尿液检验知识

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第五章尿 液 检 验第二次课第二次课 Go第一节第一节 概概 述述n n 尿液(urine)由肾脏生成,通过输尿管、膀胱及尿道排除体外。尿液是人体日生成与排泄量最多的液体,其生成和排泄依赖于泌尿系统正常的结构与完善的功能,受神经、体液、内分泌系统的有机调节,同时还受全身其它系统功能状态的影响。通过尿液的排泄,可排出体内的代谢废物、异物、毒物等,同时调节水、电解质代谢及酸碱平衡,借以维持内环境的相对恒定。此外,肾脏还分泌一些生物活性物质,具有重要的生理功能。n n 一、尿液的生成与排泄 n n(一)肾的结构 。n n 肾单位是肾脏泌尿活动的最基本的功能单位,包括肾小体和肾小管,与集合管共同完成泌尿功能。肾脏组织基本结构肾脏组织基本结构 肾小球(血管球)肾小球(血管球)肾小体肾小体 肾小囊(肾小囊(Bowman囊囊)肾单位肾单位 曲部曲部(近曲小管近曲小管)近端小管近端小管 直部直部(髓袢降支粗段髓袢降支粗段)肾小管肾小管 细段细段 髓袢髓袢 肾脏肾脏 直部直部(髓袢升支粗段髓袢升支粗段)远端小管远端小管 曲部曲部(远曲小管远曲小管)集合管集合管 皮质段皮质段 髓质段髓质段 乳头管乳头管肾脏的大体结构肾脏的大体结构肾脏的大体结构肾脏的大体结构胰腺炎胰腺炎血淀粉酶血淀粉酶 糖尿病糖尿病血糖血糖肝胆病肝胆病直接胆红素直接胆红素早孕、葡萄胎早孕、葡萄胎绒毛膜促性腺激素绒毛膜促性腺激素尿尿n n(二)尿液生成过程n n 尿液的生成包括三个相互联系的环节,包括肾小球的滤过、肾小管的重吸收和肾小管与集合管的分泌(排泄)。n n1肾小球的滤过作用 正常肾小球的基底膜对血浆成分的滤过具有选择性。n n影响肾小球滤过的因素有:n n(1)有效滤过压:有效滤过压=肾小球毛细血管压一(血浆胶体渗透压+肾小球囊内压)。n n(2)滤过膜的通透性:肾小球滤过膜有三层结构,即毛细血管壁的内皮层、基膜及 覆盖于外的肾小球囊脏层的上皮细胞,都有大小不同的孔,构成机械性屏障。n n(3)滤过面积:人体两肾约有200万个肾单位,肾小球毛细血管总面积达1.6m2以上,接近人体总体表面积。n n2.肾小管与集合管重吸收n nA.近曲小管:重吸收葡萄糖、小分子蛋白质、AA、乳酸、肌酸、离子(K、Na、Cl、Ca、P、Mg、HCO3)、大部分水、硫酸盐、磷酸盐、尿素、尿酸。n n肌酐几乎不被重吸收而排出体外。n nB.远曲小管、集合管:重吸收水n n3肾小管和集合管的分泌与排泄作用 n n肾小管和集合管的泌H+、NH4+作用及Na-K交换作用。n n(三)尿液的排泄 原尿经肾小管和集合管的重吸收、分泌与浓缩稀释后即形成了终尿,流经肾盂、输尿管到达膀胱并储存,通过尿道排出体外。二、二、尿液检验目的尿液检验目的 泌尿系统疾病的筛查与鉴别泌尿系统疾病的筛查与鉴别 炎症、肿瘤、结石、炎症、肿瘤、结石、监测监测 其他系统疾病的辅助诊断与观察其他系统疾病的辅助诊断与观察 糖尿病糖尿病 安全用药的监护安全用药的监护中毒与职业病的防护中毒与职业病的防护健康体检健康体检16三、尿液标本的收集、保存与检测后处理三、尿液标本的收集、保存与检测后处理n n(一一一一)尿标本收集尿标本收集尿标本收集尿标本收集n n为保证检查结果的准确性,收集标本时注意为保证检查结果的准确性,收集标本时注意为保证检查结果的准确性,收集标本时注意为保证检查结果的准确性,收集标本时注意以下几点:以下几点:以下几点:以下几点:n n1 1容器清洁、干燥,密封性能好、具有较大容器清洁、干燥,密封性能好、具有较大容器清洁、干燥,密封性能好、具有较大容器清洁、干燥,密封性能好、具有较大口径,便于留取尿液的一次性尿样杯;具有口径,便于留取尿液的一次性尿样杯;具有口径,便于留取尿液的一次性尿样杯;具有口径,便于留取尿液的一次性尿样杯;具有安全、易于启盖的密封容器,以利于标本的安全、易于启盖的密封容器,以利于标本的安全、易于启盖的密封容器,以利于标本的安全、易于启盖的密封容器,以利于标本的储运。容器周围应标有病人的姓名、检验联储运。容器周围应标有病人的姓名、检验联储运。容器周围应标有病人的姓名、检验联储运。容器周围应标有病人的姓名、检验联号号号号(条形码条形码条形码条形码),并留有填写标本留取时间的空,并留有填写标本留取时间的空,并留有填写标本留取时间的空,并留有填写标本留取时间的空间。间。间。间。n n2标本留取的时间与方法 (1)清晨空腹尿 适用于糖尿病的筛查、泌尿系统疾病的诊断、疗效观察等。(2)餐后2h尿 可用于糖耐量检查。(3)随机尿 适用于门诊或急诊化验的病人。(4)定时尿 3h尿 尿细胞排泄率 12h尿 Addis计数 已经淘汰 24h尿 尿化学成分定量测定 (5)导尿或耻骨上膀胱穿刺尿尽量不采用,以免发生医源性感染。(二)尿标本的保存尿标本的保存 冷藏冷藏(6h(6h)2 288抑菌抑菌/固定有形成分固定有形成分 尿化学成分检查尿化学成分检查糖糖/蛋白蛋白 甲苯甲苯(toluene)5(toluene)520ml/L20ml/L尿尿膜膜 尿有形成分检查尿有形成分检查 40%40%甲醛甲醛(formalin)5(formalin)510ml/L10ml/L 结核杆菌等尿菌检查结核杆菌等尿菌检查 麝香草酚麝香草酚(thymol)0.1g/100ml_(thymol)0.1g/100ml_抑菌抑菌 尿激素检查尿激素检查17-17-羟羟/酮等酮等 浓盐酸浓盐酸(hydrochiloric acid)1ml/L-(hydrochiloric acid)1ml/L-尿尿PH=2 PH=2 卟啉尿卟啉尿 碳酸钠碳酸钠(sodium carbonate)10g/24h_(sodium carbonate)10g/24h_碱化尿碱化尿(三)检验后标本处理检验后标本处理 1 1 向下水道排放:向下水道排放:10g/L10g/L过氧乙酸或漂白粉;过氧乙酸或漂白粉;2 2 设专用容器设专用容器收集收集消毒消毒交环卫处;交环卫处;3 3 容器重复使用:容器重复使用:浸泡浸泡水冲洗水冲洗烘干烘干 70%70%乙醇乙醇 浸泡浸泡 30-50g/L 30-50g/L漂白粉漂白粉 10g/L 10g/L次氯酸钠液次氯酸钠液 2 2小时小时 5g/L 5g/L过氧乙酸过氧乙酸 30-6030-60分分 4 4 消毒后消毒后烧毁烧毁 第二节 尿液理学检查 尿液理学检验尿液理学检验 一一 尿量尿量 二二 颜色颜色/透明度透明度 三三 尿比重尿比重 四四 尿渗透压尿渗透压/尿渗量尿渗量掌握临床意义掌握临床意义一、尿液感官检查一、尿液感官检查(一)尿量(一)尿量尿量尿量(urnary volume)(urnary volume)一定时间排除的尿量一定时间排除的尿量,主要主要取决于肾小球的滤过、肾小管的重吸收和浓缩取决于肾小球的滤过、肾小管的重吸收和浓缩-稀释稀释功能,还受饮食起居习惯、环境等的影响。