家兔试验性肺水肿课件

相关理论知识相关理论知识 水肿概念水肿概念过多的液体积聚于组织间隙或体腔。过多的液体积聚于组织间隙或体腔。水肿机制水肿机制1.血管内外液体交换失衡血管内外液体交换失衡（组织液生成增多或淋巴回流受阻）（组织液生成增多或淋巴回流受阻）2.2.体内外液体交换失衡体内外液体交换失衡 （摄入大于排出，钠、水潴留）（摄入大于排出，钠、水潴留）相关理论知识 水肿概念过血管内外液体交换示意图血管内外液体交换示意图 平均有效滤过压平均有效滤过压=有效流体静压有效流体静压-有效胶体渗透压有效胶体渗透压(平均毛细血管流体静压平均毛细血管流体静压-组织间静水压组织间静水压)-(血浆胶体渗透压血浆胶体渗透压-组织间胶渗组织间胶渗压压)小动脉小动脉小静脉小静脉血浆胶体渗透压血浆胶体渗透压25mmHg组织间静水压组织间静水压-10mmHg组织间胶渗压组织间胶渗压10mmHg淋巴管淋巴管Pcap 20mmHg血管内外液体交换示意图 组织液生成过多组织液生成过多1.毛细血管流体静压升高毛细血管流体静压升高2.毛细血管胶体渗透压降低毛细血管胶体渗透压降低3.血管壁通透性增高血管壁通透性增高4.淋巴回流受阻淋巴回流受阻组织液生成过多1.毛细血管流体静压升高实验目的实验目的1.1.掌握肺水肿动物模型复制方法。掌握肺水肿动物模型复制方法。2.2.观察肺水肿时呼吸、心率、中心静脉压的变观察肺水肿时呼吸、心率、中心静脉压的变 化及典型体征。化及典型体征。3.3.通过实验加深对肺水肿发生机制的理解。通过实验加深对肺水肿发生机制的理解。实验目的1.掌握肺水肿动物模型复制方法。实验原理实验原理实验中家兔大量快速输液，可使血容量明显增加，实验中家兔大量快速输液，可使血容量明显增加，血浆胶体渗透压下降，有利于水肿的发生。血浆胶体渗透压下降，有利于水肿的发生。在此基础上，输注肾上腺素，可引起外周血管广泛在此基础上，输注肾上腺素，可引起外周血管广泛收缩，导致血液由体循环急速转移到肺循环，加之毛细收缩，导致血液由体循环急速转移到肺循环，加之毛细血管通透性增高，未能为左心所代偿，结果使左心房压血管通透性增高，未能为左心所代偿，结果使左心房压力和肺毛细血管流体静压突然升高，液体进入肺泡及间力和肺毛细血管流体静压突然升高，液体进入肺泡及间质增多，影响肺呼吸功能，而出现肺水肿。质增多，影响肺呼吸功能，而出现肺水肿。实验原理实验中家兔大量快速输液，可使血容量明显增加，血浆实验对象实验对象 家兔家兔器械与药品器械与药品常规手术器械，气管插管，婴儿秤，听诊器，天平，常规手术器械，气管插管，婴儿秤，听诊器，天平，兔固定台。兔固定台。20ml注射器，输液装置，注射器，输液装置，Power Lab信号采集处理信号采集处理系统，压力换能器，滤纸，烧杯，丝线，粗棉线。系统，压力换能器，滤纸，烧杯，丝线，粗棉线。20%乌拉坦，注射用肾上腺素。乌拉坦，注射用肾上腺素。实验对象器械与药品常规手术器械，气管插管，婴儿秤，听诊器，天步骤与方法步骤与方法 实验分组：实验分组：PE组家兔组家兔4只，只，Sham组组2只。只。称重后经耳缘静脉称重后经耳缘静脉注入注入20%20%乌拉坦乌拉坦（5ml/kg.bw5ml/kg.bw）进行全身麻醉进行全身麻醉1.