蛋白质生物合成翻译和翻译后过程优质课件

蛋白质生物合成翻蛋白质生物合成翻译和翻译后过程译和翻译后过程将存在于将存在于将存在于将存在于mRNAmRNA上代表一个多肽的核苷酸残基序列转换上代表一个多肽的核苷酸残基序列转换上代表一个多肽的核苷酸残基序列转换上代表一个多肽的核苷酸残基序列转换为多肽链氨基酸残基序列的过程为多肽链氨基酸残基序列的过程为多肽链氨基酸残基序列的过程为多肽链氨基酸残基序列的过程nn氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质mRNAmRNA、tRNAtRNA、rRNArRNA酶、蛋白质因子、酶、蛋白质因子、酶、蛋白质因子、酶、蛋白质因子、ATPATP、GTPGTP翻译（翻译（Translation）蛋白质生物合成体系蛋白质生物合成体系1.三种三种三种三种RNAmRNARNAmRNA、rRNArRNA、tRNAtRNA2.2020种氨基酸（种氨基酸（种氨基酸（种氨基酸（AAAA）作为原料）作为原料）作为原料）作为原料3.酶及众多蛋白因子，如酶及众多蛋白因子，如酶及众多蛋白因子，如酶及众多蛋白因子，如IFIF、eIFeIF4.ATPATP、GTPGTP、无机离子、无机离子、无机离子、无机离子CAACAACUGCUGCAGCAGACAACAUAUUAUAUGAUGAUAAUACAACAAUUUUUUGAUGAUCAGCAGUAUUAU5533-GlnGln-Leu-Leu-GlnGln-Thr-Thr-TyrTyr-Met-Met-IleIle-Gln-Gln-PhePhe-Asp-Asp-GlnGln-Tyr-Tyr-一、生物合成的模板一、生物合成的模板mRNA遗传密码遗传密码遗传密码遗传密码(geneticcode)(geneticcode)能编码蛋白质氨基酸序列能编码蛋白质氨基酸序列能编码蛋白质氨基酸序列能编码蛋白质氨基酸序列的基因中的核苷酸体系的基因中的核苷酸体系的基因中的核苷酸体系的基因中的核苷酸体系mRNAmRNA分子上从分子上从分子上从分子上从5 5 3 3 方向，由起方向，由起方向，由起方向，由起始密码子始密码子始密码子始密码子AUGAUG开始，每开始，每开始，每开始，每3 3个核苷酸组个核苷酸组个核苷酸组个核苷酸组成的三联体，决定肽链上某一个氨成的三联体，决定肽链上某一个氨成的三联体，决定肽链上某一个氨成的三联体，决定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止信基酸或蛋白质合成的起始、终止信基酸或蛋白质合成的起始、终止信基酸或蛋白质合成的起始、终止信号，称为三联体密码。号，称为三联体密码。号，称为三联体密码。号，称为三联体密码。遗传密码遗传密码起始密码：起始密码：起始密码：起始密码：AUGAUG终止密码：终止密码：终止密码：终止密码：UAAUAA、UAGUAG、UGAUGA遗传密码的特点遗传密码的特点1.方向性：方向性：方向性：方向性：mRNAmRNA分子中遗传密码阅读的方向是分子中遗传密码阅读的方向是分子中遗传密码阅读的方向是分子中遗传密码阅读的方向是5 5 3 3 2.连续性连续性连续性连续性：mRNAmRNA的读码方向从的读码方向从的读码方向从的读码方向从5 5 33，两个密码子之，两个密码子之，两个密码子之，两个密码子之间无任何核苷酸隔开间无任何核苷酸隔开间无任何核苷酸隔开间无任何核苷酸隔开.3.兼并性兼并性兼并性兼并性：指一个氨基酸具有：指一个氨基酸具有：指一个氨基酸具有：指一个氨基酸具有2 2个或个或个或个或2 2个以上的密码子个以上的密码子个以上的密码子个以上的密码子4.摆动性摆动性摆动性摆动性：密码子与反密码子配对，有时会出现不遵从：密码子与反密码子配对，有时会出现不遵从：密码子与反密码子配对，有时会出现不遵从：密码子与反密码子配对，有时会出现不遵从碱基配对规律的情况，称为遗传密码的摆动现象碱基配对规律的情况，称为遗传密码的摆动现象碱基配对规律的情况，称为遗传密码的摆动现象碱基配对规律的情况，称为遗传密码的摆动现象5.通用性通用性通用性通用性：除个别细胞器的特殊密码子外，蛋白质生物：除个别细胞器的特殊密码子外，蛋白质生物：除个别细胞器的特殊密码子外，蛋白质生物：除个别细胞器的特殊密码子外，蛋白质生物合成的整套密码，从简单生物到人类都通用合成的整套密码，从简单生物到人类都通用合成的整套密码，从简单生物到人类都通用合成的整套密码，从简单生物到人类都通用阅读框架阅读框架(readingframes)开放阅读框开放阅读框开放阅读框开放阅读框(openreadingframe,ORF):(openreadingframe,ORF):从起始密码从起始密码从起始密码从起始密码AUGAUG到终止密码处的正确可阅读序列到终止密码处的正确可阅读序列到终止密码处的正确可阅读序列到终止密码处的正确可阅读序列原核生物原核生物mRNA的特点的特点S-DS-D序列：序列：序列：序列：原核生物原核生物原核生物原核生物mRNAmRNA起始密码起始密码起始密码起始密码AUGAUG上游上游上游上游4747核苷酸处，存核苷酸处，存核苷酸处，存核苷酸处，存在一段在一段在一段在一段5-UAAGGAGG-35-UAAGGAGG-3的保守序列，称为的保守序列，称为的保守序列，称为的保守序列，称为S-DS-D序列。是序列。是序列。是序列。