正常成功能,还受饮食起居习惯、环境等的影响。正常成人尿量人尿量 100010002000ml/d2000ml/d 临床意义临床意义 1 1 少尿(少尿(oliolig guria)400ml/duria)400ml/d或或17ml/h17ml/h 无尿无尿 (a(an nuria)100ml/duria)2500ml/dria)2500ml/d 小管浓缩功能小管浓缩功能 溶质性利尿溶质性利尿 糖尿病糖尿病 GSGS 尿毒症尿毒症 BUN BUN 尿崩症尿崩症 多饮性多饮性 习惯、精神性、疾病习惯、精神性、疾病 尿液外观尿液外观尿液外观指尿液的颜色和透明度。尿液外观指尿液的颜色和透明度。正常尿液为淡黄色或桔黄色,清晰透明。正常尿液为淡黄色或桔黄色,清晰透明。【临床意义临床意义】1 1、血尿、血尿血尿血尿(hema(hemat turia)uria)指尿内含一定量指尿内含一定量RBCRBC 肉眼血尿肉眼血尿 1ml/L 1ml/L 洗肉水洗肉水 镜下血尿镜下血尿 尿沉渣尿沉渣 RBC3RBC3个个/HP/HP原因原因 A A 泌尿生殖系统泌尿生殖系统炎炎/石石/伤伤/瘤瘤 B B 血液病血液病 血友病、过敏性紫癜血友病、过敏性紫癜 C C 其他其他 2 2、血红蛋白尿血红蛋白尿(hemoglobinuria)(hemoglobinuria)定义定义 血浆游离血浆游离Hb1000mg/LHb1000mg/LHbHb尿尿 外观外观 新鲜新鲜粉红粉红 陈旧陈旧棕棕/酱油酱油/浓茶浓茶 特点特点 镜检镜检 无无RBCRBC、潜血(、潜血(BLDBLD)+意义意义 血管内溶血血管内溶血n n3、肌红蛋白尿肌红蛋白尿(myoglobinuria)n n 外观外观 新鲜新鲜粉红粉红 陈旧陈旧暗褐色暗褐色n n 特点特点 镜检镜检 无无RBC、潜血(、潜血(BLD)+n n 加加80%硫酸铵溶液硫酸铵溶液溶解溶解n n 意义意义 各种肌损伤:各种肌损伤:大面积烧伤大面积烧伤大面积烧伤大面积烧伤/缺氧缺血肌缺氧缺血肌缺氧缺血肌缺氧缺血肌病病病病4 4、脓尿脓尿 脓尿脓尿(pyuria)(pyuria)尿中含大量脓尿中含大量脓/白细胞白细胞(20010200106 6/L/L)肉眼肉眼 不同程度的黄白色混浊或含脓不同程度的黄白色混浊或含脓丝状悬浮物。丝状悬浮物。见于泌尿系统化脓性感染、肾结核等。见于泌尿系统化脓性感染、肾结核等。5 5、乳糜尿乳糜尿(chyluria)乳糜乳糜/淋巴液淋巴液 尿尿原理原理 特点特点 乳糜试验乳糜试验 混尿混尿+乙醚乙醚乳糜微粒乳糜微粒+苏丹苏丹染色染色 阳性阳性 橘红色脂肪球橘红色脂肪球 尿静置后分三层尿静置后分三层 病因病因 丝虫病丝虫病 结核结核 肿瘤肿瘤 胸腹部创伤胸腹部创伤6 6、结晶尿结晶尿(crystal(crystall luria)uria)定义定义 尿内含大量的盐类结晶尿内含大量的盐类结晶 种类种类 尿酸盐尿酸盐+热热 清清 磷酸磷酸/碳酸盐碳酸盐+乙酸乙酸 清清/+/+气泡气泡 草酸盐草酸盐+盐酸盐酸 清清 镜检镜检 见大量盐类结晶见大量盐类结晶(三)气味三)气味 正常尿液略带酸味。受饮食或药物等正常尿液略带酸味。受饮食或药物等因素的影响,长时间放置后由于尿素因素的影响,长时间放置后由于尿素分解带有氨臭味。分解带有氨臭味。二二 尿比重测定尿比重测定 定义定义 尿比重尿比重(urinary specif(urinary specifgravitygravity,SG)SG)指在指在44时尿液与同体积的纯水重量之比,又称尿时尿液与同体积的纯水重量之比,又称尿比密,它表示肾小管的浓缩和稀释能力。比密,它表示肾小管的浓缩和稀释能力。测定方法及评价测定方法及评价 1 1 试带法试带法 简单,不受简单,不受GSGS,造影剂影响,造影剂影响 精确度差,对过高精确度差,对过高/低的低的SGSG不敏感,不能作不敏感,不能作为诊断肾功能变化的指标。为诊断肾功能变化的指标。2 2 尿比重计法(尿比重计法(uriouriom meter)eter)由于比重计本身刻度标示误差较大而由于比重计本身刻度标示误差较大而容易引起系统误差,因而容易引起系统误差,因而NCCLSNCCLS建议不建议不再使用比重计法。再使用比重计法。3、折射计法折射计法有手提式或座式两种仪器。标本用量小,有手提式或座式两种仪器。标本用量小,可重复测定,尤其适用于少尿患者。结可重复测定,尤其适用于少尿患者。结果精确可靠,还可测算总固体量。应用果精确可靠,还可测算总固体量。应用较为普遍。被较为普遍。被NCCLSNCCLS推荐为参考方法。推荐为参考方法。意义意义 1 正常正常 1.0131.035 晨尿晨尿1.0182 SG 缺水、溶质缺水、溶质、急性肾炎、急性肾炎3 SG 肾炎、大量饮水、尿崩症肾炎、大量饮水、尿崩症 三、三、尿液渗透浓度测定尿液渗透浓度测定 定义定义 在一定大气压和温度下尿内溶质分在一定大气压和温度下尿内溶质分 子和离子的个数。子和离子的个数。检测方法及评价检测方法及评价1 1 冰点法冰点法 2 2 评价评价:尿渗透压比尿渗透压比SGSG更能客观的反映肾脏的更能客观的反映肾脏的浓缩稀释功能浓缩稀释功能.