石油污染土壤专题ppt课件

籍国东籍国东(InsituBioremediationoftheSoilContaminatedbyPetroleumHydrocarbons)籍国东(InsituBioremediationof1当当今今世世界界,石石油油已已成成为为人人类类最最主主要要的的能能源源之之一一，大大量量的的石石油油及及其其加加工工品品进进入入土土壤壤，造造成成土土壤壤的的石石油油污污染染，给给人人类类乃乃至至整整个个生生物物圈圈带带来来危危害害，从从而而成成为为世世界界性性的的环环境境问问题题。在在对对石石油油污污染染治治理理的的研研究究中中，生生物物修修复复作作为为一一项项潜潜在在的的高高效效、低低成成本本的的清清洁洁技技术术正正日日益益受受到到重重视视。近近十十余余年年来来，国国际际上上对对生生物物修修复复的的研研究究更更加加活活跃跃，有有些些国国家家已已将将此此技技术术用用于于污污染染土土壤壤的的实实际际修修复复，并并取取得得了了显显著著的的成成果。果。前前言言当今世界,石油已成为人类最主要的能源之一，大量的2是指原油和石油产品在开采、运输、是指原油和石油产品在开采、运输、储存以及使用过程中，进入到土壤环境，储存以及使用过程中，进入到土壤环境，其数量和速度超过土壤的自净作用的速其数量和速度超过土壤的自净作用的速度，打破了它在土壤环境中的自然动态度，打破了它在土壤环境中的自然动态平衡，使其累积过程占据优势，导致土平衡，使其累积过程占据优势，导致土壤环境正常功能的失调和土壤质量的下壤环境正常功能的失调和土壤质量的下降，并通过食物链，最终影响到人类健降，并通过食物链，最终影响到人类健康的现象。康的现象。1.土壤的石油污染土壤的石油污染是指原油和石油产品在开采、运输、储存以及使用过31.1土壤石油污染来源主要包括土壤石油污染来源主要包括l溢油和泄漏；溢油和泄漏；l污水灌溉；污水灌溉；l油页岩矿渣堆放；油页岩矿渣堆放；l大气沉降；大气沉降；l药剂等的施用。药剂等的施用。1.1土壤石油污染来源主要包括溢油和泄漏；41.2石油污染土壤的影响危害石油污染土壤的影响危害l对土壤理化性质的影响；对土壤理化性质的影响；l对土壤微生物的影响；对土壤微生物的影响；l对土壤酶的影响；对土壤酶的影响；l对农作物的影响。对农作物的影响。1.2石油污染土壤的影响危害对土壤理化性质的影响；5国际上对生物修复的研究十分活跃，国际上对生物修复的研究十分活跃，有些国家已将此技术用于污染土壤的实有些国家已将此技术用于污染土壤的实际修复，其中生物修复在治理有机污染际修复，其中生物修复在治理有机污染土壤方面发展很快，其关注的焦点是污土壤方面发展很快，其关注的焦点是污染的现场，而该类技术都以生物修复染的现场，而该类技术都以生物修复(bioremediation，也称为生物补救，也称为生物补救)这这一术语为核心展开。一术语为核心展开。2生物修复生物修复国际上对生物修复的研究十分活跃，有些国家62.1生物修复的概念生物修复的概念 生物修复生物修复(Bioremediation)，Madsen E.L(1991)将其解释为：生物特别是微生物催化将其解释为：生物特别是微生物催化降解有机污染物，从而修复被污染环境或消除环降解有机污染物，从而修复被污染环境或消除环境中的污染物的一个受控或自发进行的过程。境中的污染物的一个受控或自发进行的过程。相同的表达有：相同的表达有：生物再生生物再生(Bioreclamation)、生物恢复生物恢复(Biorestoration)、生物消除生物消除(Bioelimination)。