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第一篇 生物大分子的结构与功能2024/7/201生物大分子？特点：分子量较大（104），结构复杂定义：由一定的基本结构单位按一定的顺序和方式连接而成的多聚体种类：蛋白质、核酸、聚糖、聚脂2024/7/202第一章第一章 蛋白质的结构与功能蛋白质的结构与功能Structure and Function of Protein2024/7/203什么是蛋白质?蛋白质(protein，Pr)是由氨基酸组成的、具有特定空间构象和生物活性的生物大分子。2024/7/204蛋白质是生命活动的物质基础蛋白质是生命活动的物质基础含量多：含量多：湿重：约占体重的湿重：约占体重的1722%；干重：约占细胞干重：约占细胞干重干重45%种类多：种类多：一个大肠杆菌：一个大肠杆菌：3000种种一个真核细胞：数千种一个真核细胞：数千种人体内蛋白质：人体内蛋白质：10万种万种生物界：约生物界：约1百亿种百亿种分布广：分布广：所有器官、组织都含有蛋白质；所有器官、组织都含有蛋白质；细胞的各个部分都含有蛋白质细胞的各个部分都含有蛋白质2024/7/2051）作为生物催化剂）作为生物催化剂:酶酶2）代谢调节作用）代谢调节作用:激素、生长因子激素、生长因子3）免疫保护作用）免疫保护作用:免疫球蛋白免疫球蛋白4）物质的转运和存储）物质的转运和存储:血红蛋白、血浆脂蛋白血红蛋白、血浆脂蛋白5）运动与支持作用）运动与支持作用:肌肉蛋白肌肉蛋白6）参与细胞间信息传递）参与细胞间信息传递:G蛋白蛋白u特殊特殊生物学功能生物学功能u氧化供能氧化供能u参与构成各种细胞及组织参与构成各种细胞及组织功能多：功能多：蛋白质是生命活动的执行者蛋白质是生命活动的执行者2024/7/206蛋白质结构与功能蛋白质结构与功能内容内容蛋白质的分子组成蛋白质的分子组成1蛋白质的分子结构蛋白质的分子结构2蛋白质结构与功能的关系蛋白质结构与功能的关系3蛋白质的理化性质蛋白质的理化性质4蛋白质的分离纯化与结构分析蛋白质的分离纯化与结构分析52024/7/207The Molecular Component of Protein第一节第一节 蛋白质的分子组成蛋白质的分子组成2024/7/208一、蛋白质的元素组成主要有C、H、O、N和S,其次有少量的P,Fe,Cu,Zn,Mn,I,。2024/7/209各种蛋白质的各种蛋白质的含氮量很接近含氮量很接近，平均为，平均为16含氮量的测定:凯氏定氮法 蛋白质元素组成的特点100gPr含氮含氮16gPr克数克数=样品中含氮克数样品中含氮克数6.251g氮氮=6.25gPr2024/7/2010三聚氰胺(C3H6N6)2008年年“三鹿奶粉事件三鹿奶粉事件”2024/7/2011二、氨基酸(aminoacids,aa)组成蛋白质的基本单位存在自然界中的氨基酸有300余种，但参与蛋白质合成的氨基酸仅有20种，且均属L-氨基酸（甘氨酸除外）。2024/7/2012H甘氨酸甘氨酸CH3丙氨酸丙氨酸L-氨基酸的通式氨基酸的通式R2024/7/20141.碳原子上都有一个碳原子上都有一个-氨基和一个氨基和一个-羧基羧基它们都属于它们都属于-氨基酸氨基酸。2.除除甘氨酸甘氨酸外外,碳原子均为碳原子均为手性碳原子手性碳原子每一种每一种aa有两种构型：有两种构型：D-型和型和L-型。型。组成天然蛋白质的组成天然蛋白质的20种种aa，都属，都属L-型型aa。参与蛋白质合成的参与蛋白质合成的20种种aa的共同特点的共同特点:2024/7/20151.非极性脂肪族氨基酸非极性脂肪族氨基酸(6种种)2.极性中性氨基酸极性中性氨基酸(6种种)3.芳香族氨基酸芳香族氨基酸 (3种种)4.酸性氨基酸酸性氨基酸(2种种)5.