称重、麻醉与固定：称重、麻醉与固定：步骤与方法 实验分组：PE组家兔4只，Sham组2步骤与方法步骤与方法2.2.手术（手术（备皮，在颈部正中做长备皮，在颈部正中做长6cm6cm的纵切口。的纵切口。）步骤与方法2.手术（备皮，在颈部正中做长6cm的纵切口。）步骤与方法步骤与方法2.2.手术（手术（钝性分离气管和一侧的颈浅静脉并分别插管。钝性分离气管和一侧的颈浅静脉并分别插管。）步骤与方法2.手术（钝性分离气管和一侧的颈浅静脉并分别插管步骤与方法步骤与方法3.3.观察呼吸、心率、中心静脉压的变化，听诊呼吸音。观察呼吸、心率、中心静脉压的变化，听诊呼吸音。步骤与方法3.观察呼吸、心率、中心静脉压的变化，听诊呼吸音步骤与方法步骤与方法4.4.输入生理盐水输入生理盐水100ml/kg.bw100ml/kg.bw，速度，速度150180150180滴滴/分。分。输液瓶中加入肾上腺素以输液瓶中加入肾上腺素以0.5mg/kg0.5mg/kg，继续滴注。，继续滴注。密切观察各指标变化。密切观察各指标变化。（有无明显呼吸困难，湿罗音，以及粉红色泡沫痰溢出）（有无明显呼吸困难，湿罗音，以及粉红色泡沫痰溢出）步骤与方法4.输入生理盐水100ml/kg.bw，速度1步骤与方法步骤与方法5.5.当出现肺水肿典型表现时，用止血钳夹闭气管，将当出现肺水肿典型表现时，用止血钳夹闭气管，将 肺取出，肺取出，观察肺大体变化并观察肺大体变化并用滤纸吸干肺表面水分后，用滤纸吸干肺表面水分后，准确称取肺重量，计算肺系数。准确称取肺重量，计算肺系数。肺系数肺系数=肺重量（肺重量（g）体重（体重（kg）。正常肺系数为）。正常肺系数为45。步骤与方法5.当出现肺水肿典型表现时，用止血钳夹闭气管，将 取右肺上叶放入盛满取右肺上叶放入盛满4%多聚甲醛液的多聚甲醛液的EP管中，保管中，保存于存于4冰箱，用于组织形态学观察和免疫组织化冰箱，用于组织形态学观察和免疫组织化学染色分析。学染色分析。实验拓展实验拓展抽取颈总动脉全血标本抽取颈总动脉全血标本5 ml置于一次性使用真空置于一次性使用真空采血管中，低速离心（采血管中，低速离心（3000 rpm，10 min）后，）后，取血浆放入取血浆放入-80冰箱保存留作检测。冰箱保存留作检测。取右肺下叶用于肺干湿比测定。取右肺下叶用于肺干湿比测定。左肺用于制备肺泡灌洗。左肺用于制备肺泡灌洗。标本留取标本留取（实验组与对照组分别留取）（实验组与对照组分别留取）取右肺上叶放入盛满4%多聚甲醛液的EP管中，保实验拓展抽取颈实验拓展实验拓展常规方法，进行乙醇梯度脱水、透明、浸蜡、包埋等常规方法，进行乙醇梯度脱水、透明、浸蜡、包埋等程序制作组织蜡块；连续切片（程序制作组织蜡块；连续切片（5 m），在摊片机），在摊片机48水中展片和捞片，然后在水中展片和捞片，然后在68恒温烤箱中烘烤恒温烤箱中烘烤4 h；然后按我室常规步骤进行；然后按我室常规步骤进行HE染色。染色。1.