2.1生物修复的概念相同的表达有：生物再生(Biorecla72.2生物修复的主要类型生物修复的主要类型l原位生物修复原位生物修复(In Situ Bioremediation)(In Situ Bioremediation)指受污染的土壤不做搬运或输送而在原位污染地指受污染的土壤不做搬运或输送而在原位污染地进行的生物修复处理，其恢复过程主要依赖于被污进行的生物修复处理，其恢复过程主要依赖于被污染地自身微生物的自然降解能力和人为创造的合适染地自身微生物的自然降解能力和人为创造的合适降解条件。降解条件。l异位生物修复异位生物修复(Ex-situ Bioremediation)(Ex-situ Bioremediation)指将受污染的土壤，搬动或输送到它处进行的生指将受污染的土壤，搬动或输送到它处进行的生 物修复处理，这里的搬动和输送是有一定限度的，物修复处理，这里的搬动和输送是有一定限度的，而且更强调人为控制和创造更加优化的降解环境。而且更强调人为控制和创造更加优化的降解环境。2.2生物修复的主要类型原位生物修复(InSituBi82.2.1处处理理工工艺艺原位处理工艺：原位处理工艺：1.泵处理泵处理P/T工艺工艺(Pump/Treatment)；2.2.生物通气工艺生物通气工艺(Bioventing)(Bioventing)；3.3.渗滤工艺渗滤工艺(Percolation)(Percolation)；4.4.空气扩散工艺空气扩散工艺(diffusing)(diffusing)2.2.1处理工艺原位处理工艺：9异位处理工艺：异位处理工艺：1.1.土地耕作工艺土地耕作工艺 (land-farming)(land-farming)；2.2.预制床工艺；预制床工艺；(Prepared bed)(Prepared bed)3.3.堆腐修复堆腐修复(composting)(composting)工艺；工艺；4.4.反应器处理工艺反应器处理工艺(Bioreactor)(Bioreactor)。异位处理工艺：10在处理位置上：在处理位置上：原位修复强调污染物存在的初始空原位修复强调污染物存在的初始空 间分布；间分布；异位修复则稍作迁移。异位修复则稍作迁移。在处理过程中：在处理过程中：异位修复比原位修复有更多的人为异位修复比原位修复有更多的人为 调控和优化处理调控和优化处理原位修复与异位修复的差别原位修复与异位修复的差别在处理位置上：原位修复与异位修复的差别113.石油污染土壤的原位生物修复石油污染土壤的原位生物修复（ISB）原原位位处处理理简简单单，经经济济，但但处处理理时时间间长长。在在长长期期的的处处理理过过程程中中，污污染染物物可可能能会会扩扩散散到到深深层层土土壤壤和和地地下下水水中中，因因而而该该技技术术适适用用的的对对象象为为被被污污染染时时间间较较长长且且情情况况已已经经基基本本稳稳定的土壤或面积广阔的区域。定的土壤或面积广阔的区域。3.石油污染土壤的原位生物修复（ISB）12(1)工工艺艺路路线线和和处处理理过过程程相相对对简简单单，不不需需要要复复杂的设备；杂的设备；(2)处理费用较低；处理费用较低；(3)被被处处理理土土壤壤不不需需要要搬搬运运，对对周周围围环环境境影影响响小，生态风险小。小，生态风险小。3.1 原位生物修复原位生物修复(ISB)的特点是：的特点是：(1)工艺路线和处理过程相对简单，不需要复杂的设备；3.113（1）存在具有代谢活性的微生物；存在具有代谢活性的微生物；（2）有较大的降解速率，并能将污染物浓度降低到有较大的降解速率，并能将污染物浓度降低到符合环保标准；符合环保标准；（3）过程中生成的中间产物必须没有毒性；过程中生成的中间产物必须没有毒性；（4）污染场地必须不含对降解菌种有抑制作用的物污染场地必须不含对降解菌种有抑制作用的物质，否则需要先行稀释或将该抑制剂无害化；质，否则需要先行稀释或将该抑制剂无害化；（5）污染物必须能够被微生物利用；污染物必须能够被微生物利用；（6）污染场地的条件必须有利于微生物生长并保持污染场地的条件必须有利于微生物生长并保持活性，例如，适宜的温度、湿度等；活性，例如，适宜的温度、湿度等；（7）技术费用必须尽可能低。