碱性氨基酸碱性氨基酸(3种种)三、氨基酸的分类三、氨基酸的分类（按侧链理化性质）（按侧链理化性质）2024/7/2016(一一)非极性脂肪族氨基酸非极性脂肪族氨基酸2024/7/2017(二二)极性中性氨基酸极性中性氨基酸2024/7/2018(三三)芳香族氨基酸芳香族氨基酸苯基苯基吲哚基吲哚基酚基酚基2024/7/2019(四四)酸性氨基酸酸性氨基酸2024/7/2020(五五)碱性氨基酸碱性氨基酸咪唑基咪唑基胍基胍基2024/7/202120种氨基酸的名称及缩写代号种氨基酸的名称及缩写代号2024/7/2022根据侧链根据侧链R基团的结构基团的结构根据侧链根据侧链R基团的酸碱性基团的酸碱性酸性酸性aa碱性碱性aa中性中性aa脂肪族脂肪族aa芳香族芳香族aa杂环杂环aa杂环亚杂环亚aa其他分类方法其他分类方法2024/7/2023几种特殊氨基酸几种特殊氨基酸脯氨酸脯氨酸唯一亚氨基酸唯一亚氨基酸2024/7/2024甘氨酸甘氨酸唯一非唯一非L-氨基酸氨基酸H-CHCOO-+NH32024/7/2025含硫氨基酸：含硫氨基酸：含巯基的氨基酸：含巯基的氨基酸：含羟基的氨基酸：含羟基的氨基酸：支链氨基酸：支链氨基酸：蛋氨酸、半胱氨酸，蛋氨酸、半胱氨酸，蛋氨酸也叫蛋氨酸也叫甲硫氨酸甲硫氨酸。半胱氨酸半胱氨酸丝氨酸、苏氨酸丝氨酸、苏氨酸缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸2024/7/20261.不存在不存在Pr分子中，常以游离形式存在的氨基酸，分子中，常以游离形式存在的氨基酸，如如瓜氨酸，鸟氨酸，同型半胱氨酸、瓜氨酸，鸟氨酸，同型半胱氨酸、D-氨基酸氨基酸等等2.没有遗传密码却出现在没有遗传密码却出现在Pr分子中的氨基酸，分子中的氨基酸，羟脯羟脯氨酸，羟赖氨酸，胱氨酸氨酸，羟赖氨酸，胱氨酸等等非编码氨基酸非编码氨基酸定义：定义：参与参与Pr合成的合成的20种氨基酸种氨基酸,又称又称标准氨基酸标准氨基酸特点：特点：有各自的遗传密码有各自的遗传密码；无种属特异性；无种属特异性编码氨基酸编码氨基酸2024/7/2027+胱氨酸胱氨酸二硫键二硫键-HH2024/7/2028四、氨基酸的理化性质四、氨基酸的理化性质1.两性解离及等电点两性解离及等电点氨基酸是两性电解质，其解离方式取决氨基酸是两性电解质，其解离方式取决于所处溶液的酸碱度。于所处溶液的酸碱度。等电点等电点(isoelectricpoint,pI)氨氨基基酸酸分分子子所所带带正正、负负电电荷荷相相等等时时，溶溶液的液的pH值称为该氨基酸的值称为该氨基酸的等电点等电点。2024/7/2029pH=pI+OH-pHpI+H+OH-+H+pHpIpHpI兼性离子兼性离子 人体蛋白质，pI 5.0在人体体液pH7.4的环境下，带负电荷2024/7/20156（二）蛋白质的紫外吸收（二）蛋白质的紫外吸收由由于于蛋蛋白白质质分分子子中中含含有有共共轭轭双双键键的的色色氨氨酸酸、酪酪氨氨酸酸和和苯苯丙丙氨氨酸酸，因因此此在在280nm波波长长处处有有特特征征性性吸吸收收峰峰。蛋蛋白白质质的的OD280与与其其浓浓度度呈呈正正比比关关系，因此可作系，因此可作蛋白质定量测定蛋白质定量测定。2024/7/20157（三）蛋白质的呈色反应（三）蛋白质的呈色反应茚三酮反应茚三酮反应(ninhydrinreaction)蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。酮反应。双缩脲反应双缩脲反应(biuretreaction)蛋白质和多肽分子中蛋白质和多肽分子中肽键肽键在稀碱溶液中与在稀碱溶液中与硫酸铜共热，生成紫红色的蛋白质硫酸铜共热，生成紫红色的蛋白质-Cu2+复合物，复合物，此反应称为双缩脲反应。此反应称为双缩脲反应。