是mRNAmRNA与核蛋白体识别、结合的位点与核蛋白体识别、结合的位点与核蛋白体识别、结合的位点与核蛋白体识别、结合的位点真核生物真核生物mRNA的特点的特点真核生物没有真核生物没有真核生物没有真核生物没有S-DS-D序列，序列，序列，序列，靠帽子结构识别核糖体靠帽子结构识别核糖体靠帽子结构识别核糖体靠帽子结构识别核糖体真核生物的起始密码位真核生物的起始密码位真核生物的起始密码位真核生物的起始密码位于于于于KozakKozak序列序列序列序列（CCACCCCACCAUGAUGGG）中，中，中，中，增加翻译起始的效率增加翻译起始的效率增加翻译起始的效率增加翻译起始的效率特点特点特点特点原核生物原核生物原核生物原核生物真核生物真核生物真核生物真核生物半衰期半衰期半衰期半衰期数分钟数分钟数分钟数分钟数小时数小时数小时数小时/天天天天翻译模板翻译模板翻译模板翻译模板多顺反子多顺反子多顺反子多顺反子单顺反子单顺反子单顺反子单顺反子55帽子帽子帽子帽子无无无无有，保护有，保护有，保护有，保护mRNAmRNA及蛋白合成正确起始及蛋白合成正确起始及蛋白合成正确起始及蛋白合成正确起始33尾巴尾巴尾巴尾巴无无无无polyApolyA，与，与，与，与mRNAmRNA半衰期及核到浆转运有关半衰期及核到浆转运有关半衰期及核到浆转运有关半衰期及核到浆转运有关内含子内含子内含子内含子无无无无有有有有SDSD序列序列序列序列有有有有无无无无稀有碱基稀有碱基稀有碱基稀有碱基无无无无有，但极少有，但极少有，但极少有，但极少生成方式生成方式生成方式生成方式边转录边翻译边转录边翻译边转录边翻译边转录边翻译前体前体前体前体hnRNAhnRNA修饰后转入胞质修饰后转入胞质修饰后转入胞质修饰后转入胞质原核生物与真核生物原核生物与真核生物mRNA的区别的区别二、生物合成的场所二、生物合成的场所核蛋白体核蛋白体(Ribosomes)原核生物原核生物原核生物原核生物真核生物真核生物真核生物真核生物核蛋核蛋核蛋核蛋白体白体白体白体小亚基小亚基小亚基小亚基大亚基大亚基大亚基大亚基核蛋核蛋核蛋核蛋白体白体白体白体小亚基小亚基小亚基小亚基大亚基大亚基大亚基大亚基S S70S70S30S30S50S50S80S80S40S40S60S60SrRNArRNA16S-rRNA16S-rRNA5S-rRNA5S-rRNA23S-rRNA23S-rRNA18S-rRNA18S-rRNA28S-rRNA28S-rRNA5S-rRNA5S-rRNA5.8S-rRNA5.8S-rRNA蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质rpS21rpS21种种种种rpL36rpL36种种种种rpS33rpS33种种种种rpL49rpL49种种种种核蛋白体蛋白及核蛋白体蛋白及rRNA的组成特点的组成特点原核生物核糖体亚基及位点分布原核生物核糖体亚基及位点分布1.1.容纳容纳容纳容纳mRNAmRNA的部位的部位的部位的部位2.2.结合氨基酰结合氨基酰结合氨基酰结合氨基酰tRNAtRNA的的的的A A位（受位）位（受位）位（受位）位（受位）3.3.结合肽酰结合肽酰结合肽酰结合肽酰tRNAtRNA的的的的P P位（给位）位（给位）位（给位）位（给位）4.4.tRNAtRNA排出位排出位排出位排出位E E位位位位5.5.肽基转移酶所在部位肽基转移酶所在部位肽基转移酶所在部位肽基转移酶所在部位6.6.转位酶位点转位酶位点转位酶位点转位酶位点核糖体核糖体RNA的功能的功能pp原核生物核糖体小亚基原核生物核糖体小亚基原核生物核糖体小亚基原核生物核糖体小亚基16SrRNA16SrRNA与与与与mRNAS-DmRNAS-D序列反序列反序列反序列反向互补向互补向互补向互补pp原核生物核糖体大亚基原核生物核糖体大亚基原核生物核糖体大亚基原核生物核糖体大亚基23SrRNA23SrRNA、真核生物大亚基、真核生物大亚基、真核生物大亚基、真核生物大亚基28SrRNA28SrRNA具有肽基转移酶活性具有肽基转移酶活性具有肽基转移酶活性具有肽基转移酶活性三、蛋白质合成的搬运工具三、蛋白质合成的搬运工具tRNA1.1.33端端端端CCACCA氨基酸结合位点氨基酸结合位点氨基酸结合位点氨基酸结合位点2.2.氨基酰氨基酰氨基酰氨基酰tRNAtRNA合成酶识别位点合成酶识别位点合成酶识别位点合成酶识别位点3.3.核糖体识别位点核糖体识别位点核糖体识别位点核糖体识别位点4.4.密码子识别位点（反密码子）密码子识别位点（反密码子）密码子识别位点（反密码子）密码子识别位点（反密码子）ACC氨基酸臂氨基酸臂氨基酸臂氨基酸臂反密码环反密码环氨基酸的活化与氨基酰氨基酸的活化与氨基酰-tRNA合成酶合成酶氨基酰氨基酰氨基酰氨基酰-tRNA-tRNA合成酶合成酶合成酶合成酶(aminoacyl-tRNA synthetase)(aminoacyl-tRNA synthetase)：对底物氨基酸和对底物氨基酸和对底物氨基酸和对底物氨基酸和tRNAtRNA都具有高度特异性都具有高度特异性都具有高度特异性都具有高度特异性具有校正活性，水解错配的氨基酸，加载与反密码子具有校正活性，水解错配的氨基酸，加载与反密码子具有校正活性，水解错配的氨基酸，加载与反密码子具有校正活性，水解错配的氨基酸，加载与反密码子对应的氨基酸对应的氨基酸对应的氨基酸对应的氨基酸氨基酸氨基酸+tRNA氨基酰氨基酰-tRNAATP AMPPPi氨基酰氨基酰-tRNA合成酶合成酶蛋白质合成的过程蛋白质合成的过程1.翻译起始翻译起始翻译起始翻译起始：mRNAmRNA、起始氨基酰、起始氨基酰、起始氨基酰、起始氨基酰-tRNAtRNA子在起始因子子在起始因子子在起始因子子在起始因子参与下，分别与核糖体结合形成翻译起始复合物参与下，分别与核糖体结合形成翻译起始复合物参与下，分别与核糖体结合形成翻译起始复合物参与下，分别与核糖体结合形成翻译起始复合物2.