技术费用必须尽可能低。3.2ISB的前提条件的前提条件（1）存在具有代谢活性的微生物；3.2ISB的前提条件14l微生物修复微生物修复l植物修复植物修复l植物植物微生物联合修复微生物联合修复3.3ISB的方法的方法微生物修复3.3ISB的方法15这这种种方方法法研研究究的的最最多多，一一般般根根据据土土壤壤污污染染状状况况，富富集集、驯驯化化土土著著微微生生物物，或或人人工工接接种种培培养养代代表表性性的的土土壤壤微微生生物物，以以研研究究土土壤壤微微生生物物受受土土壤壤污污染染的的影影响响变变化化，及及土土壤壤的的污污染染物物含含量量变变化。化。目目前前在在大大多多数数实实际际的的生生物物修修复复中中应应用用的的都都是是土土著著微微生生物物，而而外外来来的的微微生生物物在在环环境境中中难难以以保保持持较较高高的的活活性性，工工程程菌菌的的应应用用受受到到较较严严格格的的限制。限制。微生物法微生物法这种方法研究的最多，一般根据土壤污染状况，16研究表明，有种类繁多的细菌、研究表明，有种类繁多的细菌、真菌及它们的纯化酶可以代谢石油真菌及它们的纯化酶可以代谢石油烃类，但是由于吸附动力学、可降烃类，但是由于吸附动力学、可降解性微生物群落、电子受体竞争能解性微生物群落、电子受体竞争能力等方面的限制，土壤中的石油烃力等方面的限制，土壤中的石油烃降解非常缓慢。降解非常缓慢。研究表明，有种类繁多的细菌、真菌及它们的纯化酶17原理原理:一一、植植物物直直接接吸吸收收并并在在组组织织中中积积累非植物毒性的代谢物；累非植物毒性的代谢物；二、植物促进生物化学反应的酶。二、植物促进生物化学反应的酶。植物修复植物修复原理:植物修复18品种选择品种选择:常常选选用用受受污污染染区区内内代代表表性性较较强强的的粮粮食食作作物物和和经经济济作作物物，如如：水水稻稻、小小麦麦、玉玉米米、花花生生、棉棉花、油菜、茶树及各种果树等。花、油菜、茶树及各种果树等。品种选择:19l利用植物及其根际微生物共存体系净化利用植物及其根际微生物共存体系净化土壤中有机污染物土壤中有机污染物。大部分植物根上都。大部分植物根上都有菌根菌生长，菌根菌和植物共生具有有菌根菌生长，菌根菌和植物共生具有独特的代谢途径，可代谢自生菌不能降独特的代谢途径，可代谢自生菌不能降解的有机物。解的有机物。植物植物微生物联合修复微生物联合修复利用植物及其根际微生物共存体系净化土壤中有机污染物。大部分20目目前前这这一一领领域域的的研研究究工工作作主主要要集集中中于于以以下下三三方面：方面：1 微生物的活性微生物的活性 2 石油烃生物可降解性研究石油烃生物可降解性研究 3 具有高效降解力的生物选择具有高效降解力的生物选择3.4 ISB的国内外研究现状的国内外研究现状目前这一领域的研究工作主要集中于以下三方面：3.4ISB21 这方面工作主要是围绕如何给微生物提供这方面工作主要是围绕如何给微生物提供一个更合适的环境，包括温度、湿度、酸度、一个更合适的环境，包括温度、湿度、酸度、营养和供氧等方面。营养和供氧等方面。Williaw(1995)取样考察土著微生物最佳的取样考察土著微生物最佳的环境条件，认为一般来说应保持在环境条件，认为一般来说应保持在PH=6.58.5，温度，温度2735，营养元素比例（，营养元素比例（C：N：P）约为约为300：15：1的范围内。