肺组织形态学肺组织形态学肺组织肺组织HE 染色（染色（100）Sham组PE组1PE组2实验拓展常规方法，进行乙醇梯度脱水、透明、浸蜡、包埋等程序制实验拓展实验拓展准确称取固定位置肺组织的湿重，并记录；置烤箱准确称取固定位置肺组织的湿重，并记录；置烤箱80C连续烘烤连续烘烤72 h后，再用称湿重的同一电子太平称后，再用称湿重的同一电子太平称取干重，计算湿重取干重，计算湿重/干重的重量比（干重的重量比（W/D）。）。2.肺组织干湿比肺组织干湿比PE组肺组织湿干重比显著高于组肺组织湿干重比显著高于Sham组组实验拓展准确称取固定位置肺组织的湿重，并记录；置烤箱80C实验拓展实验拓展制备支气管肺泡灌洗液：使用制备支气管肺泡灌洗液：使用10 ml无菌注射器抽取无菌注射器抽取6ml生理盐水，针尖插入左肺主干气管并结扎，将生理盐水生理盐水，针尖插入左肺主干气管并结扎，将生理盐水缓慢注入右肺内，再倒置，留取支气管肺泡灌洗液缓慢注入右肺内，再倒置，留取支气管肺泡灌洗液（BLAF），放入标识好的），放入标识好的EP管中在恒温高速离心机中管中在恒温高速离心机中离心（离心（4C，3000转速，转速，5 min）后）后-80C冰箱保存。冰箱保存。3.肺通透性指数肺通透性指数应用全自动生化分析仪检测血浆总蛋白浓度。应用全自动生化分析仪检测血浆总蛋白浓度。计算肺通透性指数：计算肺通透性指数：BLAF总蛋白浓度总蛋白浓度/血浆总蛋白浓度。血浆总蛋白浓度。应用应用BCA方法检测总蛋白浓度。方法检测总蛋白浓度。PE组家兔组家兔肺通透性指数显著高于肺通透性指数显著高于Sham组组。实验拓展制备支气管肺泡灌洗液：使用10 ml无菌注射器抽取6注意事项注意事项1.不能使用实验前有肺水肿指征（罗音、喘息、气不能使用实验前有肺水肿指征（罗音、喘息、气 促）促）的动物，否则会影响实验结果。的动物，否则会影响实验结果。2.控制好输液速度和输液量，过慢时实验组和对照控制好输液速度和输液量，过慢时实验组和对照 组组 均不发生肺水肿，而过快时对照组也会发生肺水肿。均不发生肺水肿，而过快时对照组也会发生肺水肿。3.如一次给肾上腺素肺水肿指征不明显需重新给药时，如一次给肾上腺素肺水肿指征不明显需重新给药时，两次间隔宜在两次间隔宜在1015分钟，不易过频。分钟，不易过频。4.取肺时要小心，防止肺组织破裂和水肿液流出，否则取肺时要小心，防止肺组织破裂和水肿液流出，否则 影响肺系数的准确性。影响肺系数的准确性。注意事项1.不能使用实验前有肺水肿指征（罗音、喘息、气 促讨论讨论1.本实验中为什么要大量快速输液？本实验中为什么要大量快速输液？2.输入肾上腺素导致肺水肿的机制是什么？输入肾上腺素导致肺水肿的机制是什么？3.实验中为什么会出现粉红色泡沫痰？实验中为什么会出现粉红色泡沫痰？4.临床上可以选用血管扩张剂，利尿剂，血管紧张素临床上可以选用血管扩张剂，利尿剂，血管紧张素转换酶抑制剂（转换酶抑制剂（ACEI），），受体阻滞剂（受体阻滞剂（-b），洋），洋地黄制剂，非洋地黄类正性肌力药物，醛固酮拮抗剂地黄制剂，非洋地黄类正性肌力药物，醛固酮拮抗剂对肺水肿进行治疗，如呋塞米、对肺水肿进行治疗，如呋塞米、654-2、氯丙嗪、地、氯丙嗪、地塞米松塞米松明白不同药物的作用机理、选择几种药物明白不同药物的作用机理、选择几种药物对肺水肿家兔进行治疗并观察对比治疗效果。对肺水肿家兔进行治疗并观察对比治疗效果。讨论1.本实验中为什么要大量快速输液？