均值,喘息,喘鸣音,三凹征,雾化运德素第,2,天，症状评分呈现明显的下降；,治疗,至,第,34,天时，用药组疗效指标改善最为明显,；,治疗结束时，用药组的改善仍显著优于对照组,。,与常规治疗比较，联合雾化运德素治疗毛支，第,2,天即可观察到显著的症状改善；第,3-4,天疗效更为明显,32,与常规治疗比较，联合雾化运德素，,毛支病程显著缩短,1.0-1.6,天,0.9-1.7,天,1.4-2.1,天,早期用药和晚期用药均呈现出良好的,改善率；,早期,用药,优于,晚期用药，,并且高,、低剂量组之间也有显著性差异,P,。,所有疗效指标总改善率,* 组间比较,p,0.05,-9%,-12.3%,-7.8%,-5.9%,发病,72h,前后雾化运德素治疗均有效，,尽早雾化运德素治疗，疗效更突出；,早期用药和晚期用药的疗效比较,34,主要疗效指标总改善率,* 组间比较,p,0.05,RSV,阳性和,RSV,阴性的疗效比较,RSV,阳性或,RSV,阴性，雾化运德素治疗组较对照组均有显著差异,RSV,阳性毛支患儿疗效更显著,35,受染严重细胞：,(,清除）,整体水平上，免疫清除病毒,正常细胞（防御）,激发抗病毒状态,已感染细胞（抑制）,抑制病毒复制,干扰素,1b,的,抗病毒作用,36,干扰素,1b,抗,RSV,的作用机制,干扰素受体,干扰素,2-5A,合成酶,磷酸二酯酶,蛋白激酶,CTL,细胞,免疫应答,NK,细胞,巨噬细胞,病毒,mRNA,降解,病毒蛋白,翻译抑制,病毒蛋白,合成起始抑制,促进增殖,激活杀伤,增强吞噬,清除病毒,组织,细胞,抗病毒蛋白,免疫,细胞,抑制病毒复制,增强免疫清除,37,孙新 教授,第四军医大学附属西京医院儿科主任,全军儿科学专业委员会委员,陈强 教授,江西省儿童医院副院长,中华医学会儿科学会常委,徐樨巍 教授,首都医科大学儿科学院消化科主任,中华医学会儿科分会消化学组委员,李兴旺 教授,北京地坛医院感染性疾病诊疗中心主任,中华医学会北京分会感染病学会主委,尚云晓 教授,中国医科大学附属盛京医院儿科主任,中华医学会儿科分会呼吸组副组长,赵德育 教授,南京医科大学附属南京儿童医院呼吸主任,中华医学会儿科学分会呼吸学组委员,刘长山 教授,天津医科大学第二医院儿科主任,中华医学会儿科分会呼吸组委员,符州 教授重庆医科大学附属儿童医 副院长,中华医学会儿科分会委员会委员,申昆玲 教授,首都医科大学儿科学院 院长,中华医学会儿科分会主任委员,鲍一笑 教授,上海交通大学医学院附属新华医院儿科主任,中华医学会儿科分会委员,张国成 教授,天津武警儿童医院 院长,全军儿科学会主任委员,中华医学会儿科学分会感染学组副组长,撰稿专家,重组人干扰素,1b,在儿科的,临床应用专家共识,疾病,给药方法,用药方案,推荐剂型,疗程,推荐等级,毛细支气管炎,雾化,24 g/,（,kg,次）,，,2,次,/d,推荐,IFN-,1b,注射液,57d,A,级,肌注,1 g/,（,kg,次），,1,次,/d,35d,B,级,病毒性肺炎,雾化,轻型,：,1,2 g/,（,kg,次）,2,次,/d,重型,：,2,4 g/,（,kg,次）,2,次,/d,推荐,IFN-,1b,注射液,57d,A,级,肌注,轻型,：,1 g/,（,kg,次,）,，,1,次,/d,重型,：,2 g/,（,kg,次），,1,次,/d,57d,A,级,手足口病,雾化,轻型,：,1,2 g/,（,kg,次）,2,次,/d,重型,：,2,4 g/,（,kg,次）,2,次,/d,推荐,IFN-,1b,注射液,37d,A,级,肌注,轻型,：,1 