肽链的延伸肽链的延伸肽链的延伸肽链的延伸：在在在在mRNAmRNA密码序列的指导下，由特异密码序列的指导下，由特异密码序列的指导下，由特异密码序列的指导下，由特异tRNAtRNA携带相应氨基酸转运至核糖体的受位，使肽链依携带相应氨基酸转运至核糖体的受位，使肽链依携带相应氨基酸转运至核糖体的受位，使肽链依携带相应氨基酸转运至核糖体的受位，使肽链依次从次从次从次从N N端向端向端向端向C C端逐渐延伸。需要端逐渐延伸。需要端逐渐延伸。需要端逐渐延伸。需要GTPGTP及延长因子及延长因子及延长因子及延长因子3.翻译的终止翻译的终止翻译的终止翻译的终止：识别终止密码，释放肽链、：识别终止密码，释放肽链、：识别终止密码，释放肽链、：识别终止密码，释放肽链、tRNAtRNA、mRNAmRNA，核糖体大、小亚基解离，核糖体大、小亚基解离，核糖体大、小亚基解离，核糖体大、小亚基解离（一）、翻译的起始（一）、翻译的起始(initiation)核糖体小亚基结合起始氨基酰核糖体小亚基结合起始氨基酰核糖体小亚基结合起始氨基酰核糖体小亚基结合起始氨基酰-tRNAtRNA在在在在mRNAmRNA上找到合适的起始密码上找到合适的起始密码上找到合适的起始密码上找到合适的起始密码大亚基与已经形成复合物的小亚基、起始氨基酰大亚基与已经形成复合物的小亚基、起始氨基酰大亚基与已经形成复合物的小亚基、起始氨基酰大亚基与已经形成复合物的小亚基、起始氨基酰-tRNAtRNA、mRNAmRNA结合结合结合结合起始因子的参与起始因子的参与起始因子的参与起始因子的参与起始因子起始因子IF和和eIF 原核：原核：原核：原核：IF-lIF-l、2 2和和和和3 3 真核：真核：真核：真核：eIFeIF 1 1）IF-3 IF-3：结合核蛋白体：结合核蛋白体：结合核蛋白体：结合核蛋白体30S30S亚基，使大、小亚基拆离亚基，使大、小亚基拆离亚基，使大、小亚基拆离亚基，使大、小亚基拆离 2 2）IF-1IF-1：协助：协助：协助：协助IF-3IF-3结合和亚基拆离结合和亚基拆离结合和亚基拆离结合和亚基拆离 3 3）IF-2IF-2：具有：具有：具有：具有GTPaseGTPase活性，促进活性，促进活性，促进活性，促进fMet-tRNAfMet-tRNA结合结合结合结合mRNAmRNA及核蛋白体及核蛋白体及核蛋白体及核蛋白体原核生物翻译起始原核生物翻译起始1.核糖体大小亚基分离核糖体大小亚基分离核糖体大小亚基分离核糖体大小亚基分离起始因子起始因子起始因子起始因子 IF3IF3 、IF1IF1介导，利介导，利介导，利介导，利于小亚基与于小亚基与于小亚基与于小亚基与mRNAmRNA，fMet-tRNAfMetfMet-tRNAfMet结合结合结合结合2.mRNAmRNA与小亚基定位结合与小亚基定位结合与小亚基定位结合与小亚基定位结合通过通过通过通过55端端端端S-DS-D序列序列序列序列(AGGA)(AGGA)配对结合到核蛋白体小亚基上的配对结合到核蛋白体小亚基上的配对结合到核蛋白体小亚基上的配对结合到核蛋白体小亚基上的16S-rRNA16S-rRNA近近近近3-3-末端末端末端末端处处处处(UCCU)(UCCU)3.起始起始起始起始fMet-tRNAifMet-tRNAifMetfMet就位就位就位就位fMet-tRNAifMetfMet-tRNAifMet和和和和IF-2IF-2及及及及GTPGTP形成复合物形成复合物形成复合物形成复合物4.核蛋白体大亚基结合核蛋白体大亚基结合核蛋白体大亚基结合核蛋白体大亚基结合70S70S起始复合物形成起始复合物形成起始复合物形成起始复合物形成真核生物翻译起始真核生物翻译起始核糖体大小亚基分离：核糖体大小亚基分离：核糖体大小亚基分离：核糖体大小亚基分离：eIF-2BeIF-2B、eIF-3eIF-3与小亚基结合，在与小亚基结合，在与小亚基结合，在与小亚基结合，在eIF-6eIF-6参与下，使核糖体解聚为大、小亚基参与下，使核糖体解聚为大、小亚基参与下，使核糖体解聚为大、小亚基参与下，使核糖体解聚为大、小亚基Met-Met-tRNAitRNAi MetMet就位：就位：就位：就位：Met-Met-tRNAitRNAi MetMet与与与与eIF-2eIF-2、GTPGTP结合成为三结合成为三结合成为三结合成为三元复合物，在结合于小亚基元复合物，在结合于小亚基元复合物，在结合于小亚基元复合物，在结合于小亚基P P位位位位mRNAmRNA与小亚基结合：在帽结合复合物帮助下，与与小亚基结合：在帽结合复合物帮助下，与与小亚基结合：在帽结合复合物帮助下，与与小亚基结合：在帽结合复合物帮助下，与mRNAmRNA帽子帽子帽子帽子结构结合结构结合结构结合结构结合80S80S起始复合物的形成：起始复合物的形成：起始复合物的形成：起始复合物的形成：eIF-5eIF-5作用下，大亚基结合形成翻译起作用下，大亚基结合形成翻译起作用下，大亚基结合形成翻译起作用下，大亚基结合形成翻译起始复合物始复合物始复合物始复合物metmet40S40S60S60SMeMet tMetMet40S40S60S60SmRNAmRNAeIF-2BeIF-2B、eIF-3eIF-3、eIF-6elF-3elF-3GDP+Pi各种各种各种各种elFelF释放释放释放释放elF-5ATPADP+PielF4E,elF4G,elF4A,elF4B,PABMetMet-tRNAMet-tRNAi iMetMet-elF-2-elF-2-GTPGTP真核生物翻译起始复真核生物翻译起始复合物形成过程合物形成过程（二）、肽链的延伸（二）、肽链的延伸pp根据根据根据根据mRNAmRNA密码序列的指导，顺序添加的氨基酸从密码序列的指导，顺序添加的氨基酸从密码序列的指导，顺序添加的氨基酸从密码序列的指导，顺序添加的氨基酸从N