2024/7/20158在双缩脲反应的基础上，生成的蛋白质在双缩脲反应的基础上，生成的蛋白质-Cu2+复合物中所含的复合物中所含的酪氨酸酚基酪氨酸酚基与与Folin-酚试剂酚试剂(磷钼酸和磷钨酸化合物磷钼酸和磷钨酸化合物)反应，生产蓝色的化合反应，生产蓝色的化合物物(钼蓝和钨蓝的混合物钼蓝和钨蓝的混合物)。3.Folin酚试剂法酚试剂法(Lowrys法法)2024/7/20159（四）蛋白质的胶体性质（四）蛋白质的胶体性质蛋蛋白白质质分分子子的的直直径径可可达达1100nm，为胶粒范围之内。，为胶粒范围之内。蛋白质胶体稳定的因素蛋白质胶体稳定的因素:水化膜水化膜颗粒表面电荷颗粒表面电荷2024/7/20161+带正电荷的蛋白质带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质在等电点的蛋白质水化膜水化膜+带正电荷的蛋白质带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒不稳定的蛋白质颗粒酸酸碱碱酸酸碱碱酸酸碱碱脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用溶液中蛋白质的聚沉溶液中蛋白质的聚沉去水化膜，去电荷去水化膜，去电荷2024/7/20162（五）蛋白质的变性、沉淀和凝固（五）蛋白质的变性、沉淀和凝固在某些在某些物理和化学因素作用物理和化学因素作用下，蛋白下，蛋白质特定的质特定的空间构象被破坏空间构象被破坏，从而导致其，从而导致其理理化性质改变和生物活性的丧失化性质改变和生物活性的丧失。*蛋白质的变性蛋白质的变性(denaturation)概念概念2024/7/20164 吴宪教授1931年：“天然蛋白质分子借助次级键连接而成一种紧密、有规则的空间结构，变性作用使次级键破坏从而使结构松散”。“Studies on Denaturation of Proteins.XA Theory of Denaturation.Chinese journal of Physiology，1931，5(4)：321344”。蛋白质研究领域内国际上最具有权威的综述蛋白质研究领域内国际上最具有权威的综述性丛书性丛书AdvancesinProteinChemistry第第47卷（卷（1995年）发表了美国哈佛大学教授、年）发表了美国哈佛大学教授、蛋白质研究的老前辈蛋白质研究的老前辈J.T.Eddsall的文章的文章“吴吴宪与第一个蛋白质变性理论（宪与第一个蛋白质变性理论（1931）HsienWuandthefirstTheoryofProteinDenaturation(1931)”，对吴宪教授的学术成，对吴宪教授的学术成就给予了极高的评价。该卷还就给予了极高的评价。该卷还重新刊登了吴重新刊登了吴宪教授六十四年前关于蛋白质变性的论文。宪教授六十四年前关于蛋白质变性的论文。一篇在一篇在1931年发表的论文居然在年发表的论文居然在1995年仍然年仍然值得在第一流的丛书上重新全文刊登，不能值得在第一流的丛书上重新全文刊登，不能不说是国际科学界的一件极为罕见的大事。不说是国际科学界的一件极为罕见的大事。蛋白质变性理论蛋白质变性理论2024/7/20165造成变性的因素造成变性的因素1）物理因素：物理因素：高温、高压、射线、振荡等高温、高压、射线、振荡等2）化学因素：化学因素：强酸、强碱、重金属盐、生强酸、强碱、重金属盐、生物碱试剂、尿素、有机溶剂等物碱试剂、尿素、有机溶剂等 变性的本质变性的本质破坏蛋白质空间结构破坏蛋白质空间结构（非共价键和二硫键），（非共价键和二硫键），不改变蛋白质的一级结构不改变蛋白质的一级结构（肽键、分子组成、（肽键、分子组成、分子量不变）。分子量不变）。