肠杆菌科概述埃希菌属课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,Department of Microbiology, Harbin Medical University,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,肠杆菌科,Enterobacteriaceae,肠杆菌科Enterobacteriaceae,1,教学大纲,肠道杆菌的共同特征及分类,引起肠道感染的大肠埃希菌种类和致病特点,大肠埃希菌的微生物学检查法,大肠埃希菌的卫生细菌学检查及其意义,教学大纲肠道杆菌的共同特征及分类,2,Enterobacteriaceae,A heterogeneous group of G,-,rods,Their natural habitat is the intestinal tract of humans and animals,(enteric bacilli),Facultative anaerobes or aerobes,Most are normal flora,Regular pathogen for humans:,Salmonella,Shigella, some,E. coli,More than 30 genera, 120 species,EnterobacteriaceaeA heterogene,3,New findings in gastrointestinal bacteria,2006, Nature, Jeffrey Gordon, director of the Center for Genome Sciences at Washington University School of Medicine in St. Louis, Missouri, and his graduate student Buck Samuel,Methanobrevibacter smithii,(,M. smithii,),Discovery Channel “Gut Bacteria Determine Fat or Thin”,“,Im not fat, Im just got fat bacteria”,New findings in gastrointestin,4,返回,返回,5,肠杆菌科细菌的生物学特征,形态与结构,中等大小,G,-,杆菌,无芽胞,周鞭毛,菌毛,培养,兼性厌氧或需氧,营养要求不高,菌落,混浊生长,肠杆菌科细菌的生物学特征形态与结构,6,肠杆菌科细菌的生物学特征,生化反应：活泼,生化鉴定,(biochemical differentiation):,发酵葡萄糖,;,触酶阳性,;,氧化酶阴性,;,硝酸盐还原阳性,乳糖发酵,致病菌：多不发酵乳糖,非致病菌：多发酵乳糖,肠杆菌科细菌的生物学特征生化反应：活泼,7,O-F,试验,氧化型,发酵型,产碱型,O-F试验氧化型发酵型产碱型,8,氧化酶试验,阳性,：,紫红色,阴性：无色,氧化酶试验阳性：紫红色 阴性：无色,9,硝酸盐还原试验,阳性：红色 阴性：淡黄色,硝酸盐还原试验阳性：红色 阴性：淡黄色,10,复杂的抗原构造,O,（菌体）抗原,Lipopolysacchride,H,（鞭毛） 抗原,Flagella,K,抗原,荚膜,Vi,抗原,In,Salmonella,Typhi, the capsular antigen is called,Vi antigen,复杂的抗原构造O（菌体）抗原,11,抵抗力：,不强,易变异：多种,引起,通过,接合,转导,融原性转换,耐药性变异,毒力性变异,生化反应性变异,抵抗力：不强易变异：多种引起通过接合耐药性变异毒力性变异,12,致病物质,所致疾病,临床意义,返回,致病物质临床意义返回,13,菌毛或菌毛样结构,荚膜或微荚膜,外膜蛋白,内毒素,外毒素,致病物质,菌毛或菌毛样结构致病物质,14,所致疾病,肠道感染,腹泻、食物中毒、肠热症,肠道外感染,鼠疫（烈性传染病）、泌尿道感染、,肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症,返回,所致疾病 返回,15,鉴定原则,1.,科间鉴别,（表,9-3,）,2.,将肠杆菌科分为三大类,（表,9-4,）,3.,属、种、群、型的区分,4.,肠杆菌科细菌综合鉴定流程,返回,鉴定原则 1. 科间鉴别 （表9-3）返回,16,科间鉴定：根据,O/F,试验、氧化酶试验、菌体形态和有无鞭毛,科内鉴定：生化鉴定分为,3,个组,PAD:,苯丙氨酸脱氨酶；,VP/,葡萄糖酸盐利用试验,PAD,阴性、,VP,阴性,PAD,阴性、,VP,阳性,PAD,阳性、,VP,阴性,属间鉴定,科间鉴定：根据O/F试验、氧化酶试验、菌体形态和有无鞭毛,17,肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别,肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别,18,苯丙氨酸脱氨酶试验阳性：绿色 阴性：黄色,苯丙氨酸脱氨酶试验阳性：绿色 阴性：黄色,19,葡萄糖酸盐试验阳性：黄绿色 阴性：蓝色,返回,葡萄糖酸盐试验阳性：黄绿色 阴性：蓝色 返回,20,第,14,章,埃希菌属,Escherichia,第14章埃希菌属 Escherichia,21,案 例,女，,31,岁，尿频、尿痛,3,天。