N端向端向端向端向C C端延伸肽链，直到合成终止的过程端延伸肽链，直到合成终止的过程端延伸肽链，直到合成终止的过程端延伸肽链，直到合成终止的过程pp以核糖体上连续性循环式进行，又称为核糖体循环以核糖体上连续性循环式进行，又称为核糖体循环以核糖体上连续性循环式进行，又称为核糖体循环以核糖体上连续性循环式进行，又称为核糖体循环(ribosomal cycle)(ribosomal cycle)，每次循环分为，每次循环分为，每次循环分为，每次循环分为3 3个阶段：个阶段：个阶段：个阶段：进位进位进位进位(entrance)/(entrance)/注册（注册（注册（注册（registrationregistration）、成肽）、成肽）、成肽）、成肽(peptide(peptide bond formation)bond formation)、转位、转位、转位、转位(translocation)(translocation)。循环一次，循环一次，循环一次，循环一次，肽链增加一个氨基酸肽链增加一个氨基酸肽链增加一个氨基酸肽链增加一个氨基酸延伸过程所需蛋白因子延伸过程所需蛋白因子延长因子延长因子(elongation factor,EF)原核延长因子原核延长因子原核延长因子原核延长因子生物功能生物功能生物功能生物功能对应真核延长因对应真核延长因对应真核延长因对应真核延长因子子子子EF-TuEF-Tu促进氨基酰促进氨基酰促进氨基酰促进氨基酰-tRNA-tRNA进入进入进入进入A A位，结合分位，结合分位，结合分位，结合分解解解解GTPGTPEF-1-EF-1-EF-TsEF-TsGTPGTP交换蛋白，使交换蛋白，使交换蛋白，使交换蛋白，使EF-TuEF-Tu上的上的上的上的GDPGDP交交交交换成换成换成换成GTPGTPEF-1-EF-1-EFGEFG有有有有转位酶活性转位酶活性转位酶活性转位酶活性，促进，促进，促进，促进mRNA-mRNA-肽酰肽酰肽酰肽酰-tRNAtRNA由由由由A A移到移到移到移到P P位，促进卸载位，促进卸载位，促进卸载位，促进卸载tRNAtRNA释放释放释放释放EF-2EF-21.1.进位进位指根据指根据mRNA下一下一组遗传密码指导，使相组遗传密码指导，使相应氨基酰应氨基酰-tRNA进入核进入核糖体糖体A位。位。延长因子延长因子延长因子延长因子EF-TEF-T催化进位（原核生物）催化进位（原核生物）催化进位（原核生物）催化进位（原核生物）2.成肽成肽 肽基转移酶（原核肽基转移酶（原核肽基转移酶（原核肽基转移酶（原核生物中位于大亚基生物中位于大亚基生物中位于大亚基生物中位于大亚基23S 23S rRNA,rRNA,真核生物位于真核生物位于真核生物位于真核生物位于大亚基大亚基大亚基大亚基28S rRNA28S rRNA ）催化肽键形成催化肽键形成催化肽键形成催化肽键形成3.转位转位 延长因子延长因子延长因子延长因子EF-GEF-G有转位有转位有转位有转位酶活性，结合并水解酶活性，结合并水解酶活性，结合并水解酶活性，结合并水解GTPGTP，使核蛋白体向，使核蛋白体向，使核蛋白体向，使核蛋白体向mRNAmRNA的的的的33侧移动侧移动侧移动侧移动进进位位转转位位成肽成肽（三）、翻译的终止（三）、翻译的终止1.1.终止密码的辨认终止密码的辨认终止密码的辨认终止密码的辨认2.2.肽链从肽酰肽链从肽酰肽链从肽酰肽链从肽酰-tRNAtRNA水解下来。水解下来。水解下来。水解下来。3.3.mRNAmRNA从核糖体中脱离及从核糖体中脱离及从核糖体中脱离及从核糖体中脱离及大小亚基的解离大小亚基的解离大小亚基的解离大小亚基的解离4.4.终止过程需释放因子终止过程需释放因子终止过程需释放因子终止过程需释放因子(RF(RF）。）。）。）。释放因子释放因子释放因子释放因子(release factor,RF)(release factor,RF)：与肽链合成终止：与肽链合成终止：与肽链合成终止：与肽链合成终止相关的蛋白因子相关的蛋白因子相关的蛋白因子相关的蛋白因子1.1.识别终止密码，如识别终止密码，如识别终止密码，如识别终止密码，如RF-1RF-1特异识别特异识别特异识别特异识别UAAUAA、UAGUAG；而；而；而；而RF-2RF-2可可可可识别识别识别识别UAAUAA、UGAUGA2.2.诱导转肽酶改变为酯酶活性，催化肽酰基转移到诱导转肽酶改变为酯酶活性，催化肽酰基转移到诱导转肽酶改变为酯酶活性，催化肽酰基转移到诱导转肽酶改变为酯酶活性，催化肽酰基转移到-OH-OH上，上，上，上，使肽链从核蛋白体上释放。使肽链从核蛋白体上释放。使肽链从核蛋白体上释放。使肽链从核蛋白体上释放。原核生物释放因子：原核生物释放因子：原核生物释放因子：原核生物释放因子：RF-1RF-1，RF-2RF-2，RF-3 RF-3 真核生物释放因子：真核生物释放因子：真核生物释放因子：真核生物释放因子：eRF eRF 核蛋白体循环核蛋白体循环多聚核蛋白体多聚核蛋白体(polysome)1.1.细胞内一条细胞内一条细胞内一条细胞内一条mRNAmRNA链上结合着多个核糖体链上结合着多个核糖体链上结合着多个核糖体链上结合着多个核糖体2.2.每个核糖体都独立完成一条多肽链的合成每个核糖体都独立完成一条多肽链的合成每个核糖体都独立完成一条多肽链的合成每个核糖体都独立完成一条多肽链的合成 3.3.蛋白质合成高速、高效进行蛋白质合成高速、高效进行蛋白质合成高速、高效进行蛋白质合成高速、高效进行蛋白质合成与药物蛋白质合成与药物1.1.