2024/7/20166变性后的表现：变性后的表现：v生物活性丧失生物活性丧失v理化性质改变理化性质改变溶解度降低溶解度降低粘度增加粘度增加结晶能力消失结晶能力消失易被蛋白酶水解易被蛋白酶水解2024/7/20167防止变性防止变性：低温保存生物制品：低温保存生物制品应用举例应用举例利用变性利用变性：酒精消毒、高压灭菌：酒精消毒、高压灭菌取代变性取代变性：乳品解毒：乳品解毒(用于急救重金属中毒用于急救重金属中毒)2024/7/20168变性与复性变性与复性(renaturation)变性变性可逆变性：可逆变性：Pr变性后如将变性剂除去，该变性后如将变性剂除去，该Pr分子的分子的天然构象和生物学活性还天然构象和生物学活性还能恢复能恢复。不可逆变性：不可逆变性：若变性条件强烈，作用时间长，构象若变性条件强烈，作用时间长，构象变化大，理化性质变化大，理化性质难以恢复难以恢复。复性复性2024/7/20169在在一一定定条条件件下下，蛋蛋白白疏疏水水侧侧链链暴暴露露在在外外，肽肽链链融融会会相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。凡凡是是能能消消除除蛋蛋白白质质表表面面的的水水化化膜膜并并中中和和电电荷荷的的试试剂剂均可以引起蛋白质的沉淀。均可以引起蛋白质的沉淀。常常用用的的有有中中性性盐盐、有有机机溶溶剂剂、某某些些生生物物碱碱试试剂剂、某某些酸类及重金属盐类等。些酸类及重金属盐类等。变变性性的的蛋蛋白白质质易易于于沉沉淀淀，有有时时蛋蛋白白质质发发生生沉沉淀淀，但但并不变性。并不变性。*蛋白质沉淀蛋白质沉淀2024/7/20170蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块，此凝块不易再溶于强酸和强碱中。固的凝块，此凝块不易再溶于强酸和强碱中。凝固是蛋白质变性后进一步发展的不可逆凝固是蛋白质变性后进一步发展的不可逆的结果。所以凝固的蛋白质一定变性、沉淀。的结果。所以凝固的蛋白质一定变性、沉淀。*蛋白质的凝固作用蛋白质的凝固作用(proteincoagulation)2024/7/20171变性变性物理因素：加热、紫外线照射、超声、剧烈震荡等物理因素：加热、紫外线照射、超声、剧烈震荡等化学因素：强酸、强碱、有机溶剂、重金属盐等化学因素：强酸、强碱、有机溶剂、重金属盐等沉淀沉淀改变改变pHpH至至pIpI破坏水溶液中蛋白质破坏水溶液中蛋白质的水化膜和中和电荷的水化膜和中和电荷（变性蛋白质变性蛋白质）（蛋白质未变性）（蛋白质未变性）凝固凝固加热加热（变性，不再溶解）（变性，不再溶解）变性不一定沉淀变性不一定沉淀沉淀不一定变性沉淀不一定变性凝固则一定变性、沉淀凝固则一定变性、沉淀加热加热2024/7/20173第五节第五节 蛋白质的分离纯蛋白质的分离纯化与结构分析化与结构分析The Separation and Purification and Structure Analysis of Protein2024/7/20174分离纯化蛋白质的一般程序材料的预处理及细胞破碎通常选择适当的缓冲液抽提蛋白质蛋白质粗制品的获得进一步分离纯化获得蛋白纯品提提取取2024/7/20175*蛋白质的分离和纯化的依据蛋白质的分离和纯化的依据n溶解度溶解度n分子大小分子大小n电荷电荷n吸附性质等吸附性质等蛋白质理化性质的差异蛋白质理化性质的差异2024/7/20176 蛋白质的理化性质与常用的分离纯化方法蛋白质的理化性质与常用的分离纯化方法蛋白质的理化性质常用的纯化方法分子质量透析、超滤凝胶层析离心溶解度调整pH调整离子强度降低介电常数电荷电泳等电聚焦离子交换层析特异结合性质亲和层析其他性质吸附层析液相层析气相层析2024/7/20177一一、超速离心超速离心(ultracentrifugation)*利利用用机机械械的的快快速速旋旋转转所所产产生生的的离离心心力力，将将不不同的物质进行分离同的物质进行分离*蛋蛋 白白 质质 在在 离离 心心 场场 中中 的的 行行 为为 用用 沉沉 降降 系系 数数(sedimentation coefficient,S)表表示示。