临床临床意义意义 正常正常 6006001000mOsm/KgH1000mOsm/KgH2 2O O 了解肾小管浓缩稀释功能了解肾小管浓缩稀释功能 n n 四、尿液浓缩稀释试验 n n 1Fishberg(费氏)浓缩稀释试验(concentrationdilution test)n n2昼夜尿比重试验,又称莫氏(mosenthal test)浓缩稀释试验 n n33h尿比重试验又称改良莫氏试验 第三节第三节 尿液常规的化学检查尿液常规的化学检查一一 尿液酸碱度测定尿液酸碱度测定 1 1 测定方法及评价测定方法及评价 黄黄-酸酸 指示剂法指示剂法 尿尿+溴麝香草酚篮溴麝香草酚篮 绿绿-中中 (bromothymol bluebromothymol blue,BTB),BTB)蓝蓝-碱碱 特点特点 简单简单 黄疸黄疸/血尿易干扰血尿易干扰 指示剂变色范围指示剂变色范围(6-7.6)(6-7.6)试纸法试纸法 试纸试纸/试带浸入尿中试带浸入尿中 目目/仪器测仪器测 特点特点 简单简单,广泛用应广泛用应;试带易变潮试带易变潮试带垫片试带垫片(BTB+(BTB+甲基红甲基红)滴定法滴定法 0.1mol/LNaOH0.1mol/LNaOH+尿尿PHPH滴定至滴定至7.47.4 求尿液可滴定酸求尿液可滴定酸 特点特点 可进行可进行pHpH值动态监测值动态监测 操作复杂操作复杂 PH计法计法 用电极直接测定用电极直接测定 特点特点 精确度高精确度高 ,适用于科研适用于科研 需要特殊仪器需要特殊仪器经常效准经常效准PH计计浓度标准/新鲜n n2 2、质量控制、质量控制 试纸要避光、干燥保存,防止被其它试纸要避光、干燥保存,防止被其它化学物质污染。化学物质污染。标本应及时测定,长期放置会因细菌标本应及时测定,长期放置会因细菌生长分解尿素产生氨,使生长分解尿素产生氨,使pHpH偏高。偏高。尿液尿液pHpH本身还可作为其它检查项目的本身还可作为其它检查项目的质控指标,若质控指标,若pHpH3 3或或99均会影响其它检测均会影响其它检测结果,如蛋白、比重等。应按规定进行调结果,如蛋白、比重等。应按规定进行调整整。3、临床意义、临床意义 正常正常 尿尿PH=4.58.0 晨尿晨尿=5.56.5 尿可滴定酸尿可滴定酸=2040mmol/24h 尿尿PH减低减低 进进酸性酸性物物高蛋白食高蛋白食酸性药物;酸性药物;体内产酸增多:体内产酸增多:饥饿饥饿/运动运动/应激;应激;酸中毒痛风白血病糖尿病等酸中毒痛风白血病糖尿病等 肾小管排酸增多:低血钾性碱中毒肾小管排酸增多:低血钾性碱中毒 COCO2 2潴留潴留呼吸性酸中毒呼吸性酸中毒尿尿PH增高增高 进碱进碱性性物物过多蔬菜水果过多蔬菜水果碱性药物碱性药物 体内丢酸增多体内丢酸增多 肾小管排酸减少肾小管性酸中毒肾小管排酸减少肾小管性酸中毒 COCO2 2排出增多呼吸性碱中毒排出增多呼吸性碱中毒 产碱增多产碱增多尿路感染细菌分解尿素产氨尿路感染细菌分解尿素产氨 指导临床用药指导临床用药 二、尿液蛋白质定性检查二、尿液蛋白质定性检查n n定义定义:尿蛋白尿蛋白150mg/24h or 100mg/L,常规化学定性检查呈阳性,称为,常规化学定性检查呈阳性,称为蛋白尿蛋白尿(proteinuria)。测定方法及评价测定方法及评价 试带法试带法 原理:原理:蛋白蛋白 +指示剂指示剂 -PH-PH颜色变化颜色变化蛋白量成正比蛋白量成正比 评价:评价:A A 快速,简便快速,简便-适于普查适于普查 B B 清蛋白清蛋白敏感敏感/球蛋白球蛋白不敏感不敏感 本周蛋白漏检本周蛋白漏检 C C 尿尿PHPH增高增高假阳性假阳性 加热乙酸法加热乙酸法 原理:蛋白原理:蛋白+热热变性变性/凝固凝固+酸酸易沉淀易沉淀 消除磷酸盐干扰消除磷酸盐干扰量要适当标准标准/合格合格评价:评价:A A 特异性强,干扰因素少特异性强,干扰因素少 B B 检出清检出清/球蛋白球蛋白敏感度低(敏感度低(0.15g/L)0.15g/L)C C 用作蛋白质定性的确证试验。用作蛋白质定性的确证试验。磺基水杨酸(磺柳酸)法磺基水杨酸(磺柳酸)法 原理:带正电蛋白原理:带正电蛋白+磺柳酸磺柳酸 沉淀沉淀1.某些药物-青霉素/SMZ-CO 及造影剂 2.尿内含高浓度尿/草酸或粘蛋白 评价:评价:A 简便简便/灵敏灵敏/迅速迅速/敏感度高(敏感度高(0.05g/L)g/L)B B 与所有的蛋白都能反应与所有的蛋白都能反应29假阳性 2 意义意义 正常正常 定性(定性(-)蛋白尿蛋白尿 定性(定性(+)生理性生理性 机理机理 肾血管痉挛肾血管痉挛毛细血管通透性毛细血管通透性原因原因 运动,受寒,紧张,妊娠,发热,运动,受寒,紧张,妊娠,发热,体位性等。体位性等。特点特点 定性(定性(+)27总蛋白定量病理性病理性A A 肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿 机理机理 肾小球滤过膜孔径肾小球滤过膜孔径或静电屏障改变或静电屏障改变 特点特点 定性定性 +原因原因 原发或继发肾小球肾炎,(原发或继发肾小球肾炎,(+)肾病综合症肾病综合症 (+)28B B 肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿机理机理 肾小管损害肾小管损害特点特点 +原因原因 肾小管间质性肾炎肾小管间质性肾炎 C C 混合性蛋白尿混合性蛋白尿 机理与特点机理与特点 小球小球+小管小管原因原因 小球和小管性疾病后期小球和小管性疾病后期D D 溢出性蛋白尿溢出性蛋白尿病机病机 多发性骨髓瘤(多发性骨髓瘤(BenceBenceJonesJones蛋白)蛋白)溶血性疾病(溶血性疾病(HbHb)29 大面积肌损伤(肌红蛋白)大面积肌损伤(肌红蛋白)特点特点 定性(定性(+)(+)E E 组织蛋白尿组织蛋白尿机理机理 a a 肾单位分泌肾单位分泌 b b 其它器脏产生的其它器脏产生的原因原因 提示组织损伤,心肌坏死,肿瘤提示组织损伤,心肌坏死,肿瘤 F F 假性蛋白尿假性蛋白尿 原因原因 血液血液/白带白带/月经月经/前列腺液等污染前列腺液等污染30总蛋白定量三、三、尿液糖定性检查尿液糖定性检查1 1 测定方法及评价测定方法及评价 班氏法班氏法 原理原理:GS+:GS+班氏试剂班氏试剂变色变色 质控质控 假阳性假阳性 评价:评价:非特异性定性试验非特异性定性试验 简单简单/但易受其他还原物的影响但易受其他还原物的影响 干化学试带法干化学试带法 原理原理:特异性特异性GS+GS+过氧化物酶过氧化物酶蓝蓝/红红还原VitC/尿酸/或其他 糖类等 煮沸1 尿混有强氧化物漂白粉假(+)2 标本久放-细菌分解GS假(-)30质控质控评价评价:特异性强特异性强/灵敏度高灵敏度高/简便迅速简便迅速 薄层层析法薄层层析法 复杂复杂/费时费时/昂贵昂贵2意义意义 