苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析ppt课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,武汉工程大学 制药工程部,武汉工程大学 制药工程部,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析,苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析,药理,:,收缩血管、升高血压、散大瞳孔、舒 张支气管、迟缓胃肠肌、加速心率、加强心肌收缩力,;,临床应用,:,升压、平喘、充血治疗。,药理: 收缩血管、升高血压、散大瞳孔、舒 张支气,结构,(,Structure),拟肾上腺素类药物,分子结构中具有苯乙胺基本结构,肾上腺素,(,adrenaline),盐酸克伦特罗,(,clenbuterol hydrochloride),硫酸沙丁胺醇,(,salbutamol sulfate),盐酸麻黄碱,(,ephedrine hydrochloride),R1 R2 R3 HX,结构 (Structure) 拟肾上腺素类药物,分子结,化学性质,(,feature),弱 碱 性,:,烃胺基侧链,仲胺氮弱碱性，游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂,;,其盐可溶于水,酚羟基特性：,邻苯二酚,(,或苯酚,),结构，与金属离子络合呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在碱性溶液中更易变色。,光学活性：,手性碳原子，具有旋光性。,苯环取代基特性：,如盐酸克伦特罗芳伯氨基；,紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。,化学性质 (feature)弱 碱 性:,鉴别试验 (,identification),与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应,鉴别试验 (identification)与三氯化铁反应、与,鉴别试验 (,identification),氧化反应,(,酚羟基,易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色,),肾上腺素,碘或过氧化氢,中性或酸性,肾上腺素红,放置,棕红色多聚体,盐酸异丙肾上腺素,偏酸性条件,碘,异丙肾上腺素红,硫代硫酸钠,重酒石酸,去甲肾上腺素,酒石酸氢钾饱和液,pH 3,、,56,碘试液,放置5,min,硫代硫酸钠,溶液为无色或仅显微红色或淡紫色,肾上腺素,或盐酸异丙肾上腺素,明显的红棕色,或紫色,淡红色溶液,鉴别试验 (identification)氧化反应(酚羟基,鉴别试验,(identification),双缩脲反应,盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱,芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。,例,:Chp2000，,鉴别盐酸麻黄碱,方法：取本品1%水溶液1,ml，,加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠液1,ml，,即显蓝紫色，加乙醚1,ml,振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。,鉴别试验 (identification)双缩脲反应,鉴别试验,(identification),与亚硝基铁氰化钠反应(,Rimini,试验),重酒石酸间羟胺,水,溶解,亚硝基铁氰化钠试液,丙酮数滴,碳酸氢钠少量,红紫色,脂肪伯氨基的专属反应,丙酮不含有甲醛,重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基,鉴别试验 (identification)与亚硝基铁氰化钠反,鉴别试验 (,identification),紫外特征吸收,红外特征吸收,:,上述药物还可采纳红外吸收光谱进行鉴别。,鉴别试验 (identification)紫外特征吸收红外特,特别杂质检查,(,Detection of specific impurities),酮体检查,生产工艺,:,酮体氢化还原制得,若氢化不完全则引入酮体杂质。,紫外分光光度法检查酮体的条件及要求,特别杂质检查 (Detection of specific,特别杂质检查,(,Detection of specific impurities),TLC,法检查有关物质,例,:,盐酸去氧肾上腺素,、硫酸沙丁胺醇,检查方法,:,避光操作。取本品,加甲醇制成每1,ml,含20,mg,的溶液，作为供试品溶液,;,周密量取上述溶液适量，加甲醇稀释成每1,ml,中含0、10,mg,的溶液，作为对比溶液。