,3,天前开始出现,尿频、尿痛,，自觉尿有异味；,体检：全身皮肤粘膜正常，,耻骨联合上有触痛；,尿常规检查：,白细胞,10-15,个,/,视野,，并有多量细菌,问题：,1.,尿标本革兰染色最可能发现什么性质的细菌？,2.,这类感染的最常见病原体是什么？,3.,病原体侵犯尿道的机制是什么？,案 例女，31岁，尿频、尿痛3天。,22,埃希氏菌属 （,Escherichia,）,是人类和动物肠道中的正常菌群,以大肠埃希氏菌（,E.coli,）最为重要,出生后数小时就进入肠道，并终生伴随,重要的实验材料和研究对象 ：,在分子生物学和基因工程实验中,大肠杆菌也是重要的实验材料和研究对象,埃希氏菌属 （Escherichia）是人,23,形态染色,0.4-0.7m,1-3,m,短杆菌,革兰染色阴性,有鞭毛,有菌毛,形态染色0.4-0.7m 1-3m,24,大肠埃希菌革兰染色,大肠埃希菌革兰染色,25,培养特性与生化反应,兼性厌氧,营养要求不高,生化反应活泼，发酵多种糖类,绝大多数发酵乳糖,典型,E.coli:,IMViC,：,+ + - -,培养特性与生化反应兼性厌氧,26,大肠埃希菌菌落特征（血平板）,大肠埃希菌菌落特征（血平板）,27,大肠埃希菌菌落特征（,MAC,）,大肠埃希菌菌落特征（MAC）,28,大肠埃希菌,A,B,C,肠道杆菌:,A.大肠埃希菌纯培养镜下特征（革兰染色）,B.大肠埃希菌在血琼脂平板上的菌落特征（18-24h),C.大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上的菌落特征（18-14h),医学微生物学,大肠埃希菌ABC肠道杆菌:A.大肠埃希菌纯培养镜下特征（革兰,29,大肠埃希杆菌呈典型粉红色，乳糖发酵菌落。福氏,痢疾杆菌 菌落小，无色透明，非乳糖发酵菌。,（18hr,37),在麦康凯培养基上的大肠埃希杆菌,和福氏痢疾杆菌,大肠埃希杆菌呈典型粉红色，乳糖发酵菌落。福氏在麦康凯培养基上,30,大肠埃希菌,KIA,（,AA,）,MIU,（）,大肠埃希菌KIA（AA）MIU（）,31,大肠埃希菌,IMViC,试验（）,右侧为对照（,）,大肠埃希菌IMViC试验（）右侧为对照（）,32,抗原结构,O（菌体）抗原：170种以上,H（鞭毛）抗原：56种以上,K（荚膜）抗原：100种以上,O111：K58：H2,抗原结构O（菌体）抗原：170种以上,33,致病性,致病物质,1、侵袭力 K抗原和菌毛与侵袭力有关。 K抗原能抗吞,噬，菌毛（又称定植因子）有粘附作用。,2、内毒素,3、肠毒素 由ETEC产生的外毒素，可分为耐热肠毒素,(ST)和不耐热肠毒素(LT)两种。均由质粒介,导。LT与霍乱肠毒素作用机理相似，可使肠,道细胞中cAMP的水平升高， ST可使细胞内,cGMP量增多，因而引起肠液大量分泌而导,致腹泄。,致病性,34,另外还有Vero毒素，又称志贺样毒素，由溶原性噬菌体介导，为EHEC产生。作用使核糖体灭活，终止蛋白质合成。,肠集聚耐热毒素为EaggEC产生，可导致大量液体分泌。,所致疾病：,1、,肠道外感染,条件致病菌感染 ，大肠杆菌移位,至肠外组织或器官引起肠道外感染，以泌尿系统感,染为主，如尿道炎、膀胱炎、败血症等。尿路感染,每ml尿菌量,10万，可诊断,。,2、,肠道感染,表现为急性腹泻，为致病性大肠杆菌感染所,致，主要有五种类型：,另外还有Vero毒素，又称志贺样毒素，由溶原,35,肠产毒性大肠杆菌,(ETEC),：,定植因子,+ LT+ST,，引起婴幼儿和旅游者腹泻。,肠致病性大肠杆菌,(EPEC),：,粘附素,+,内毒素， 是婴儿腹泻的主要病原菌。,肠侵袭性大肠杆菌,(EIEC),：,侵袭力,+,内毒素，多侵犯较大儿童和成人，疾病类,似菌痢。,肠出血性大肠杆菌,(EHEC),：,Vero,毒素,+,菌毛，,5,岁以下儿童易感，引起血性腹,泻。,肠集聚性大肠杆菌,(EaggEC),：,粘附素,+,毒素，引起婴儿持续性腹泻。,肠产毒性大肠杆菌(ETEC)：,36,肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）,致病物质,肠毒素（,LT,和,ST,）,菌毛粘附素（,adhesin),内毒素,K,抗原,所致疾病,5,岁以下婴幼儿腹泻,旅游者腹泻,肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）致病物质,37,肠致病型大肠埃希菌（,EPEC,）,致病性,破坏刷状缘,不产生肠毒素及其他外毒素,无侵袭力,所致疾病,婴幼儿腹泻，热带国家、医院常流行,水性腹泻,Gut lumen,肠致病型大肠埃希菌（EPEC ）致病性Gut