正常正常 定性(定性(-)糖尿糖尿 定性定性(+)(+)生理性生理性 A A 饮食性饮食性 B B 精神性精神性 C C 妊娠(妊娠(151520%20%)定 量 病理性:病理性:A A 垂体前叶机能垂体前叶机能生长激素生长激素1)1)内分内分 B B 甲亢甲亢泌疾病泌疾病 C C 胰岛素分泌胰岛素分泌利用葡萄糖利用葡萄糖 D D 肾上腺皮功肾上腺皮功促糖原异生促糖原异生 E E 嗜酪细胞瘤嗜酪细胞瘤 去甲去甲,肾上腺素,肾上腺素 肝糖原降解肝糖原降解2)2)肾性糖尿肾性糖尿 小管损害(肾糖阈小管损害(肾糖阈)其他糖尿其他糖尿 如乳糖等如乳糖等 定 量四、尿中酮体定性检查四、尿中酮体定性检查 1 1 概念概念 尿酮体尿酮体(urine ketone(urine ketone odies,KET)odies,KET)是脂肪代谢中间产物,由乙酰乙酸、是脂肪代谢中间产物,由乙酰乙酸、羟丁酸和丙酮组成。羟丁酸和丙酮组成。2 测定方法及评价测定方法及评价 Lange法法 乙酰乙酸乙酰乙酸+亚硝酸基铁氰化钠亚硝酸基铁氰化钠 丙酮丙酮 +.Rothera Rothera 原理同原理同Lange法法 干化学试带法干化学试带法 原理同上原理同上 质控质控 尿要新鲜尿要新鲜碱紫紫红色化红色化合物合物41评价评价 不同试带对酮体的敏感性不同不同试带对酮体的敏感性不同方法方法方法方法灵敏度灵敏度灵敏度灵敏度(mg/L)(mg/L)乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸 羟丁酸羟丁酸羟丁酸羟丁酸丙丙丙丙 酮酮酮酮 LangeLange5050200200RotheraRothera80 80 100100干化学试带法干化学试带法 5050100 100 4004007007003意义意义 正常正常 定性定性(-)糖尿病酮症酸中毒糖尿病酮症酸中毒 假(假(-)肾酮阈值增高肾酮阈值增高肾严重受损肾严重受损 酮血症期酮血症期羟丁酸羟丁酸 其它其它 应激应激-剧烈运动剧烈运动/饥饿饥饿/感染感染/严重腹泻,呕严重腹泻,呕吐吐/全麻等中毒全麻等中毒五、五、尿液胆红素定性检查尿液胆红素定性检查 1 体内胆红素代谢体内胆红素代谢 肝门静脉肝门静脉O2肠管肠管衰老衰老RBC无效无效RBC生成生成其它:如其它:如Mb等等血红素血红素胆绿素胆绿素胆红素胆红素单核单核-吞噬吞噬C胆红素胆红素-清蛋白清蛋白复合物复合物(非结合(非结合胆红素)胆红素)非结合胆红素非结合胆红素葡萄糖醛酸胆红素葡萄糖醛酸胆红素(结合胆红素结合胆红素)血管血管肝肝C胆管胆管 葡萄糖醛酸胆红素葡萄糖醛酸胆红素 胆素原胆素原 一一一一 胆红素胆红素胆素胆素 粪粪 胆素原胆素原肾肾尿尿尿三胆包括:尿胆红素尿三胆包括:尿胆红素/尿胆原尿胆原/尿胆素尿胆素2 2 测定方法及评价测定方法及评价 尿尿胆红素胆红素(bilirubin)测定测定 重氮法重氮法 结合结合胆红素胆红素+二氯苯胺重氮盐二氯苯胺重氮盐 红色复合物红色复合物评价:简单评价:简单尿自动化尿自动化/灵敏度灵敏度7-14umol/L 7-14umol/L Harrison法法原理原理 胆红素胆红素+氯化钡氯化钡胆氯素(绿色)胆氯素(绿色)评价:评价:HarrisonHarrison法法-稍繁但灵敏度高稍繁但灵敏度高3 3 意义(见尿胆原意义(见尿胆原 )45酸 意 义酸酸六、六、尿胆原(尿胆原(urobilinogen,URO)定性检查定性检查1、测定方法及评价、测定方法及评价 改良改良Ehrlich法法 原理原理 URO+对二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛樱红色樱红色 干化学法干化学法 原理同上原理同上 URO+重氮化合物重氮化合物红色复合物红色复合物评价:评价:A 干化学法可半定量,不受胆红素的影响干化学法可半定量,不受胆红素的影响B改良改良Ehrlich法法 操作简便但易受干扰操作简便但易受干扰46酸2 2 意义意义 正常人及三种黄疸的胆红素检查结果正常人及三种黄疸的胆红素检查结果 47黄疸黄疸黄疸黄疸 类型类型类型类型血清胆红素血清胆红素血清胆红素血清胆红素(mol/L)(mol/L)尿检查尿检查尿检查尿检查 结合型结合型结合型结合型非结合型非结合型非结合型非结合型结合结合结合结合/非非非非结合型结合型结合型结合型 尿胆原尿胆原尿胆原尿胆原 尿胆素尿胆素尿胆素尿胆素尿胆尿胆尿胆尿胆 红素红素红素红素 正常人正常人正常人正常人0 06.8 6.8 1.710.2 1.710.2 20%20%溶血溶血溶血溶血轻度轻度轻度轻度 明显明显明显明显 20%35%35%+阻塞阻塞阻塞阻塞明显明显明显明显 轻度轻度轻度轻度 60%60%+尿胆 红素七、尿血红蛋白定性检查七、尿血红蛋白定性检查 1 测定方法及评价测定方法及评价 化学法化学法 原理原理 Hb-亚铁血红素亚铁血红素+变色变色 质控质控评价:简单评价:简单/特异性低特异性低/稳定性差稳定性差 试带法试带法 原理原理/质控质控 同上同上 评价:评价:稳定性比稳定性比好好 灵敏度灵敏度 150300g/L邻联甲苯胺 氨基比林氧化防假(+)尿含有铁/锌/碘化物/细菌产生过氧化物酶42返回返回 首页首页 金单克隆抗体法金单克隆抗体法原理原理 胶体金标记抗人胶体金标记抗人HbHb的单克隆抗体的单克隆抗体质控质控 尿中尿中H Hb过高过高 稀释稀释 免假(免假(-)评价:灵敏度高评价:灵敏度高/特异性强特异性强/操作快操作快 2 2 意义意义 正常正常 (-)(-)各种原因血管内溶血性疾病各种原因血管内溶血性疾病 因泌尿系统疾病引起的出血因泌尿系统疾病引起的出血43n n八、尿液亚硝酸盐定性检查八、尿液亚硝酸盐定性检查n n1 1、测定方法及评价、测定方法及评价n n干化学法干化学法 尿尿中具有硝酸盐还原酶的细菌增中具有硝酸盐还原酶的细菌增加时可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并将氨基苯加时可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并将氨基苯砷酸重氮化而成重氮盐,以此重氮盐再与砷酸重氮化而成重氮盐,以此重氮盐再与-萘胺偶联呈现颜色变化,颜色的深浅与亚硝酸萘胺偶联呈现颜色变化,颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比盐含量成正比。