的范围内。微生物的活性微生物的活性这方面工作主要是围绕如何给微生物提供一个更合22 寻找最佳营养组合，研究表明寻找最佳营养组合，研究表明N、P的配的配比以比以5：110：1比较合适，但需结合实际处比较合适，但需结合实际处理的污染土壤确定。理的污染土壤确定。Audrew(1992)探索用有机探索用有机N源（如尿素、源（如尿素、谷氨酸等）代替无机谷氨酸等）代替无机N源。污染物氧化分解源。污染物氧化分解的最终电子受体的种类和浓度也影响着生物的最终电子受体的种类和浓度也影响着生物降解的速度和程度。降解的速度和程度。寻找最佳营养组合，研究表明N、P的配比以5：123 最终电子受体的种类和浓度影响着生最终电子受体的种类和浓度影响着生物降解的速度和程度。物降解的速度和程度。Begona等（等（2001）研究生物通气，证）研究生物通气，证明氧气是微生物降解的主要刺激因素。明氧气是微生物降解的主要刺激因素。魏德洲（魏德洲（1997）在石油污染的处理中，）在石油污染的处理中，采用添加过氧化氢的方法使去除率增加了采用添加过氧化氢的方法使去除率增加了近三倍。近三倍。最终电子受体的种类和浓度影响着生物降解的速度24 Haiirn(1996)在美国密执安州的一个污染在美国密执安州的一个污染地区进行了硝酸盐的内生电子受体的验证，地区进行了硝酸盐的内生电子受体的验证，表明表明BTEX（苯、乙苯、甲苯、二甲苯）能够（苯、乙苯、甲苯、二甲苯）能够被显著降解。但是在实验设计中无法将以氧被显著降解。但是在实验设计中无法将以氧气和硝酸盐为电子受体的降解效果区分开来。气和硝酸盐为电子受体的降解效果区分开来。Romantschuk（2000）提出利用植物的）提出利用植物的根区可以为微生物降解创造最佳条件。根区可以为微生物降解创造最佳条件。Haiirn(1996)在美国密执安州的一个25 一方面研究各种化合物在各种微生物一方面研究各种化合物在各种微生物作用下的降解机理和途径，另一方面从化作用下的降解机理和途径，另一方面从化合物本身的化学组成和结构上研究其影响合物本身的化学组成和结构上研究其影响生物降解的内在原因，总结不同类型化合生物降解的内在原因，总结不同类型化合物生物降解难易的规律性，以便开发出更物生物降解难易的规律性，以便开发出更有效的生物降解技术。有效的生物降解技术。石油烃生物可降解性研究石油烃生物可降解性研究一方面研究各种化合物在各种微生物作用下的降解机26 Riis等（等（1996）研究结果表明，链烷）研究结果表明，链烷烃、单环烷烃及苯能被有效的降解，而环烃、单环烷烃及苯能被有效的降解，而环烷烃和芳烃常常滞留于土壤中，对这类物烷烃和芳烃常常滞留于土壤中，对这类物质的强化性降解目前尚未取得明显效果。质的强化性降解目前尚未取得明显效果。Krishna（1999）用微分数值模拟生）用微分数值模拟生物降解率，说明仅在初始高浓度状态下有物降解率，说明仅在初始高浓度状态下有线性相关。线性相关。Riis等（1996）研究结果表明，链烷烃27 表面活性剂可以将污染物从土壤颗表面活性剂可以将污染物从土壤颗粒上洗脱下来，有利于细菌的降解。粒上洗脱下来，有利于细菌的降解。Luthy等（等（1996）研究得出非离子）研究得出非离子表面活性剂表面活性剂(Triton X-100)对对PAHs（多（多环芳烃）的溶解最有效。环芳烃）的溶解最有效。宋玉芳等（宋玉芳等（1999）研究了）研究了TW-80对对土壤土壤PAHs的降解率可提高约的降解率可提高约30%。表面活性剂可以将污染物从土壤颗粒上洗脱下来，28具具有有协协同同降降解解作作用用的的同同生生菌菌群群(consortia)。