因因为为沉沉降降系系数数S大大体体上上和和分分子子量量成成正正比比关关系系，故故应应用用超超速速离离心心法法既既可可以以用用来来分分离离纯纯化化蛋蛋白白质也可以用作测定质也可以用作测定蛋白质的分子量蛋白质的分子量。2024/7/201782024/7/20179u盐析法盐析法u有机溶剂沉淀法有机溶剂沉淀法二二、沉淀沉淀（precipitation）2024/7/20180盐析法盐析法定 义：加入大量中性盐以破坏Pr的稳定因素并 使从溶液中沉淀析出的现象。原 理:破坏Pr两个稳定因素：水化膜和电荷层中性盐：(NH4)2SO4；Na2SO4；NaCl等优 点：Pr不变性，常用2024/7/20181试剂：丙酮、乙醇、甲醇等亲水溶剂原理：与H2O结合，破坏水化层优点：分辨率优于盐析法，能使某一Pr在狭小有机溶剂 浓度范围内沉淀。缺点：易使Pr变性应用：pI沉淀Pr。调节溶液pH到某Pr的pI，加上丙酮 破坏水化膜，Pr沉淀。注意：防止Pr在分离过程中发生变性：04 下进行；有机溶剂浓度不能太高，Pr沉淀后立即分离有机溶剂沉淀法有机溶剂沉淀法2024/7/20182*免疫沉淀法：免疫沉淀法：将某一纯化蛋白质免疫动物将某一纯化蛋白质免疫动物可获得抗该蛋白的特异抗体。利用特异抗可获得抗该蛋白的特异抗体。利用特异抗体识别相应的抗原蛋白，并形成抗原抗体体识别相应的抗原蛋白，并形成抗原抗体复合物的性质，可从蛋白质混合溶液中分复合物的性质，可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。离获得抗原蛋白。免疫沉淀法：免疫沉淀法：2024/7/20183三、透析及超滤法三、透析及超滤法*透析透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。分开的方法。2024/7/20184人工肾人工肾血液透析图血液透析图2024/7/20185超滤（超滤（ultrafiltration）在一定的压力下，使蛋白质溶液在通过一定孔径的在一定的压力下，使蛋白质溶液在通过一定孔径的超滤膜时，小分子量物质滤过，而大分子量的蛋白质被超滤膜时，小分子量物质滤过，而大分子量的蛋白质被截留，从而达到分离纯化的目的。截留，从而达到分离纯化的目的。磁力搅拌器磁力搅拌器待超滤的蛋白质溶液待超滤的蛋白质溶液加压的氮气加压的氮气超滤膜超滤膜2024/7/20186四四、电泳（电泳（electrophoresis）定义：带电粒子在电场中向着与其电性相反的电极移动的现象。u Pr分子在溶液中可带净的负电荷或带净的正电荷，故可在电场中发生移动。u 不同的蛋白质分子所带电荷量不同，且分子大小也不同，故在电场中的泳动速度也不同，由此可彼此分离。2024/7/20187几种重要的蛋白质电泳几种重要的蛋白质电泳*SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE)常用于蛋白质分子量的测定。常用于蛋白质分子量的测定。*等电聚焦电泳等电聚焦电泳通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。电泳方法。*双向凝胶电泳双向凝胶电泳蛋白质组学研究的重要技术。蛋白质组学研究的重要技术。