n n评价评价 灵敏度为灵敏度为0.30.30.6mg/L0.6mg/L,可用于仪器检,可用于仪器检测。测。n n湿化学法湿化学法 原理同上原理同上 评价评价 方便方便/快速快速NITNIT阳性的三个条件:阳性的三个条件:感染的病原微生物的感染的病原微生物的种类,种类,尿液滞留时间尿液滞留时间,硝酸盐的存在。硝酸盐的存在。2 2、质量控制、质量控制:使用新鲜的晨尿使用新鲜的晨尿.3 3、临床意义:该指标可作为泌尿系统感染的、临床意义:该指标可作为泌尿系统感染的的过筛试验,但的过筛试验,但NITNIT阴性不能排除感染。阴性不能排除感染。n第四节第四节 尿液其他蛋白质的检查尿液其他蛋白质的检查n n一、尿中本一、尿中本-周蛋白定性检查周蛋白定性检查n n1 1、概念、概念 本本-周蛋白是一种免疫球蛋白的周蛋白是一种免疫球蛋白的轻链单体或二聚体,属于不完全抗体球蛋轻链单体或二聚体,属于不完全抗体球蛋白,分为白,分为型和型和型。又称凝型。又称凝-溶蛋白。溶蛋白。2 测定方法及评价测定方法及评价 热沉淀热沉淀-溶解法溶解法 原理原理 尿尿+热热(40-60凝固凝固 90-100 溶解溶解)评价评价:灵敏度不高灵敏度不高 BJP300mg/L才检出才检出,必需严格控制必需严格控制PH值值(PH4.5-5.5)。对对-甲苯磺酸法甲苯磺酸法(TSA)原理原理 尿尿BJP+对对-甲苯磺酸甲苯磺酸 沉淀沉淀 评价评价:简单简单/灵敏度高灵敏度高(BJP=3mg/L),但特异,但特异性差性差(受清蛋白影响受清蛋白影响)。38 蛋白蛋白(乙酸纤维素膜乙酸纤维素膜/SDS-PAGE)电泳法电泳法 原理原理 尿蛋白尿蛋白+5+510%10%SDSSDS复合物复合物(负电负电)PAPA蛋白区带蛋白区带 评价评价:检出率达检出率达97%乙酸纤维素膜法乙酸纤维素膜法 可见可见“M”带带 免疫电泳(免疫电泳(IFP)原理原理 琼脂电泳琼脂电泳+特异抗原抗体反应特异抗原抗体反应沉淀弧沉淀弧评价:评价:简单简单/特异性强特异性强 不同抗原含量大时,不能全部显示不同抗原含量大时,不能全部显示1)尿 BJP较低时,浓缩10-50倍 2)尿Mb/溶菌酶/脂蛋白等免疫电泳43可在至 免疫固定电泳(免疫固定电泳(IFE)原理原理电泳电泳+抗原抗体反应抗原抗体反应(抗血清加于电泳后抗血清加于电泳后 区带上区带上)沉淀于固相物中沉淀于固相物中 评价评价:比比/更敏感更敏感 免疫速率散射浊度免疫速率散射浊度(IRN)原理原理 BJP+抗抗和抗和抗抗血清抗血清光散射光散射(强强 度与复合物量成正比度与复合物量成正比)评价评价:速度快速度快/灵敏灵敏/精确度高精确度高 能定量测定能定量测定和和轻链,结果可靠轻链,结果可靠光403意义意义 正常正常 (-)辅助诊断辅助诊断 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤/=2:1 巨球蛋白血症巨球蛋白血症 80%-轻链轻链 原发性肾淀粉样变原发性肾淀粉样变 70-89%单克隆蛋白单克隆蛋白预后观察预后观察:尿中大量尿中大量BJP(BJP(伴清蛋白伴清蛋白)易发肾功能不全易发肾功能不全 41二、尿液肌红蛋白定性检查二、尿液肌红蛋白定性检查n n1、概念、概念 肌红蛋白(肌红蛋白(myoglobin Mb)是存在于)是存在于横纹肌中的一种色素蛋白质,每个肌红蛋横纹肌中的一种色素蛋白质,每个肌红蛋白分子由一条蛋白肽链和一个亚铁血红素白分子由一条蛋白肽链和一个亚铁血红素组成,分子量组成,分子量1.745万,约为万,约为Hb分子量的分子量的1/4,有种属特异性,与氧可逆性结合为肌肉,有种属特异性,与氧可逆性结合为肌肉组织供能。组织供能。n n2、Mb的特性的特性 (1)Mb可自由透过肾小球形成可自由透过肾小球形成Mb尿;尿;(2)具有类似过氧化物酶的活性;)具有类似过氧化物酶的活性;(3)可被)可被100%硫酸铵沉淀而不被硫酸铵沉淀而不被80%硫酸铵沉淀,这是硫酸铵沉淀,这是Mb区别于区别于Hb的另一个特的另一个特性。性。n n3、测定方法及评价、测定方法及评价 (1)化学法)化学法 此法检查方便,敏感性较高。此法检查方便,敏感性较高。80%80%硫酸铵硫酸铵沉淀沉淀HbHb尿液尿液上清液上清液隐血试验隐血试验(2)分光光度法分光光度法 HbHb同同MbMb的一氧化碳结合的一氧化碳结合物各自吸收光谱完全不同,物各自吸收光谱完全不同,HbHb为为568nm568nm;而;而MbMb为为78nm78nm,借此可将二者区别开,但不够敏,借此可将二者区别开,但不够敏感感(30mg(30mgL)L)。此外超滤法、硫酸铵沉淀法、。此外超滤法、硫酸铵沉淀法、层析法和电泳法等,均不敏感而且影响因素层析法和电泳法等,均不敏感而且影响因素较多,未能在临床推广。较多,未能在临床推广。(3 3)单克隆抗体免疫法)单克隆抗体免疫法)单克隆抗体免疫法)单克隆抗体免疫法 是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试验又可进行尿中验又可进行尿中验又可进行尿中验又可进行尿中MbMb定量分析。尤其对急性心肌梗定量分析。尤其对急性心肌梗定量分析。尤其对急性心肌梗定量分析。尤其对急性心肌梗死的死的死的死的MbMb尿检查具有重要临床价值。尿检查具有重要临床价值。尿检查具有重要临床价值。尿检查具有重要临床价值。n n4 4、参考值、参考值、参考值、参考值 阴性阴性阴性阴性n n5 5、质量控制、质量控制、质量控制、质量控制 (1 1)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫酸铵沉淀,影响实验结果。酸铵沉淀,影响实验结果。酸铵沉淀,影响实验结果。酸铵沉淀,影响实验结果。(2 2)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微振荡,防止)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微振荡,防止)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微振荡,防止)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微振荡,防止同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。