但但目目前前对对于于具具有有协协同同关关系系的的菌菌株株的的筛筛选选和和组组合合还还是是一一个个随随机机的的过过程程，其其协协同同作作用用的的机机制制有待进一步研究。有待进一步研究。Line等等（1996）用用以以黄黄杆杆菌菌(Flavbacterium)为为主主的的共共生生菌菌作作为为强强化化菌菌剂剂，成成功功地地处处理理了了PCP（五五氯氯酚酚钠钠）污污染染的的土壤。土壤。具有高效降解力的生物选择具有高效降解力的生物选择具有协同降解作用的同生菌群(consortia)。但29 基因工程基因工程(geneticengineeringmicroganism,GEM）的开）的开发。发。Charkrabarty（1998）发现能降解芳烃的）发现能降解芳烃的细菌，其降解基因位于质粒上。他利用基因工程细菌，其降解基因位于质粒上。他利用基因工程的手段将多种质粒嫁接到一种菌体内，构成一菌的手段将多种质粒嫁接到一种菌体内，构成一菌多基因，可以同时降解四种石油组分，能把原油多基因，可以同时降解四种石油组分，能把原油中约中约2/3的烃类消耗，突出特点是比自然菌降解速的烃类消耗，突出特点是比自然菌降解速度快。度快。基因工程(geneticengine30(1)要要对对污污染染地地点点和和存存在在的的污污染染物物进进行行详详细细的的具具体体考察，一些土壤中可能不宜使用；考察，一些土壤中可能不宜使用；(2)受各种环境因素的影响大；受各种环境因素的影响大；(3)特特定定的的微微生生物物只只降降解解特特定定类类型型的的化化合合物物质质，状状态态稍稍有有变变化化的的化化合合物物就就可可能能不不会会被被同同一一微微生生物物酶所破坏酶所破坏;(4)修复的时间相对较长修复的时间相对较长;(5)当当污污染染物物浓浓度度太太低低，不不足足以以维维持持降降解解细细菌菌的的群群落时，残余的污染物就会留在土壤中落时，残余的污染物就会留在土壤中。3.5ISB的局限性的局限性(1)要对污染地点和存在的污染物进行详细的具体考察，一些土31(1)实行有效的生物修复计划时需要采取的步骤；实行有效的生物修复计划时需要采取的步骤；(2)确确定定生生物物修修复复技技术术彻彻底底降降解解污污染染物物所所需需要要的的运运行周期；行周期；(3)监测生物修复计划的进展和污染物降解的过程；监测生物修复计划的进展和污染物降解的过程；(4)如如何何通通过过大大量量的的现现场场试试验验获获得得可可信信的的实实际际应应用用 数据跟踪和记录；数据跟踪和记录；(5)土壤的生物修复计划是否会造成新的污染或导土壤的生物修复计划是否会造成新的污染或导致污染物的扩散。致污染物的扩散。3.6研究工作方向：研究工作方向：(1)实行有效的生物修复计划时需要采取的步骤；3.6研32石油污染土壤菌剂修复实验报告石油污染土壤菌剂修复实验报告概况概况:沈抚灌区土壤以石油烃类污染为主，污灌沈抚灌区土壤以石油烃类污染为主，污灌年限长，流量大，面积广，难降解有机污染物年限长，流量大，面积广，难降解有机污染物(PAHs)含量高，这在国内外都非常少见，迫切含量高，这在国内外都非常少见，迫切需要经济、有效、易于操作的土壤原位生物修需要经济、有效、易于操作的土壤原位生物修复综合技术。复综合技术。石油污染土壤菌剂修复实验报告概况:33研研 究究 意意 义义:本部分研究以微生物实验为基础，筛选污灌本部分研究以微生物实验为基础，筛选污灌土壤中解脂酶活性强的优势微生物土壤中解脂酶活性强的优势微生物,人工接种培人工接种培养，配制成固体菌剂，分别接种在田间和网室布养，配制成固体菌剂，分别接种在田间和网室布置的微区和盆栽，以不同经济作物进行试验。本置的微区和盆栽，以不同经济作物进行试验。