抗生素类抗生素类抗生素类抗生素类大环内酯类、氯霉素、氨基糖苷类、四环素、大环内酯类、氯霉素、氨基糖苷类、四环素、大环内酯类、氯霉素、氨基糖苷类、四环素、大环内酯类、氯霉素、氨基糖苷类、四环素、林可霉素、放线菌酮、嘌呤霉素林可霉素、放线菌酮、嘌呤霉素林可霉素、放线菌酮、嘌呤霉素林可霉素、放线菌酮、嘌呤霉素抗生素抑制蛋白质生物合成的原理抗生素抑制蛋白质生物合成的原理抗生素抗生素作用位点作用位点作用原理作用原理四环素族四环素族原核核糖体小亚基原核核糖体小亚基抑制氨基酰抑制氨基酰-tRNA与小亚基结合，妨碍与小亚基结合，妨碍氨基酰氨基酰-tRNA的进位的进位氨基糖苷类氨基糖苷类原核核糖体小亚基原核核糖体小亚基改变构象引起读码错误、抑制肽链合成改变构象引起读码错误、抑制肽链合成起始起始氯霉素、林可霉氯霉素、林可霉素素原核核糖体大亚基原核核糖体大亚基抑制肽基转移酶、阻断肽链延长抑制肽基转移酶、阻断肽链延长红霉素红霉素原核核糖体大亚基原核核糖体大亚基抑制转位酶、妨碍转位抑制转位酶、妨碍转位梭链孢酸梭链孢酸原核核糖体大亚基原核核糖体大亚基与与EFG-GTP结合，抑制肽链延长结合，抑制肽链延长放线菌酮放线菌酮真核核糖体大亚基真核核糖体大亚基抑制肽基转移酶、阻断肽链延长抑制肽基转移酶、阻断肽链延长嘌呤霉素嘌呤霉素真核、原核核糖体真核、原核核糖体氨基酰氨基酰-tRNA类似物，进位后引起未成类似物，进位后引起未成熟肽链脱落，中断肽链合成熟肽链脱落，中断肽链合成2.2.干扰素（干扰素（干扰素（干扰素（interferon,IFNinterferon,IFN）诱导诱导诱导诱导eIFeIF2 2磷酸化而失活磷酸化而失活磷酸化而失活磷酸化而失活间接活化核酸内切酶使间接活化核酸内切酶使间接活化核酸内切酶使间接活化核酸内切酶使mRNAmRNA降解降解降解降解3.3.3.3.毒素毒素毒素毒素-白喉毒素、植物毒素白喉毒素、植物毒素白喉毒素、植物毒素白喉毒素、植物毒素白喉毒素白喉毒素A亚基使辅酶亚基使辅酶I（NAD+）与真核生物延长因子）与真核生物延长因子eEF-2反应，反应，使使eEF-2失活失活蛋白质合成后的折叠与加工蛋白质合成后的折叠与加工折叠折叠折叠折叠(folding):(folding):蛋白质可凭借相互作用在细胞环境蛋白质可凭借相互作用在细胞环境蛋白质可凭借相互作用在细胞环境蛋白质可凭借相互作用在细胞环境（特定的酸碱度、温度等）下，进行自我组装（特定的酸碱度、温度等）下，进行自我组装（特定的酸碱度、温度等）下，进行自我组装（特定的酸碱度、温度等）下，进行自我组装1.蛋白质自发获得成熟的构型蛋白质自发获得成熟的构型蛋白质自发获得成熟的构型蛋白质自发获得成熟的构型自我装配自我装配自我装配自我装配2.需要辅助蛋白协助需要辅助蛋白协助需要辅助蛋白协助需要辅助蛋白协助分子伴侣、蛋白质二硫键异分子伴侣、蛋白质二硫键异分子伴侣、蛋白质二硫键异分子伴侣、蛋白质二硫键异构酶、肽构酶、肽构酶、肽构酶、肽-脯氨酰顺反异构酶脯氨酰顺反异构酶脯氨酰顺反异构酶脯氨酰顺反异构酶1.分子伴侣分子伴侣(molecularchaperones)一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质。一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质。一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质。一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质。可识别可识别可识别可识别肽链的非天然构象，促进各种功能域和整体蛋白质的正确肽链的非天然构象，促进各种功能域和整体蛋白质的正确肽链的非天然构象，促进各种功能域和整体蛋白质的正确肽链的非天然构象，促进各种功能域和整体蛋白质的正确折叠、组装及跨膜运输折叠、组装及跨膜运输折叠、组装及跨膜运输折叠、组装及跨膜运输。1.蛋白合成开始时，防止新生肽链在未完成折叠之前相蛋白合成开始时，防止新生肽链在未完成折叠之前相蛋白合成开始时，防止新生肽链在未完成折叠之前相蛋白合成开始时，防止新生肽链在未完成折叠之前相互聚合，帮助蛋白质获得最初的正确结构互聚合，帮助蛋白质获得最初的正确结构互聚合，帮助蛋白质获得最初的正确结构互聚合，帮助蛋白质获得最初的正确结构2.封闭所暴露出来的疏水区段，为蛋白质折叠创造无干封闭所暴露出来的疏水区段，为蛋白质折叠创造无干封闭所暴露出来的疏水区段，为蛋白质折叠创造无干封闭所暴露出来的疏水区段，为蛋白质折叠创造无干扰的隔离环境扰的隔离环境扰的隔离环境扰的隔离环境3.识别错误折叠的变性新蛋白，帮助复性或使其降解识别错误折叠的变性新蛋白，帮助复性或使其降解识别错误折叠的变性新蛋白，帮助复性或使其降解识别错误折叠的变性新蛋白，帮助复性或使其降解4.参与蛋白质的跨膜转运参与蛋白质的跨膜转运参与蛋白质的跨膜转运参与蛋白质的跨膜转运热休克蛋白热休克蛋白热休克蛋白热休克蛋白7070家族（家族（家族（家族（heat-shock heat-shock protein 70protein 70）：参与蛋白质的从头折叠、：参与蛋白质的从头折叠、：参与蛋白质的从头折叠、：参与蛋白质的从头折叠、跨膜运输、错误折叠多肽的降解及其调跨膜运输、错误折叠多肽的降解及其调跨膜运输、错误折叠多肽的降解及其调跨膜运输、错误折叠多肽的降解及其调控过程控过程控过程控过程热休克蛋白热休克蛋白热休克蛋白热休克蛋白6060家族家族家族家族:具有独特的双层环具有独特的双层环具有独特的双层环具有独特的双层环状结构的寡聚蛋白，以依赖状结构的寡聚蛋白，以依赖状结构的寡聚蛋白，以依赖状结构的寡聚蛋白，以依赖ATPATP的方式的方式的方式的方式为非自发性折叠蛋白质提供能折叠形成为非自发性折叠蛋白质提供能折叠形成为非自发性折叠蛋白质提供能折叠形成为非自发性折叠蛋白质提供能折叠形成天然空间构象的微环境天然空间构象的微环境天然空间构象的微环境天然空间构象的微环境分子伴侣的分类及作用分子伴侣的分类及作用2.