n n6 6、临床意义、临床意义、临床意义、临床意义 肌红蛋白尿见于:肌红蛋白尿见于:肌红蛋白尿见于:肌红蛋白尿见于:(1 1)大面积外伤)大面积外伤)大面积外伤)大面积外伤 如挤压伤或其它外伤造成的如挤压伤或其它外伤造成的如挤压伤或其它外伤造成的如挤压伤或其它外伤造成的肌肉组织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可肌肉组织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可肌肉组织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可肌肉组织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可引起急性肾衰竭。引起急性肾衰竭。引起急性肾衰竭。引起急性肾衰竭。(2 2)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与微循环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。微循环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。微循环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。微循环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。(3 3)其它)其它)其它)其它 原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、肌炎综合征肌炎综合征肌炎综合征肌炎综合征(多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼疮等疮等疮等疮等)、进行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。、进行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。、进行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。、进行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。三、尿液清蛋白定量测定三、尿液清蛋白定量测定 n n概述概述 清蛋白清蛋白(albumin,Alb)是血浆蛋白的是血浆蛋白的主要成分,不容易滤过肾小球,主要由近主要成分,不容易滤过肾小球,主要由近曲肾小管重吸收。早期的肾小球病变,清曲肾小管重吸收。早期的肾小球病变,清蛋白排泄率即有所增加,该指标的早期变蛋白排泄率即有所增加,该指标的早期变化能敏感地反映肾小球功能的损害。化能敏感地反映肾小球功能的损害。n n1 1、测定方法及评价、测定方法及评价 常用的检测方法有免疫分析法和化学定量法常用的检测方法有免疫分析法和化学定量法 (1 1)化学定量法)化学定量法)化学定量法)化学定量法 主要是溴甲酚绿法主要是溴甲酚绿法主要是溴甲酚绿法主要是溴甲酚绿法,该法操作,该法操作简单,试剂易得,但敏感度及特异性均较差,线简单,试剂易得,但敏感度及特异性均较差,线性范围窄,不利于检出微量清蛋白。性范围窄,不利于检出微量清蛋白。(2 2)放免法和酶免疫法)放免法和酶免疫法)放免法和酶免疫法)放免法和酶免疫法 有成品试剂盒。受实验有成品试剂盒。受实验室条件限制,尤其是放免法,有被酶免疫法及免室条件限制,尤其是放免法,有被酶免疫法及免疫比浊法取代的趋势。可根据实验室条件选择应疫比浊法取代的趋势。可根据实验室条件选择应用。用。(3 3)免疫比浊法)免疫比浊法)免疫比浊法)免疫比浊法 该法操作简便,敏感度及特该法操作简便,敏感度及特异性也较高。有商品试剂盒,可在全自动生化仪异性也较高。有商品试剂盒,可在全自动生化仪上完成实验。上完成实验。此法应注意非特异性浊度及抗原抗此法应注意非特异性浊度及抗原抗体比例的控制。体比例的控制。n n2、参考值、参考值 晨尿晨尿 6.55.1mg/L 随机尿随机尿 1.270.78mg/mmolCr 24h尿尿 5.72.6mg/24hn n3、临床意义、临床意义 肾小球发生病变可使清蛋白滤过增加,肾小球发生病变可使清蛋白滤过增加,肾小管受损影响蛋白质重吸收也会出现清肾小管受损影响蛋白质重吸收也会出现清蛋白排泄率升高。蛋白排泄率升高。(1)早期肾损害的筛检)早期肾损害的筛检 如用于糖尿病、高血压、重金属及药物中毒性肾病的早期肾损害的筛检。(2)过敏性紫癜的肾功能监测)过敏性紫癜的肾功能监测 有助于防止并发肾损害。(3)肾小球肾炎的病情观察)肾小球肾炎的病情观察 (4)其它)其它 如尿路感染、某些特发性水肿等可轻度升高。四、尿总蛋白定量测定四、尿总蛋白定量测定n n1、测定方法及评价 (1)双缩脲法)双缩脲法 是测定尿蛋白质总量的常规参考方法,本法显色稳定、重复性好,对清蛋白、球蛋白具有相同的敏感性。缺点是灵敏度低。(2)染料结合法)染料结合法 这类方法灵敏度高、操作简便快速呈色稳定。考马斯亮蓝法 邻苯三酚红钼酸络合法 丽春红S法(干扰因素少)(干扰因素少)(3)比浊法)比浊法 主要有磺基水杨酸-硫酸钠法(SSA)、三氯乙酸法(TCA)和钨酸法。(4)免疫比浊法或放射免疫法)免疫比浊法或放射免疫法 是最精密准确的方法,不但可以进行蛋白总量的测定,还能进行成分分析。(线性范围窄,受水杨酸(线性范围窄,受水杨酸 类药物和麝香草酚的干扰)类药物和麝香草酚的干扰)(受表面活性剂的干扰)(受表面活性剂的干扰)2、参考值、参考值 双缩脲法:双缩脲法:40150mg/24h尿尿 丽春红丽春红S法:法:46.518.1mg/L 考马斯亮蓝法:考马斯亮蓝法:58.6134mg/24h尿尿 3、质量控制、质量控制 (1)方法选择)方法选择 尿蛋白成分很复杂,应根尿蛋白成分很复杂,应根据蛋白成分特点,结合实验方法的灵敏度据蛋白成分特点,结合实验方法的灵敏度和线性范围选择测定方法,最好采用对清和线性范围选择测定方法,最好采用对清蛋白球蛋白同样敏感的方法。