2024/7/20188SDS-PAGE2024/7/201892024/7/20190等电聚焦（等电聚焦（isoelectricfocusing,IEF）+(H2SO4)(NaOH)pH3pH10+(H2SO4)(NaOH)pI4.55.16.07.98.1pH3pH102024/7/20191等电聚胶电泳等电聚胶电泳2024/7/20192双向电泳（twodimensionalelectrophoresis）IEFSDS-PAGE2024/7/20193双向电泳（twodimensionalelectrophoresis）2024/7/201942024/7/20195五五、层析层析层析层析(chromatography)分离蛋白质的原理分离蛋白质的原理待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物质（固定相）时，根据溶液中待分离的蛋态物质（固定相）时，根据溶液中待分离的蛋白质白质颗粒大小、电荷多少及亲和力颗粒大小、电荷多少及亲和力等，使待分等，使待分离的蛋白质组分在两相中反复分配，并以不同离的蛋白质组分在两相中反复分配，并以不同速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的。速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的。2024/7/20196组分组分A组分组分B固定相固定相吸附吸附结合等结合等+流动相流动相解除上解除上述作用述作用反反复复进进行行组分组分A组分组分B移动速度不同移动速度不同层析的基本过程层析的基本过程2024/7/20197蛋白质分离常用的层析方法蛋白质分离常用的层析方法*离子交换层析：离子交换层析：利用各蛋白质的利用各蛋白质的电荷量及性电荷量及性质质不同进行分离。不同进行分离。*凝胶过滤凝胶过滤(gelfiltration)又称分子筛层析又称分子筛层析，利利用各蛋白质用各蛋白质分子大小分子大小不同分离。不同分离。2024/7/20198离子交换层析离子交换层析2024/7/20199凝胶过滤凝胶过滤大分子先洗脱下来大分子先洗脱下来小分子后洗脱下来小分子后洗脱下来2024/7/20200COOHH2NCNCNCNCN分析残基组成分析残基组成Edman降解法降解法排列组合计算排列组合计算六、多肽链中氨基酸序列分析六、多肽链中氨基酸序列分析2024/7/202042024/7/202052024/7/20206通过核酸来推演蛋白质中的氨基酸序列通过核酸来推演蛋白质中的氨基酸序列按照三联密码的原则推演出氨基酸的序列按照三联密码的原则推演出氨基酸的序列分离编码蛋白质的基因分离编码蛋白质的基因测定测定DNA序列序列排列出排列出mRNA序列序列2024/7/20207七、蛋白质空间结构测定七、蛋白质空间结构测定*二级结构测定二级结构测定通通常常采采用用圆圆二二色色光光谱谱(circulardichroism，CD)测定溶液状态下的蛋白质二级结构含量。测定溶液状态下的蛋白质二级结构含量。*三级结构测定三级结构测定X射射线线衍衍射射法法(X-raydiffraction)和和核核磁磁共共振振技技术术(nuclearmagneticresonance,NMR)是是研究蛋白质三维空间结构最准确的方法。研究蛋白质三维空间结构最准确的方法。2024/7/20208八、蛋白质组学八、蛋白质组学（一）蛋白质组学基本概念（一）蛋白质组学基本概念蛋白质组蛋白质组是指一种细胞或一种生物所表是指一种细胞或一种生物所表达的全部蛋白质，即达的全部蛋白质，即“一种基因组所表达的一种基因组所表达的全套蛋白质全套蛋白质”。2024/7/20210蛋白质组研究内容（1）蛋白质表达谱（2）蛋白质翻译后修饰（3）细胞定位（4）蛋白质相互作用（5）蛋白质生物信息学研究（6）蛋白质结构解析2024/7/20211小小结结掌握掌握1.蛋白质的元素组成特点，氨基酸的结构通式、氨基酸的蛋白质的元素组成特点，氨基酸的结构通式、氨基酸的分类、三字英文缩写符号。分类、三字英文缩写符号。2.蛋白质一、二、三、四级结构的概念及其主要的化学键。蛋白质一、二、三、四级结构的概念及其主要的化学键。3.蛋白质二级结构的形式及蛋白质二级结构的形式及-螺旋，螺旋，-折叠的结构特点折叠的结构特点4.