蛋白质二硫键异构酶：蛋白质二硫键异构酶：蛋白质二硫键异构酶：蛋白质二硫键异构酶：存在于存在于存在于存在于内质网中含有巯基的酶。催化内质网中含有巯基的酶。催化内质网中含有巯基的酶。催化内质网中含有巯基的酶。催化错配的二硫键断裂并形成正确错配的二硫键断裂并形成正确错配的二硫键断裂并形成正确错配的二硫键断裂并形成正确的二硫键，最终使蛋白质形成的二硫键，最终使蛋白质形成的二硫键，最终使蛋白质形成的二硫键，最终使蛋白质形成热力学最稳定的天然构象热力学最稳定的天然构象热力学最稳定的天然构象热力学最稳定的天然构象3.肽肽肽肽-脯氨酰顺反异构酶：脯氨酰顺反异构酶：脯氨酰顺反异构酶：脯氨酰顺反异构酶：催化催化催化催化肽酰肽酰肽酰肽酰-脯氨酸的顺式与反式旋脯氨酸的顺式与反式旋脯氨酸的顺式与反式旋脯氨酸的顺式与反式旋转体的相互转变，使多肽在各转体的相互转变，使多肽在各转体的相互转变，使多肽在各转体的相互转变，使多肽在各脯氨酸弯折处形成准确折叠脯氨酸弯折处形成准确折叠脯氨酸弯折处形成准确折叠脯氨酸弯折处形成准确折叠 蛋白质合成后的加工蛋白质合成后的加工 新和成的多肽只有经过细胞内各种修饰处理后新和成的多肽只有经过细胞内各种修饰处理后才能成为有活性的成熟蛋白质才能成为有活性的成熟蛋白质翻译后加工翻译后加工1.肽链一级结构的修饰肽链一级结构的修饰肽链一级结构的修饰肽链一级结构的修饰2.肽链空间结构的修饰肽链空间结构的修饰肽链空间结构的修饰肽链空间结构的修饰3.前体蛋白的加工前体蛋白的加工前体蛋白的加工前体蛋白的加工（一）一级结构的修饰（一）一级结构的修饰新生肽链新生肽链新生肽链新生肽链N N端端端端fMetfMet或或或或MetMet的切除的切除的切除的切除特定氨基酸的共价修饰：特定氨基酸的共价修饰：特定氨基酸的共价修饰：特定氨基酸的共价修饰：甲基化、糖基化、磷酸化甲基化、糖基化、磷酸化甲基化、糖基化、磷酸化甲基化、糖基化、磷酸化及乙酰化及乙酰化及乙酰化及乙酰化二硫键的形成：二硫键的形成：二硫键的形成：二硫键的形成：通过两个半胱氨酸氧化作用生成通过两个半胱氨酸氧化作用生成通过两个半胱氨酸氧化作用生成通过两个半胱氨酸氧化作用生成多蛋白的加工：多蛋白的加工：多蛋白的加工：多蛋白的加工：一条已合成的多肽链经翻译加工后一条已合成的多肽链经翻译加工后一条已合成的多肽链经翻译加工后一条已合成的多肽链经翻译加工后生成不同活性的蛋白质或多肽生成不同活性的蛋白质或多肽生成不同活性的蛋白质或多肽生成不同活性的蛋白质或多肽前体蛋白的加工：前体蛋白的加工：前体蛋白的加工：前体蛋白的加工：切除前体蛋白的一端肽段；去除切除前体蛋白的一端肽段；去除切除前体蛋白的一端肽段；去除切除前体蛋白的一端肽段；去除蛋白内含子蛋白内含子蛋白内含子蛋白内含子（二）空间结构的修饰（二）空间结构的修饰1.亚基聚合：具有四级结构的蛋白质由亚基聚合：具有四级结构的蛋白质由亚基聚合：具有四级结构的蛋白质由亚基聚合：具有四级结构的蛋白质由2 2条以上肽链通过条以上肽链通过条以上肽链通过条以上肽链通过非共价键聚合成寡聚体。非共价键聚合成寡聚体。非共价键聚合成寡聚体。非共价键聚合成寡聚体。2.辅基连接：结合蛋白质与非蛋白部分的连接辅基连接：结合蛋白质与非蛋白部分的连接辅基连接：结合蛋白质与非蛋白部分的连接辅基连接：结合蛋白质与非蛋白部分的连接 蛋白质的转运与定位蛋白质的转运与定位1.1.1.1.核孔运输核孔运输核孔运输核孔运输胞质中合成的蛋白质穿胞质中合成的蛋白质穿胞质中合成的蛋白质穿胞质中合成的蛋白质穿过胞核内外膜形成的核孔进入细胞过胞核内外膜形成的核孔进入细胞过胞核内外膜形成的核孔进入细胞过胞核内外膜形成的核孔进入细胞核核核核2.2.2.2.跨膜运输跨膜运输跨膜运输跨膜运输胞质中合成的蛋白质进胞质中合成的蛋白质进胞质中合成的蛋白质进胞质中合成的蛋白质进入到内质网、线粒体、叶绿体和过入到内质网、线粒体、叶绿体和过入到内质网、线粒体、叶绿体和过入到内质网、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体等通过跨膜机制进行运氧化物酶体等通过跨膜机制进行运氧化物酶体等通过跨膜机制进行运氧化物酶体等通过跨膜机制进行运输的。需要消耗能量输的。需要消耗能量输的。需要消耗能量输的。需要消耗能量3.3.3.3.小泡运输小泡运输小泡运输小泡运输蛋白质从内质网转运到蛋白质从内质网转运到蛋白质从内质网转运到蛋白质从内质网转运到高尔基体以及从高尔基体转运到溶高尔基体以及从高尔基体转运到溶高尔基体以及从高尔基体转运到溶高尔基体以及从高尔基体转运到溶酶体、分泌泡、细胞质膜、细胞外酶体、分泌泡、细胞质膜、细胞外酶体、分泌泡、细胞质膜、细胞外酶体、分泌泡、细胞质膜、细胞外等是由小泡介导的等是由小泡介导的等是由小泡介导的等是由小泡介导的蛋白质运输的方式蛋白质运输的方式1.1.翻译中运输翻译中运输翻译中运输翻译中运输:由与内质网结由与内质网结由与内质网结由与内质网结合的核糖体完成。新生肽链合的核糖体完成。新生肽链合的核糖体完成。新生肽链合的核糖体完成。新生肽链在合成过程中，由信号肽引在合成过程中，由信号肽引在合成过程中，由信号肽引在合成过程中，由信号肽引导插入到内质网上的特殊通导插入到内质网上的特殊通导插入到内质网上的特殊通导插入到内质网上的特殊通道，然后转移入内腔道，然后转移入内腔道，然后转移入内腔道，然后转移入内腔 2.2.