本文是文是2001年的实验布置和研究进程，主要探讨菌年的实验布置和研究进程，主要探讨菌剂施加的方法与条件，实现研究成果产业化，这剂施加的方法与条件，实现研究成果产业化，这在治理大面积污灌土壤上具有重要意义。在治理大面积污灌土壤上具有重要意义。研究意义:34实验内容实验内容l田间试验田间试验 在污染现场设置试验微区，以观测不同处在污染现场设置试验微区，以观测不同处理的生物修复在自然条件下情况变化。理的生物修复在自然条件下情况变化。l网室盆栽实验网室盆栽实验正交实验正交实验油浓度实验油浓度实验菌剂实验菌剂实验实验内容田间试验35实验准备实验准备固体菌剂固体菌剂 从从灌灌区区土土壤壤中中筛筛选选出出优优势势的的土土著著微微生生物物，包包括括细细菌菌,真真菌菌,共共17株株菌菌种种，选选择择降降解解能能力力强强的的微微生生物物，经经过过三三级级培养制成固体菌剂。培养制成固体菌剂。细细菌菌菌菌剂剂：芽芽孢孢杆杆菌菌动动胶胶菌菌属属C2C4白白色色未鉴定未鉴定 数量：数量：9.511014（个（个/g）真真 菌菌 菌菌 剂剂：小小 克克 银银 汉汉 棕棕 曲曲 霉霉 毛毛 霉霉B5B6B10山大提供的黄孢原毛平革菌山大提供的黄孢原毛平革菌 数量：数量：4.39109（个（个/g）实验准备固体菌剂36联合修复方式联合修复方式目目的的：考考察察不不同同经经济济作作物物（黄黄豆豆、玉玉米米、蓖蓖麻麻、沙沙打打旺旺）的修复情况。的修复情况。处处理理方方法法：均均投投加加有有机机颗颗粒粒复复合合肥肥1.43kg（0.167%）+细细菌菌剂菌菌剂0.72kg（0.08%）+真菌菌剂真菌菌剂0.72kg（0.08%）测测定定方方法法：微微生生物物数数量量采采用用平平板板计计数数法法，有有机机物物含含量量用用重重量法。量法。联合修复方式37石油污染土壤专题ppt课件38石油污染土壤专题ppt课件39分析：分析：1.1.对对于于四四种种作作物物，根根际际微微生生物物数数量量之之间间存存在在数数量级的差异。量级的差异。细菌数量为：沙打旺细菌数量为：沙打旺=玉米玉米 黄豆黄豆=蓖麻蓖麻 真菌数量为：玉米真菌数量为：玉米沙打旺沙打旺蓖麻蓖麻黄豆黄豆 四四种种作作物物根根际际土土壤壤中中依依次次相相差差一一个数量级个数量级分析：402.同对照比较起来同对照比较起来蓖麻根际细菌数量相差不大，而真菌数相蓖麻根际细菌数量相差不大，而真菌数相差了两个数量级；差了两个数量级；黄豆根际细菌数量无差别，真菌数处理比黄豆根际细菌数量无差别，真菌数处理比对照低；对照低；沙打旺根际真菌处于同一数量级，细菌则沙打旺根际真菌处于同一数量级，细菌则比对照高一个数量级。比对照高一个数量级。玉米真菌和细菌都较对照高。玉米真菌和细菌都较对照高。2.同对照比较起来413.土壤中总烃含量的数值表明，玉米和沙打土壤中总烃含量的数值表明，玉米和沙打旺对石油降解的能力强。旺对石油降解的能力强。还需要进一步测定还需要进一步测定PAHs的含量变化。的含量变化。？3.土壤中总烃含量的数值表明，玉米和沙打旺对石油降解的能力强42又又以以灌灌区区植植物物玉玉米米为为例例，分分为为三三种种处理：处理：1.营养调节：营养调节：2.菌菌剂剂调调节节：在在投投加加0.5%的的肥肥料料基基础础上上，分分别别施施加加不不同同比比例例的的细细菌菌和和真菌菌剂真菌菌剂3.联联合合修修复复：投投加加0.5%肥肥料料+0.25%细菌菌剂细菌菌剂+0.25%真菌菌剂真菌菌剂以空白土壤为对照以空白土壤为对照 又以灌区植物玉米为例，分为三种处理：4344结果：结果：1 肥肥料料的的施施加加对对微微生生物物数数量量有有提提高高作作用用，且且随随肥肥料料的的投投加加量量增增加加而而增增加加，但但对对石石油油的的降降解解却却存存在在一定的界限。