吸取上述两种溶液各10,l，,分别点于同一硅胶,G,薄层板上，以异丙醇氯仿浓氨溶液(80:5:15)为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。,特别杂质检查 (Detection of specific,特别杂质检查,(,Detection of specific impurities),盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查,(Chp2000,版,),有关双胍,取本品1、00,g ,置10,ml,量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法（附录,A）,试验，周密吸取上述溶液0.2,ml ，,分别点于两张色谱滤纸条(7.5,cm 50cm),上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，样点直径均为0.5 1,cm ;,照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯乙醇水(6:3:1) 为展开剂，展开至前沿距下端约7,cm,处，取出，晾干，用显色剂（取10铁氰化钾溶液1,ml ，,加10 亚硝基铁氰化钠溶液与10氢氧化钠溶液各1,ml ，,摇匀，放置15,min，,加水10,ml,与丙酮 12,ml，,混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色带，,R,f,值约为0.1 ），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向外延伸1,cm ，,并分剪成碎条，精 密吸取甲醇各20,ml,分别进行萃取后，照分光光度法（附录,A），,在232,nm,的波长处测定吸收度，不得过0.48。,特别杂质检查 (Detection of specific,含量测定(,Assay,),原 料,:,非水溶液滴定法、溴量法,制 剂：,比色法,提取容量法,紫外分光光度法,高效液相色谱法,含量测定(Assay)原 料:非水溶液滴定法、溴量法比色法,含量测定,(,Assay,),1、非水溶液滴定法弱碱性,冰醋酸为溶剂,醋酸汞消除氢卤酸的干扰,结晶紫为指示剂,(,盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲醇,也可电位法指示终点,),若碱性较弱则加醋酐使突跃明显,例,:,重酒石酸去甲肾上腺素直截了当滴定,盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰,;,由于碱性较弱,电位法指示终点,硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂,含量测定 (Assay)1、非水溶液滴定法弱碱性例:重酒石,四种非水溶剂,:,1,、酸性溶剂,:,有机弱碱在酸性溶剂中可显著增强其相对碱度,比如冰醋酸。,2.,碱性溶剂：比如,DMF,。,3.,两性溶剂：比如甲醇。,4.,惰性溶剂：比如甲苯、三氯甲烷等。,四种非水溶剂:1、酸性溶剂:有机弱碱在酸性溶剂中可显著增强其,1,、,酸性溶剂,:,常用冰,HAc,除水,(,加入计算量的醋酐,),基准物,:,邻苯二甲酸氢钾,(,既可标定酸又可标定碱,),指示剂,:,结晶紫,2,、,标准溶液,:HClO,4,的冰,HAc,溶液,1、 酸性溶剂:常用冰HAc除水(加入计算量的醋酐)基,基本原理,置换反应,:,强酸置换弱酸的过程,故而所用的酸多为高氯酸。,一般方法,周密称取供试样品加冰醋酸溶解,加各规定试液，指示液,1-2,滴，用高氯酸滴定液滴定。终点以电位滴定时的突跃点为准。,基本原理置换反应:强酸置换弱酸的过程,故而所用的酸多为高氯酸,注意事项,1,、加入醋酐防止氨基被乙酐化,氨基乙酐化后碱性显著减弱,;,2.,低温能够防止氨基乙酐化；,3.,仲氨基的乙酰化物，以指示剂法和电位滴定法都不能被滴定；,4.,伯氨基的乙酰化物以电位滴定法尚可以；,注意事项1、加入醋酐防止氨基被乙酐化,氨基乙酐化后碱性显著减,适用范围,:,1,、适用于,pka8,的有机弱碱性药物及其盐类的含量测定,但不同的碱性有不同的溶剂、滴定剂和指示方法,;,2.Pka=8-10,，以冰醋酸为溶剂；,10-12,，醋酸加醋酐为溶剂；,12,以醋酐为溶剂；,此外还能够加入乙酸，以利于碱性药物的碱性增强，使突跃显著增大。,适用范围:1、适用于pka8的有机弱碱性药物及其盐类的含量,各种影响,:,1,、醋酸汞能够消除盐酸对滴定的影响,;,2.,醋酸具有挥发,温度和贮存条件影响滴定剂浓度；,3.,以电位滴定法来确定指示剂的终点颜色变化；,注,:,加入醋酐注意防止氨基被乙酰化,因此在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐。,各种影响:1、醋酸汞能够消除盐酸对滴定的影响;注:加入醋酐注,(3),加入醋酐可过量,但测,或 时不能过量。