蛋白质的结构与功能的关系。蛋白质的结构与功能的关系。5.蛋白质的理化性质：两性电离，胶体性质，蛋白质变性蛋白质的理化性质：两性电离，胶体性质，蛋白质变性的概念和意义，紫外吸收和呈色反应。的概念和意义，紫外吸收和呈色反应。2024/7/20213熟悉熟悉1.肽肽、肽肽键键与与肽肽链链的的概概念念，多多肽肽链链的的写写法法。生生物物活活性性肽的概念。肽的概念。2.肽单元概念、模体、分子伴侣的概念。肽单元概念、模体、分子伴侣的概念。3.结构域的概念。结构域的概念。4.蛋白质的分类。蛋白质的分类。5.蛋蛋白白质质的的沉沉淀淀，等等电电点点沉沉淀淀，凝凝胶胶过过滤滤，超超过过滤滤和和超速离心。超速离心。6.蛋蛋白白质质分分离离和和纯纯化化技技术术：盐盐析析、电电泳泳和和分分子子筛筛的的原原理。理。2024/7/202141、重要名词：、重要名词：氨基酸残基氨基酸残基 变构效应变构效应 等电点等电点 蛋白质的变性蛋白质的变性 分子伴侣分子伴侣 模体模体 锌指结构锌指结构 结构域结构域 分子病分子病 亚基亚基 2、结构层次、结构层次n元素组成：元素组成：C、H、O、N（16%）、）、Sn结构单位：结构单位：20种种L-氨基酸氨基酸n一级结构：肽键；多肽链一级结构：肽键；多肽链N端端C端端n二级结构：稳定力（氢键）；类型（二级结构：稳定力（氢键）；类型（螺旋，螺旋，折叠，折叠，转角，无规卷曲）转角，无规卷曲）n三级结构三级结构n四级结构四级结构3、结构与功能关系、结构与功能关系（举例）（举例）4、重要性质：、重要性质：等电点及带电状态判定；胶体性质；紫外吸收；变性等电点及带电状态判定；胶体性质；紫外吸收；变性5、分离纯化：、分离纯化：透析；盐析；丙酮沉淀；电泳；离子交换层析；分子筛透析；盐析；丙酮沉淀；电泳；离子交换层析；分子筛本章小结本章小结2024/7/202151.试述蛋白质试述蛋白质 螺旋、螺旋、折叠的结构特点。折叠的结构特点。2.试比较蛋白质的一、二、三、四级结构及维持其稳定试比较蛋白质的一、二、三、四级结构及维持其稳定的化学键的化学键。3.试举例说明蛋白质（一级试举例说明蛋白质（一级/高级）结构与功能的关系。高级）结构与功能的关系。4.试区别蛋白质的变性和变构试区别蛋白质的变性和变构。5.蛋白质定量测定的方法有哪些？蛋白质定量测定的方法有哪些？问答题问答题2024/7/202161天然蛋白质中不存在的氨基酸是天然蛋白质中不存在的氨基酸是A蛋氨酸蛋氨酸B胱氨酸胱氨酸C羟脯氨酸羟脯氨酸D同型半胱氨酸同型半胱氨酸E精氨酸精氨酸2下列哪种氨基酸在肽链中形成拐角下列哪种氨基酸在肽链中形成拐角A缬氨酸缬氨酸B酪氨酸酪氨酸C脯氨酸脯氨酸D苏氨酸苏氨酸E色氨酸色氨酸3下列有关蛋白质下列有关蛋白质折叠结构的叙述正确的是折叠结构的叙述正确的是A.主链骨架呈锯齿状主链骨架呈锯齿状B.两个相邻的肽平面呈折纸状两个相邻的肽平面呈折纸状C.折叠结构是一种较伸展的肽链结构折叠结构是一种较伸展的肽链结构D.若干矩齿状肽链骨架平行或反平行排列，链间靠氢键维系若干矩齿状肽链骨架平行或反平行排列，链间靠氢键维系E.以上都正确以上都正确2024/7/202194.有关血红蛋白有关血红蛋白(Hb)和肌红蛋白和肌红蛋白(Mb)的叙述不正确的是的叙述不正确的是A.都可以和氧结合都可以和氧结合B.Hb和和Mb都含铁都含铁C.都是含辅基的结合蛋白都是含辅基的结合蛋白D.都具有四级结构形式都具有四级结构形式E.都属于色蛋白类都属于色蛋白类5有一血清清蛋白有一血清清蛋白(pI6.85)的混合物，在哪种条件下电泳分的混合物，在哪种条件下电泳分离效果最好离效果最好?A.pH4.9B.pH5.9C.pH6.5D.pH8.6E.pH3.52024/7/20220
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