蛋白球蛋白同样敏感的方法。(2)标本要求)标本要求 应首先离心除去杂质,应首先离心除去杂质,取上清液进行蛋白定性,根据估算量和方取上清液进行蛋白定性,根据估算量和方法的敏感及线性决定样本加入量(稀释或法的敏感及线性决定样本加入量(稀释或加大标本用量,见加大标本用量,见P149)(3)尿液浓缩)尿液浓缩 标本经酸沉淀处理后应标本经酸沉淀处理后应除净上清液,谨防丢失蛋白沉淀物。除净上清液,谨防丢失蛋白沉淀物。(4)消除尿液颜色的干扰)消除尿液颜色的干扰 颜色较深的颜色较深的尿液应作样本空白对照。尿液应作样本空白对照。4、临床意义、临床意义 同尿蛋白定性试验同尿蛋白定性试验 ,优点是大,优点是大大提高了肾脏疾病的阳性检出率。大提高了肾脏疾病的阳性检出率。蛋白 定性五、五、尿尿2 2微球蛋白(微球蛋白(2 2-MG-MG)定量测定)定量测定 n n概述概述 2 2微球蛋白(微球蛋白(微球蛋白(微球蛋白(2 2-microglobulin-microglobulin,2 2-MG-MG)是机)是机)是机)是机体有核细胞产生的单链球蛋白,分子量小体有核细胞产生的单链球蛋白,分子量小体有核细胞产生的单链球蛋白,分子量小体有核细胞产生的单链球蛋白,分子量小(11800)(11800),它是人类淋巴细胞表面抗原,它是人类淋巴细胞表面抗原,它是人类淋巴细胞表面抗原,它是人类淋巴细胞表面抗原(HLA)(HLA)的的的的 链部分,链部分,链部分,链部分,由由由由100100个氨基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电个氨基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电个氨基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电个氨基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电泳时位于泳时位于泳时位于泳时位于 2 2区带而命名,生物半衰期约区带而命名,生物半衰期约区带而命名,生物半衰期约区带而命名,生物半衰期约107min107min。2 2-MG-MG广泛分布于血液、尿液和唾液及乳汁中,广泛分布于血液、尿液和唾液及乳汁中,广泛分布于血液、尿液和唾液及乳汁中,广泛分布于血液、尿液和唾液及乳汁中,可自由通过肾小球,但几乎完全被肾小管重吸收可自由通过肾小球,但几乎完全被肾小管重吸收可自由通过肾小球,但几乎完全被肾小管重吸收可自由通过肾小球,但几乎完全被肾小管重吸收并分化,故尿中排除极少。并分化,故尿中排除极少。并分化,故尿中排除极少。并分化,故尿中排除极少。n n1、测定方法及评价、测定方法及评价 主要用主要用主要用主要用放免法和酶免疫法放免法和酶免疫法放免法和酶免疫法放免法和酶免疫法测定。这两种方法测定。这两种方法测定。这两种方法测定。这两种方法敏感度和特异性均较高,但受到实验室条件限制。敏感度和特异性均较高,但受到实验室条件限制。敏感度和特异性均较高,但受到实验室条件限制。敏感度和特异性均较高,但受到实验室条件限制。免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法具有同样的敏感度及特异性,操具有同样的敏感度及特异性,操具有同样的敏感度及特异性,操具有同样的敏感度及特异性,操作简便、能直接定量而得以快速普及,在普通分作简便、能直接定量而得以快速普及,在普通分作简便、能直接定量而得以快速普及,在普通分作简便、能直接定量而得以快速普及,在普通分光光度计、紫外分光光度计及自动生化分析仪上光光度计、紫外分光光度计及自动生化分析仪上光光度计、紫外分光光度计及自动生化分析仪上光光度计、紫外分光光度计及自动生化分析仪上均适用,还可以用特种蛋白仪进行检测。均适用,还可以用特种蛋白仪进行检测。均适用,还可以用特种蛋白仪进行检测。均适用,还可以用特种蛋白仪进行检测。为了便于临床分析,应同时测定尿肌酐,以二为了便于临床分析,应同时测定尿肌酐,以二为了便于临床分析,应同时测定尿肌酐,以二为了便于临床分析,应同时测定尿肌酐,以二者的比值代表者的比值代表者的比值代表者的比值代表 2 2-MG-MG排泄率。并进行血排泄率。并进行血排泄率。并进行血排泄率。并进行血 2 2-MG-MG测定。测定。测定。测定。n n2 2、参考值、参考值、参考值、参考值 尿尿尿尿 2 2-MG0.3mg-MG0.3mg24h24h,2 2-MG-MG排泄率为排泄率为排泄率为排泄率为o.2mgo.2mg(g(g Cr)Cr)血血血血 2 2-MG0.3mg-MG0.3mgL L n n3 3、质量控制、质量控制、质量控制、质量控制 (1 1)标本处理尿中)标本处理尿中)标本处理尿中)标本处理尿中 2 2-MG-MG较不稳定,酸性尿尤其较不稳定,酸性尿尤其较不稳定,酸性尿尤其较不稳定,酸性尿尤其在在在在pH5.2pH5.2以下极易分解,因此标本采集后应立即测以下极易分解,因此标本采集后应立即测以下极易分解,因此标本采集后应立即测以下极易分解,因此标本采集后应立即测定,或将定,或将定,或将定,或将pHpH调至调至调至调至6.56.57.07.0后再冷藏保存。后再冷藏保存。后再冷藏保存。后再冷藏保存。(2 2)试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的)试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的)试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的)试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的质控样品。质控样品。质控样品。质控样品。