,（,4,）防冻,16,以下 冰,+,醋酐混合溶剂 或加入丙酸,(3)加入醋酐可过量,但测,3,、温度校正,:,冰,HAC,体积膨胀系数大,温度，,C,，不标定，测定时结果偏高，能够用公式校正。,4.,指示剂,(,或用电位法,),：结晶紫,紫色蓝蓝绿黄,应用电位法确定时 空白校正,3、温度校正:冰HAC体积膨胀系数大,温度，C，不标定，,(,1),市售,HClO,4,含水约为,30,、,0,加入醋酐除去。,（,2,）配制时（,HClO,4,与醋酐反应剧烈 ）,配,0.1M HClO,4,1000ml,，需,HClO,4,（,70%,）,M=100.5 d=1.75,，,HClO,4,多少,mL?,V=8.2mL,用,8.5mL,(1)市售HClO4含水约为30、0,加入醋酐除去。,3,、,应用,1),胺类、氨基酸、含氮杂环,2,）有机酸的碱金属盐,3,）有机碱的氢卤酸盐,4,）有机碱的有机酸盐,3、 应用 1)胺类、氨基酸、含氮杂环 2）有机酸的碱金属,含量测定,(,Assay,),2、溴量法,基本原理,:,测定方法,:,取本品约0、1,g,周密称定，置碘瓶中，加水20,ml,使溶解，精密加溴 滴定液(0.1,mol/L)50ml，,再加盐酸5,ml,，马上密塞，放置15分钟并时时振摇，注意微开瓶 塞，加碘化钾试液10,ml ，,立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1,mol/L),滴定，至 近终点时，加淀粉指示液，接着滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1,ml,溴滴定液(0.1,mol/L),相当于3.395,mg,的,C,9,H,13,NO,2,HCl。,含量测定 (Assay)2、溴量法测定方法:取本品约0、1g,含量测定,(,Assay,),3、比色法,测定原理,:,注意,:,由于偶合剂,(N-(1-,萘基)-乙二胺,),与亚硝酸也能显色干扰测定,因此在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。,含量测定 (Assay)3、比色法注意:由于偶合剂(N-(1,比色法含量测定,例,:,盐酸克伦特罗栓,(Chp2005),【,含量测定】 对比品溶液的制备 周密称取盐酸克仑特罗对照品适量,加盐酸溶液 (9100)制成每1,ml,中含7、2,g,的溶液。,供试品溶液的制备 取本品20粒，精密称定，切成小片，精密称取适量（约相当于 盐酸克仑特罗0.36,mg），,置分液漏斗中，加温热的氯仿20,ml,使溶解，用盐酸溶液(9 100)振摇提取3 次(20,ml、15ml、10ml) ，,分取酸提取液，置50,ml,量瓶中，用盐酸溶液(9 100)稀释至刻度，摇匀，滤过，收集续滤液，即得。,测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各15,ml，,分置25,ml,量瓶中，各加盐酸溶 液(9100)5,ml,与0.1 亚硝酸钠溶液1,ml ，,摇匀，放置3 分钟，各加0.5 氨基磺酸 铵溶液1,ml ，,混匀，时时振摇10分钟，再各加0.1 盐酸萘乙二胺溶液1,ml,，混匀，放置 10分钟，用盐酸溶液(9100)稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录,B），,在 500,nm,的波长处分别测定吸收度，计算，即得。,比色法含量测定例:盐酸克伦特罗栓(Chp2005),含量测定,(,Assay,),4、提取酸碱滴定法,原理,:,溶解性盐酸盐或硫酸盐可溶于水,游离碱不溶于水，溶于有机溶剂。,方法：,供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直截了当滴定,(,或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定,),。,例：,硫酸苯丙胺加水溶解加氢氧化钠试液8,ml ,加氯化钠使饱和乙醚多次提取合并乙醚液周密加硫酸滴定液（0、05,mol/L）25ml,振摇低温蒸去乙醚放冷至室温加甲基红指示液2滴用氢氧化钠（0.1,mol/L）,滴定。每1,ml,硫酸滴定液（0.05,mol/L）,相当于18.42,mg,的,C,18,H,26,N,2,H,2,SO,4,。,含量测定 (Assay)4、提取酸碱滴定法,含量测定 (,Assay,),5、荧光分光光度法,基本原理,:,肾上腺素含有的邻苯二酚结构,被弱氧化剂氧化，生成肾上腺素红，发生转位为,N-,甲基-3，5,6-三羟基吲哚,(THI)。(Tri- Hydroxyl- Indole-),本法还可用于测定微量儿茶酚胺类药物。,含量测定 (Assay)5、荧光分光光度法本法还可用于测定微,含量测定 (,Assay,),6、高效液相色谱法,高效分离,高灵敏度和高选择性可用于制剂常规分析，临床药物监测和体内药物动力学研究。