一定的界限。2 施施加加菌菌剂剂 真真菌菌菌菌剂剂量量少少则则细细菌菌数数量量多多，但但真真菌菌菌菌剂剂量量多多却却抑抑制制了了细细菌菌，且且对对石石油油降降解解效效果果不不如如其它处理；其它处理；细细菌菌菌菌剂剂施施加加量量不不同同对对微微生生物物数数量量都有促进作用且数量级较高。都有促进作用且数量级较高。3 联联合合修修复复中中，细细菌菌数数量量最最大大，真真菌菌数数量量级级不不高高，且总烃量残余较高。且总烃量残余较高。结果：45玉米株高（cm）百粒重（g）产量（kg/株）1134.814.76533.332189.528.195118.753190.331.534210.125.815181.255183.831.33156.256184.836.39163.757173.521.925235.008176.827.02593.759191.827.075129.00150.00不同处理对玉米植物量的影响不同处理对玉米植物量的影响玉米株高（cm）百粒重（g）产量（kg/株）1134.81446从生物量上看：从生物量上看：真菌菌剂施加的效果最明显，生物量最大；真菌菌剂施加的效果最明显，生物量最大；细菌菌剂的施加对玉米的生物量作用不明显；，细菌菌剂的施加对玉米的生物量作用不明显；，菌剂的量大小对植物生物量影响不太明显；菌剂的量大小对植物生物量影响不太明显；联合修复可以提高生物量。联合修复可以提高生物量。从生物量上看：47真菌菌株名称SFF-1宛 氏 拟 青 霉(PaecilomycesvaiwtiBainier)SFF-2拟 青 霉 属(PaecilomycesBainier)SFF-3互 隔 交 链 孢 霉 Alternariaalternata(Fr.)KeisslerSFF-5拟青霉属(PaecilomycesBainier)SFF-6青霉属鉴鉴定定：真真菌菌使使用用查查氏氏培培养养基基，用用点点植植培培养养法法和和栽栽片片培培养养法法，鉴定出六种菌中的五种，分别如下：鉴定出六种菌中的五种，分别如下：注：注：SFF-4因孢子着生位置未定有待进一步鉴定。因孢子着生位置未定有待进一步鉴定。真菌菌株名称SFF-1宛氏拟青霉(Paecilomyces48细菌细菌:革兰氏染色法革兰氏染色法既既能能观观察察到到细细菌菌的的形形态态，还还可可根根据据细细胞胞壁壁的的成成分分和和结结构构不不同同将将所所有有细细菌菌区区分分为为两两大大类类：染染色色呈呈红红色色为为革革兰兰氏氏染染色色阴阴性性（G-），蓝蓝紫紫色色为为革革兰兰氏氏染染色阳性色阳性(G+)。分分离离出出的的十十一一株株细细菌菌菌菌株株除除SFB-9为为G-外外，其其余余十十株均为株均为G+，且大都为杆菌。，且大都为杆菌。细菌:革兰氏染色法49菌类菌株名称中性红法菌类菌株名称中性红法真菌SFF-1+细菌SFB-1+SFF-2+SFB-2+SFF-3+SFB-3+SFF-5+SFB-4SFF-6+SFB-5SFB-6+SFB-7+SFB-8+SFB-9+SFB-10+SFB-11+优势菌株的解脂酶活性优势菌株的解脂酶活性注：注：无活性无活性 +有活性有活性 +活性较强活性较强 +活性强活性强 SFF-4因其状态特殊较难断定因其状态特殊较难断定 菌类菌株名称中性红法菌类菌株名称中性红法真菌SFF-1+细菌50讨论：讨论：在在经经过过一一年年的的污污染染场场地地原原位位修修复复后后，土壤中微生物状况为：土壤中微生物状况为：优势真菌的解脂酶活性都较强，优势真菌的解脂酶活性都较强，细菌以革兰氏染色阳性为主。细菌以革兰氏染色阳性为主。讨论：51谢谢！52