n n4 4、临床意义临床意义临床意义临床意义 (1 1)肾小球滤过功能受损的敏感指标)肾小球滤过功能受损的敏感指标)肾小球滤过功能受损的敏感指标)肾小球滤过功能受损的敏感指标 肾小球病肾小球病肾小球病肾小球病变时,血变时,血变时,血变时,血 2 2-MG-MG升高,较肌酐等其它指标敏感。升高,较肌酐等其它指标敏感。升高,较肌酐等其它指标敏感。升高,较肌酐等其它指标敏感。(2 2)肾小管疾病的早期诊断指标)肾小管疾病的早期诊断指标)肾小管疾病的早期诊断指标)肾小管疾病的早期诊断指标 肾小管炎症、肾小管炎症、肾小管炎症、肾小管炎症、中毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受中毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受中毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受中毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受损,尿损,尿损,尿损,尿 2 2-MG-MG排出率增加;使用庆大霉素、多粘排出率增加;使用庆大霉素、多粘排出率增加;使用庆大霉素、多粘排出率增加;使用庆大霉素、多粘菌素等肾毒性药物后尿菌素等肾毒性药物后尿菌素等肾毒性药物后尿菌素等肾毒性药物后尿 2 2-MG-MG增加,提示应减量增加,提示应减量增加,提示应减量增加,提示应减量或停药。或停药。或停药。或停药。(3 3)鉴别上、下尿路感染)鉴别上、下尿路感染)鉴别上、下尿路感染)鉴别上、下尿路感染 肾盂肾炎时,肾小管肾盂肾炎时,肾小管肾盂肾炎时,肾小管肾盂肾炎时,肾小管受损受损受损受损 2 2-MG-MG增加;下尿路感染则正常。增加;下尿路感染则正常。增加;下尿路感染则正常。增加;下尿路感染则正常。(4 4)观察肾移植排斥反应)观察肾移植排斥反应)观察肾移植排斥反应)观察肾移植排斥反应 肾移植发生排斥反应肾移植发生排斥反应肾移植发生排斥反应肾移植发生排斥反应时尿时尿时尿时尿 2 2-MG-MG增加。增加。增加。增加。第五节第五节 尿液酶的检查尿液酶的检查一、尿淀粉酶测定一、尿淀粉酶测定n n淀粉酶(淀粉酶(AMY)的主要来源:)的主要来源:主要来源主要来源于胰腺(为同工酶于胰腺(为同工酶P)和唾液腺(为同工酶)和唾液腺(为同工酶S),血清中),血清中AMY易从肾脏排出。易从肾脏排出。n n1、测定方法及评价、测定方法及评价 (1)碘)碘-淀粉比色法(淀粉比色法(Somoggi 法)法)其缺点是底物难以标准化,反应不呈其缺点是底物难以标准化,反应不呈零级反应。本法应尽量使用同一批号的淀零级反应。本法应尽量使用同一批号的淀粉底物;粉底物;当当 A测定测定1/2A空白空白时,应将标本时,应将标本加大稀释倍数后再测定。加大稀释倍数后再测定。(2)2-氯氯-4硝基苯酚硝基苯酚-麦芽糖三糖法麦芽糖三糖法 (CNP-G3法)法)线性:血清线性:血清1300U/L1300U/L;尿液;尿液2500U/L0.15A/min0.15时,应将标本稀释后再测定。时,应将标本稀释后再测定。(4)免疫抑制法和电泳法)免疫抑制法和电泳法 用于同工酶测定用于同工酶测定n n2、参考值、参考值方法方法方法方法参考值(参考值(参考值(参考值(U/LU/L)血清血清血清血清尿液尿液尿液尿液Somoggi Somoggi 法法法法(3737)80018008001800100120010012004NP-7G4NP-7G法法法法(3737)10022010022012012001201200CNP-GCNP-G3 3法法法法(3737)600600300300n n3、临床意义、临床意义 (1 1)急性胰腺炎)急性胰腺炎)急性胰腺炎)急性胰腺炎 发病发病发病发病3 36h6h,血清,血清,血清,血清AMYAMY活性活性活性活性开始增高,开始增高,开始增高,开始增高,202030h30h达峰值,持续达峰值,持续达峰值,持续达峰值,持续3 35 5天恢复正常;天恢复正常;天恢复正常;天恢复正常;发病发病发病发病121224h24h,尿,尿,尿,尿AMYAMY开始升高,开始升高,开始升高,开始升高,3 31010天后恢复天后恢复天后恢复天后恢复正常。血清正常。血清正常。血清正常。血清AMYAMY同工酶同工酶同工酶同工酶P P型升高。型升高。型升高。型升高。血清血清血清血清AMYAMY主要主要主要主要用于急性胰腺炎的早期诊断,尿用于急性胰腺炎的早期诊断,尿用于急性胰腺炎的早期诊断,尿用于急性胰腺炎的早期诊断,尿AMYAMY主要用于病主要用于病主要用于病主要用于病情观察。情观察。情观察。情观察。(2 2)慢性胰腺炎)慢性胰腺炎)慢性胰腺炎)慢性胰腺炎 稳定期,各项酶指标正常,稳定期,各项酶指标正常,稳定期,各项酶指标正常,稳定期,各项酶指标正常,急性发作时急性发作时急性发作时急性发作时AMYAMY及其及其及其及其P P型同工酶均升高。型同工酶均升高。型同工酶均升高。型同工酶均升高。(3 3)其它)其它)其它)其它 胰腺癌、胰腺囊肿胰腺癌、胰腺囊肿胰腺癌、胰腺囊肿胰腺癌、胰腺囊肿AMYAMY活性重度升活性重度升活性重度升活性重度升高。卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时高。卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时高。卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时高。卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时AMYAMY也升高,也升高,也升高,也升高,但以但以但以但以S S型为主。型为主。型为主。型为主。AMYAMY在肝合成,严重肝病时降低。在肝合成,严重肝病时降低。在肝合成,严重肝病时降低。在肝合成,严重肝病时降低。概念:存在各种组织的溶酶体概念:存在各种组织的溶酶体水解酶水解酶 分子量为分子量为1414万万肾小球基膜肾小球基膜 意义:意义:正常正常 18.5U/L 18.5U/L 是肾小管损害最敏感的指标
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