,例1,:,重酒石酸去甲肾上腺素注射液分析,色谱条件：,色谱柱：,ODS,流动相：0、14%庚烷基磺酸钠溶液甲醇(65:35)，用磷酸调,pH,至3.00.1，流速：1.0,ml/min,检测波长：280,nm,测定方法：,周密量取本品适量,(,约相当于重酒石酸去甲肾上腺素4,mg)，,置25,ml,量瓶中， 加醋酸溶液（125）稀释至刻度，摇匀，取2,l,注入液相色谱仪，记录色谱图,;,另取重酒石 酸去甲肾腺素对比品适量，精密称定，加醋酸溶液（125）制成每1,ml,中含0.16,mg,的溶液， 同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。,含量测定 (Assay)6、高效液相色谱法,含量测定 (,Assay,),6、高效液相色谱法,例1,:,HPLC-EChD,法测定血浆中儿茶酚胺类药物,色谱条件：色谱柱：,ODS,型键合相,流动相：离子对试剂,检测器：电化学检测器,供试品溶液的制备：氧化铝吸附洗脱,含量测定 (Assay)6、高效液相色谱法,含量测定 (,Assay,),7、衍生化气相色谱法,例,:,盐酸芬氟拉明 (,fenfluramine hydrochloride),由于结构中的仲胺基极性极强,使得气相色谱法测定值波动较大，因此将样品溶解后经碱化乙酸乙酯提取，加入内标，提取液用三氟乙酸酐进行酰化衍生化，将衍生化产物在5%,SE-30,的色谱柱上分析，用,FID,检测器检测。,含量测定 (Assay)7、衍生化气相色谱法由于结构中的仲胺,第三节 芳氧丙醇胺类药物,典型药物,:,氧烯洛尔 (,Oxprenolol,别名烯丙氧心胺，心得平，,Tracosal, Trasacor, Trasieor ),肾上腺素受体阻滞药,盐酸卡替洛尔 (,Carteolol hydrochloride),受体阻滞药,第三节 芳氧丙醇胺类药物典型药物:,鉴别反应,(,identification),化学鉴别,氧烯洛尔,:,取本品0、1,g,加乙醇2,ml,溶解后，滴加0.1,mol/L,高锰酸钾溶液1,ml，,振 摇数分钟，高锰酸钾颜色消褪，并产生棕色沉淀。,盐酸卡替洛尔：取本品约0.1,g，,加水5,ml,使溶解，加硫氰酸铬铵试液5滴，即生成淡红色沉淀。,紫外吸收峰特征,氧烯洛尔水溶液 (40,g/ml):,在275,nm,的波长处有最大吸收。,盐酸卡替洛尔 (8,g/ml):,在215,nm,与252,nm,的波长处有最大吸收。,鉴别反应 (identification)化学鉴别 紫外吸,盐酸卡替洛尔的有关物质检查,TLC,法,自身对比法,检查方法,:,取本品0、20,g，,加甲醇10,ml,使溶解，作为供试品溶液,;,周密量取2,ml，,置100,ml,量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1,ml，,置10,ml,量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照薄层色谱法 (附录,B),试验，吸取上述两种溶液备10,l，,分别点于同一硅胶,GF,254,薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨溶液 (50:20:1)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254,nm),下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的 主斑点比较，不得更深。,盐酸卡替洛尔的有关物质检查TLC法,自身对比法,含量测定,盐酸卡替洛尔原料,取本品约0、5,g,周密称定，加冰醋酸30,ml，,在水浴上加热溶解，放冷，加醋酐70,ml，,照电位 滴定法(附录,A)，,用高氯酸滴定液(0.1,mol/L),滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1,ml,高氯酸滴定 液(0.1,mol/L),相当于32.88,mg,的,C,16,H,24,N,2,O,3,HCl。,含量测定 盐酸卡替洛尔原料,含量测定,盐酸卡替洛尔滴眼液,周密量取本品适量,用水定量稀释制成每1,ml,中约含盐酸卡替洛尔16,g,的溶液，照分光光度法(附录,A)，,在252,nm,的波长处测定吸收度,;,另取盐酸卡替洛尔对比品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1,ml,中约含盐酸卡替洛尔16,g,的溶液，同法测定，计算，即得。,含量测定盐酸卡替洛尔滴眼液,含量测定,人血浆中氧烯洛尔及其异构体的分析,色谱条件,:,预柱：,ODS,填料,分析柱：手性,OD-R,柱,(,手性选择剂为3，5-二甲苯氨基甲酸酯纤维素,),流动相：,NaClO4(0,、,45mol/L)-,乙腈(70:30)的磷酸盐缓冲溶液(,pH6.0),检测波长：273,nm,血浆处理方法：,醋酸纤维膜透析用预柱纯化、富集手性柱分离分析。,含量测定人血浆中氧烯洛尔及其异构体的分析,感谢您的聆听！,感谢您的聆听！,