翻译后运输翻译后运输翻译后运输翻译后运输:由游离核糖体由游离核糖体由游离核糖体由游离核糖体完成。在多肽链合成后，由完成。在多肽链合成后，由完成。在多肽链合成后，由完成。在多肽链合成后，由导肽引导从细胞质转移到线导肽引导从细胞质转移到线导肽引导从细胞质转移到线导肽引导从细胞质转移到线粒体或叶绿体粒体或叶绿体粒体或叶绿体粒体或叶绿体靶向输送蛋白靶向输送蛋白靶向输送蛋白靶向输送蛋白信号序列或成分信号序列或成分信号序列或成分信号序列或成分分泌蛋白分泌蛋白分泌蛋白分泌蛋白信号肽信号肽信号肽信号肽内质网腔蛋白内质网腔蛋白内质网腔蛋白内质网腔蛋白信号肽，信号肽，信号肽，信号肽，C C端端端端-Lys-Asp-Glu-Leu-COO-Lys-Asp-Glu-Leu-COO-(KDEL(KDEL序列序列序列序列)线粒体蛋白线粒体蛋白线粒体蛋白线粒体蛋白N N端靶向序列（端靶向序列（端靶向序列（端靶向序列（20203535氨基酸残基）氨基酸残基）氨基酸残基）氨基酸残基）核蛋白核蛋白核蛋白核蛋白核定位序列（核定位序列（核定位序列（核定位序列（-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-，SV40TSV40T抗原）抗原）抗原）抗原）过氧化体蛋白过氧化体蛋白过氧化体蛋白过氧化体蛋白-Ser-Lys-Leu-Ser-Lys-Leu-（PSTPST序列）序列）序列）序列）溶酶体蛋白溶酶体蛋白溶酶体蛋白溶酶体蛋白Man-6-PMan-6-P（甘露糖（甘露糖（甘露糖（甘露糖-6-6-磷酸）磷酸）磷酸）磷酸）靶向输送蛋白的信号序列或成分靶向输送蛋白的信号序列或成分 信号肽假说信号肽假说信号肽信号肽信号肽信号肽(Signalsequence)(Signalsequence)：细胞内合成的分泌性蛋白质，：细胞内合成的分泌性蛋白质，：细胞内合成的分泌性蛋白质，：细胞内合成的分泌性蛋白质，在多肽链的在多肽链的在多肽链的在多肽链的N N端的一段保守的氨基酸序列端的一段保守的氨基酸序列端的一段保守的氨基酸序列端的一段保守的氨基酸序列 引导蛋白质转引导蛋白质转引导蛋白质转引导蛋白质转移到细胞适当的靶部位移到细胞适当的靶部位移到细胞适当的靶部位移到细胞适当的靶部位结构：约结构：约结构：约结构：约10-4010-40多个氨基酸构成，分三个区：多个氨基酸构成，分三个区：多个氨基酸构成，分三个区：多个氨基酸构成，分三个区：1.1.N N端为亲水区含碱性氨基酸端为亲水区含碱性氨基酸端为亲水区含碱性氨基酸端为亲水区含碱性氨基酸,提供正电荷提供正电荷提供正电荷提供正电荷2.2.中性或疏水性氨基酸，能够形成一段中性或疏水性氨基酸，能够形成一段中性或疏水性氨基酸，能够形成一段中性或疏水性氨基酸，能够形成一段 螺旋结构，是信号肽的主要功能区螺旋结构，是信号肽的主要功能区螺旋结构，是信号肽的主要功能区螺旋结构，是信号肽的主要功能区3.3.带负电荷的带负电荷的带负电荷的带负电荷的C C末端，含小分子氨基酸，是信号肽酶切割信号肽的部位末端，含小分子氨基酸，是信号肽酶切割信号肽的部位末端，含小分子氨基酸，是信号肽酶切割信号肽的部位末端，含小分子氨基酸，是信号肽酶切割信号肽的部位参与转运的分子参与转运的分子1.1.信号肽识别颗粒（信号肽识别颗粒（信号肽识别颗粒（信号肽识别颗粒（Signal recognition particles-SRPSignal recognition particles-SRP）：）：）：）：6 6种蛋白质与种蛋白质与种蛋白质与种蛋白质与7S-RNA7S-RNA组成复合体，有组成复合体，有组成复合体，有组成复合体，有3 3个结构域：信号肽个结构域：信号肽个结构域：信号肽个结构域：信号肽结合域、结合域、结合域、结合域、SPRSPR受体结合域、翻译停止域。受体结合域、翻译停止域。受体结合域、翻译停止域。受体结合域、翻译停止域。2.2.SRPSRP受体（受体（受体（受体（docking protein-DPdocking protein-DP）：）：）：）：SRPSRP锚定蛋白，与锚定蛋白，与锚定蛋白，与锚定蛋白，与SRPSRP结合后，解除结合后，解除结合后，解除结合后，解除SRPSRP对翻译的一致作用对翻译的一致作用对翻译的一致作用对翻译的一致作用3.3.核糖体受体：核糖体受体：核糖体受体：核糖体受体：ERER膜蛋白，结合核糖体大亚基使其与膜蛋白，结合核糖体大亚基使其与膜蛋白，结合核糖体大亚基使其与膜蛋白，结合核糖体大亚基使其与ERER膜膜膜膜稳定结合。稳定结合。稳定结合。稳定结合。4.4.肽转位复合物：多亚基跨肽转位复合物：多亚基跨肽转位复合物：多亚基跨肽转位复合物：多亚基跨ERER膜蛋白，新生肽链跨膜蛋白，新生肽链跨膜蛋白，新生肽链跨膜蛋白，新生肽链跨ERER膜的膜的膜的膜的通道通道通道通道分泌型蛋白的运输机制分泌型蛋白的运输机制1.1.编码分泌型蛋白质的编码分泌型蛋白质的编码分泌型蛋白质的编码分泌型蛋白质的mRNAmRNA与游与游与游与游离核糖体结合，蛋白合成起始离核糖体结合，蛋白合成起始离核糖体结合，蛋白合成起始离核糖体结合，蛋白合成起始2.2.合成蛋白合成蛋白合成蛋白合成蛋白N-N-端的信号肽序列端的信号肽序列端的信号肽序列端的信号肽序列3.3.信号肽序列被信号肽识别颗粒信号肽序列被信号肽识别颗粒信号肽序列被信号肽识别颗粒信号肽序列被信号肽识别颗粒SRPSRP识别，翻译暂停识别，翻译暂停识别，翻译暂停识别，翻译暂停4.4.SRP-SRP-核糖体复合物与核糖体复合物与核糖体复合物与核糖体复合物与ERER上的上的上的上的SRPSRP受体结合，多肽合成恢复受体结合，多肽合成恢复受体结合，多肽合成恢复受体结合，多肽合成恢复5.5.