l,38,肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）,致病物质,不产肠毒素，,侵袭,结肠粘膜上皮细胞,Shigelloid,E.coli,:,EIEC,无动力、生化反应和抗原结构似,Shigella,所致疾病,主要侵犯较大儿童和成人,腹泻呈脓血便，有里急后重,肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）致病物质,39,肠出血型大肠埃希菌,（,EHEC,）,vero,毒素型大肠埃希菌,致病物质,菌毛：粘附作用,毒素：,vero,毒素,所致疾病,出血性结肠炎,溶血性尿毒综合征,（,HUS,）,5,岁以下儿童易感，病情,轻重不一,1982,年美国发现，后世界各地均有流行,血清型为,O157:H7,肠出血型大肠埃希菌（EHEC）vero毒素型大肠埃希菌 所致,40,The “life cycle” of E. coli O157:H7,5-10% prevalence in animals,40% prevalence in farms,The “life cycle” of E. coli O1,41,E. coli O157:H7,1982-first recognized as a pathogen,1985-associated with hemolytic uremic syndrome,1990-outbreak from drinking water,1991-outbreak from apple cider,1993-multi-state outbreak from fast food hamburgers,1995-outbreak from fresh produce,1996-outbreak in Japan,-multi-state outbreak from unpasteurized,apple juice,E. coli O157:H71982-first reco,42,肠集聚型大肠埃希菌 EAggEC,致病物质,毒素,粘附素,所致疾病,引起婴儿持续性腹泻，脱水，偶有血便,肠集聚型大肠埃希菌 EAggEC致病物质,43,肠杆菌科概述埃希菌属课件,44,（一）检验程序（二）标本采集,（三）检验方法（四）耐药性 （五）结果分析与报告,微生物学检验,（一）检验程序（二）标本采集微生物学检验,45,大肠埃希菌检验程序,大肠埃希菌检验程序,46,肠外感染：,标本,分离培养,涂片染色,鉴定（生化反应,（I,MViC等）,腹 泻：,粪便,鉴别培养基分离培养鉴定,检测肠毒素,毒力因子,血清型,微生物学检查法,肠外感染：标本分离培养鉴定（生化反应（IMViC等）腹,47,检验方法,1.,显微镜检查,2.,分离培养,3.,鉴定,ETEC,EPEC,EIEC,EHEC,EaggEC,检验方法1.显微镜检查,48,ST,检测（乳鼠灌胃试验）,ST检测（乳鼠灌胃试验）,49,LT,检测（,CHO,细胞培养）,LT 检测（ CHO细胞培养）,50,O157:H7,菌落特征（,MAC,）,O157:H7菌落特征（MAC）,51,O157:H7,菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）,返回,O157:H7菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）返回,52,卫生细菌学检查,大肠菌群数,每1000(g)ml水中大肠菌群数：,大肠菌群：37,，24小时内发酵乳糖产酸产气的革兰染色阴性的无芽胞需氧或兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希菌属，枸橼酸菌属，克雷伯菌属及肠杆菌属等。,细菌总数,每1ml(g)样品中细菌总数,我国卫生标准,大肠菌群：,每升饮用水中3个以下，,每100ml瓶装汽水、果汁等5个以下,细菌总数：每毫升饮用水不得超过100个,卫生细菌学检查大肠菌群数,53,防治原则,疫苗,抗生素的抗性质粒，耐药性非常普遍,防治原则疫苗,54,问题,大肠埃希菌与人类健康的关系如何？,肠道杆菌的共同特征？,致人类腹泻大肠埃希菌有哪几种？,问题大肠埃希菌与人类健康的关系如何？,55,肠杆菌科概述埃希菌属课件,56,肠杆菌科概述埃希菌属课件,57,致病物质,菌毛、定居因子,K,抗原,与侵袭力有关,抗吞噬与抗补体的溶菌,外毒素,肠毒素及溶血毒素,内毒素,与感染特征和严重程度有关,致病物质菌毛、定居因子,58,所致疾病,肠道外感染,化脓性感染,泌尿道感染:最多见，逆行感染,尿道炎,膀胱炎,肾盂肾炎,腹泻,所致疾病肠道外感染,59,引起腹泻的大肠埃希菌,肠产毒型大肠埃希菌,e,ntero,t,oxigenic,E.,c,oli,ETEC,肠侵袭型大肠埃希菌,e,ntero,i,nvasive,E.,c,oli,EIEC,肠致病型大肠埃希菌,e,ntero,p,athogenic,E.,c,oli,EPEC,肠出血型大肠埃希菌,e,ntero,h,emorrhagic,E.,c,oli,EHEC,肠集聚型大肠埃希菌,e,ntero,ag,gregative,E.,c,oli,EAggEC,引起腹泻的大肠埃希菌肠产毒型大肠埃希菌 ente,60,