g/,（,kg,次,）,，,1,次,/d,重型,：,2 g/,（,kg,次），,1,次,/d,3,5 d,A,级,轮状病毒性肠炎,肌注,1 g/,（,kg,次），,1,次,/d,35d,A,级,“共识”首次规范化干扰素,1b,（运德素）合理用药,疾病,给药,方法,用药方案,推荐剂型,疗程,推荐等级,病毒性脑炎,肌注,1 g/,（,kg,次），,1,次,/d,35d,B,级,传染性单核细胞增多症,肌注,12 g/,（,kg,次），,1,次,/d,57d,B,级,雾化,24 g/,（,kg,次），,2,次,/d,推荐,IFN-,1b,注射液,57d,C,级,水痘,肌注,12 g/,（,kg,次），,1,次,/d,35d,B,级,麻疹,肌注,12 g/,（,kg,次），,1,次,/d,35d,C,级,流行性腮腺炎,肌注,1 g/,（,kg,次），,1,次,/d,35d,C,级,慢性乙肝,肌注,12 g/,（,kg,次），,3,次,/,周,24-48,周,C,级,慢性丙肝,肌注,12 g/,（,kg,次），,3,次,/,周，,24-48,周,C,级,“共识”首次规范化干扰素,1b,（运德素）合理用药,RSV,感染的疫苗进入临床验证,国内现在主要集中研究,RSV,基因工程疫苗，包括亚单位疫苗、病毒载体疫苗、减毒沙门氏菌载体疫苗等方面，但没有进入临床研究阶段的疫苗。,国外多家公司对,RSV,疫苗进行了研究，主要研究疫苗类型包括：减毒活疫苗、全病毒灭活疫苗、病毒样颗粒、亚单位疫苗、核酸疫苗、基因载体疫苗、组合疫苗等,2024/9/10,国外减毒活疫苗和病毒样颗粒进入临床二期,婴幼儿主动免疫用减毒活疫苗包括两类：副粘病毒载体疫苗,(,嵌合,B/HPIV3:MEDI534,带,RSVF,的仙台病毒载体,),减毒活,RSV,疫苗,(MEDI559,，,RSVMEDI,M2-2),。,RSV,融合糖蛋白,(F),是主要的亚单位疫苗来源，融合后,RSVF,具有某些中和抗原决定簇,。,F,诺瓦瓦克斯,Novavax,研制的,RSVF,纳米颗粒疫苗已经进入临床实验评估阶段，,2013,年做出临床,2,期报告,，,证,明,疫苗用于产妇的安全性和免疫原性。,并,免疫接种的妇女将自然将抗体转移给胎儿，可以早期被动保护婴儿免受,RSV,感染。,葛兰素史克,GlaxoSmithKline,的,RSV,疫苗进入一期临床，该疫苗为真核,CHO,细胞表达的可溶性,RSVF,多肽,2024/9/10,RSV,研究的未来靶位,RSV 感染,的快速诊断,和,RSV,感染的流行病学监测,我国儿童,RSV 感染,的易感基因及多态性,RSV,感染触发哮喘进程的相关通路,RSV,感染的预防疫苗,Palivizumab,免疫预防,RSV,感染,不同种类,SP,应用于,RSV,感染的治疗的效应和后效应,重组人干扰素,1b,治疗,RSV,感染及干预哮喘进程的作用,2024/9/10,感谢聆听,Thank you,！,人有了知识，就会具备各种分析能力，,明辨是非的能力。,所以我们要勤恳读书，广泛阅读，,古人说“书中自有黄金屋。,”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识，,培养逻辑思维能力；,通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平，,培养文学情趣；,通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。,有许多书籍还能培养我们的道德情操，,给我们巨大的精神力量，,鼓舞我们前进,。,