新生肽链通过核蛋白体受体蛋白新生肽链通过核蛋白体受体蛋白新生肽链通过核蛋白体受体蛋白新生肽链通过核蛋白体受体蛋白与蛋白转运子形成的通道进入与蛋白转运子形成的通道进入与蛋白转运子形成的通道进入与蛋白转运子形成的通道进入ERER6.6.SRPSRP释放，多肽移位到释放，多肽移位到释放，多肽移位到释放，多肽移位到ERER内腔，内腔，内腔，内腔，信号肽被酶切除信号肽被酶切除信号肽被酶切除信号肽被酶切除导肽假说导肽假说1.1.带正电荷碱性氨基酸较丰富，分散于不带电荷的氨基酸序列之间；带正电荷碱性氨基酸较丰富，分散于不带电荷的氨基酸序列之间；带正电荷碱性氨基酸较丰富，分散于不带电荷的氨基酸序列之间；带正电荷碱性氨基酸较丰富，分散于不带电荷的氨基酸序列之间；2.2.有形成两亲（亲水和疏水）有形成两亲（亲水和疏水）有形成两亲（亲水和疏水）有形成两亲（亲水和疏水）-螺旋能力。螺旋能力。螺旋能力。螺旋能力。3.3.导肽运送蛋白质时具有以下特点导肽运送蛋白质时具有以下特点导肽运送蛋白质时具有以下特点导肽运送蛋白质时具有以下特点:需要受体需要受体需要受体需要受体;消耗消耗消耗消耗ATP;ATP;需要分子伴需要分子伴需要分子伴需要分子伴侣侣侣侣;要电化学梯度驱动要电化学梯度驱动要电化学梯度驱动要电化学梯度驱动;要信号肽酶切除信号肽要信号肽酶切除信号肽要信号肽酶切除信号肽要信号肽酶切除信号肽;通过接触点进入通过接触点进入通过接触点进入通过接触点进入;非折叠形式运输非折叠形式运输非折叠形式运输非折叠形式运输 蛋白质的正向和逆向运输蛋白质的正向和逆向运输正向正向正向正向逆向逆向逆向逆向线粒体蛋白的靶向输送线粒体蛋白的靶向输送 细胞核蛋白的靶向输送细胞核蛋白的靶向输送蛋白质合成的调控蛋白质合成的调控1.1.蛋白质合成速率的调节蛋白质合成速率的调节蛋白质合成速率的调节蛋白质合成速率的调节翻译起始的调控：起始因子的调控作用、阻遏蛋白的翻译起始的调控：起始因子的调控作用、阻遏蛋白的翻译起始的调控：起始因子的调控作用、阻遏蛋白的翻译起始的调控：起始因子的调控作用、阻遏蛋白的调控作用、调控作用、调控作用、调控作用、5 5AUGAUG的调控作用、的调控作用、的调控作用、的调控作用、mRNA mRNA 55端非编码区端非编码区端非编码区端非编码区长度对翻译的影响。长度对翻译的影响。长度对翻译的影响。长度对翻译的影响。mRNAmRNA稳定性对翻译水平的影响稳定性对翻译水平的影响稳定性对翻译水平的影响稳定性对翻译水平的影响小分子小分子小分子小分子RNARNA对翻译水平的影响对翻译水平的影响对翻译水平的影响对翻译水平的影响2.2.蛋白质降解速率的调节蛋白质降解速率的调节蛋白质降解速率的调节蛋白质降解速率的调节起始因子的调控作用起始因子的调控作用eIF-4通过亚单位的可逆磷酸化对蛋白质生物合成进行调控（激通过亚单位的可逆磷酸化对蛋白质生物合成进行调控（激活）活）eIF-2的磷酸化对翻译的抑制作用的磷酸化对翻译的抑制作用阻遏蛋白的调控阻遏蛋白的调控小分子小分子RNA对翻译水平的调控对翻译水平的调控1.RNARNA干扰干扰干扰干扰(RNAiRNAi)与基因沉默与基因沉默与基因沉默与基因沉默dsRNAdsRNA的产生的产生的产生的产生dsRNAdsRNA被加工成为被加工成为被加工成为被加工成为siRNAsiRNARISCRISC装载装载装载装载siRNAsiRNARISCRISC剪切剪切剪切剪切mRNAmRNA2.微小微小微小微小RNA(miRNARNA(miRNA)与与与与RNAiRNAimiRNA(microRNA):miRNA(microRNA):由高等真核生物基因组编码、一种由高等真核生物基因组编码、一种由高等真核生物基因组编码、一种由高等真核生物基因组编码、一种小的，类似于小的，类似于小的，类似于小的，类似于siRNAsiRNA的分子。通过和靶基因的分子。通过和靶基因的分子。通过和靶基因的分子。通过和靶基因mRNAmRNA碱基碱基碱基碱基配对引导沉默复合体（配对引导沉默复合体（配对引导沉默复合体（配对引导沉默复合体（RISCRISC）降解）降解）降解）降解mRNAmRNA或阻碍其翻译。或阻碍其翻译。或阻碍其翻译。或阻碍其翻译。miRNAmiRNA基因转录产生基因转录产生基因转录产生基因转录产生pri-miRNApri-miRNA被剪切成前被剪切成前被剪切成前被剪切成前体体体体miRNA(pre-miRNA(pre-miRNAmiRNA)pre-pre-miRNAmiRNA输出到胞输出到胞输出到胞输出到胞质由质由质由质由DicerDicer加工成成熟加工成成熟加工成成熟加工成成熟miRNAmiRNA通过通过通过通过miRNAmiRNA对对对对mRNAmRNA剪切和对剪切和对剪切和对剪切和对mRNAmRNA翻译的翻译的翻译的翻译的抑制诱发基因沉默抑制诱发基因沉默抑制诱发基因沉默抑制诱发基因沉默蛋白质降解速率的调节蛋白质降解速率的调节1.不依赖不依赖不依赖不依赖ATPATP的蛋白降解：在溶酶体内进行，主要降解的蛋白降解：在溶酶体内进行，主要降解的蛋白降解：在溶酶体内进行，主要降解的蛋白降解：在溶酶体内进行，主要降解细胞外来的蛋白质、膜蛋白和长寿命的细胞内蛋白质细胞外来的蛋白质、膜蛋白和长寿命的细胞内蛋白质细胞外来的蛋白质、膜蛋白和长寿命的细胞内蛋白质细胞外来的蛋白质、膜蛋白和长寿命的细胞内蛋白质2.依赖依赖依赖依赖ATPATP和泛素的蛋白降解：在胞质中进行和泛素的蛋白降解：在胞质中进行和泛素的蛋白降解：在胞质中进行和泛素的蛋白降解：在胞质中进行