介绍几种新的感染性标志物太工讲课课件

2024/5/241介绍几种新的感染标志物无锡二院胡锡池2023/7/241介绍几种新的感染标志物无锡二院2024/5/243几种新的感染标志物n1、降钙素原（降钙素原（ProcalcitominPCT）n2、内毒素内毒素n3、(13)-D-葡聚糖（葡聚糖（G试验）试验）n4、半乳甘露聚糖（半乳甘露聚糖（GM试验）试验）n5、呼吸道病毒、呼吸道病毒7项检测（直接免疫荧光法）项检测（直接免疫荧光法）2023/7/243几种新的感染标志物1、降钙素原（Proc2024/5/244n降钙素原（降钙素原（ProcalcitominPCT）2023/7/2442024/5/245降钙素原概述n降钙素原是正常人血清中存在，含降钙素原是正常人血清中存在，含116个氨基酸组成的个氨基酸组成的糖蛋白，最初由甲状腺糖蛋白，最初由甲状腺C细胞产生细胞产生;n在非感染或病毒性感染疾病时保持非常低的血清水平，在非感染或病毒性感染疾病时保持非常低的血清水平，在细菌性感染时含量升高，并与感染程度和预后呈正相在细菌性感染时含量升高，并与感染程度和预后呈正相关关;n目前国外认为目前国外认为PCT为一种新的具有创新意义、可用于诊为一种新的具有创新意义、可用于诊断和监控严重细菌感染及脓毒血症、败血症等疾病的理断和监控严重细菌感染及脓毒血症、败血症等疾病的理想指标，具有高度的敏感性和特异性想指标，具有高度的敏感性和特异性;n PCT含量的变化稳定，并出现在疾病的早期（含量的变化稳定，并出现在疾病的早期（3-4h）。）。半衰期半衰期(24h);n正常血清水平正常血清水平:100-150pg/ml。2023/7/245降钙素原概述降钙素原是正常人血清中存在，2024/5/246哪些情况下降钙素原会升高n全身性细菌感染；n严重休克、SIRS和MODS。n真菌、寄生虫、立克次体、结核感染；n病毒感染、肿瘤、过敏、自身免疫性疾病及局部感染患者中，PCT水平可轻度升高；2023/7/246哪些情况下降钙素原会升高全身性细菌感染；2024/5/247PCT的临床意义n早期诊断早期诊断 在感染发生在感染发生2-3h血浆血浆PCT浓度就会升高浓度就会升高.n病情监测病情监测n在脓毒性休克时在脓毒性休克时PCT含量最高，可达含量最高，可达1000ng/ml，是正常人的，是正常人的2000倍。随着感倍。随着感染的恢复染的恢复PCT也随着下降。也随着下降。PCT升高幅度依次为升高幅度依次为Sirs（全身性炎症反应综合症）（全身性炎症反应综合症）+/，Sepsis（败血症）（败血症）2+、Severe Sepsis（严重败血症）（严重败血症）3+、Sepsis Shock（败血症休克）（败血症休克）4+n预后判断预后判断n 动物实验证明，动物实验证明，PCT是一个潜在的致死因子，本身不会启动脓毒性反应，但可是一个潜在的致死因子，本身不会启动脓毒性反应，但可放大并加重脓毒性的病理反应，当放大并加重脓毒性的病理反应，当PCT含量升高时死亡率也升高。含量升高时死亡率也升高。n鉴别诊断鉴别诊断n 细菌感染和非细菌性炎症反应（自身免疫性疾病等）的鉴别诊断细菌感染和非细菌性炎症反应（自身免疫性疾病等）的鉴别诊断n 细菌感染和病毒感染的鉴别诊断（脑脊膜炎等）细菌感染和病毒感染的鉴别诊断（脑脊膜炎等）n 器官移植术后鉴别诊断（细菌感染、病毒感染、吸收热、排斥反应、真菌感器官移植术后鉴别诊断（细菌感染、病毒感染、吸收热、排斥反应、真菌感 染等）染等）n 脓毒性休克和非脓毒性休克的鉴别诊断脓毒性休克和非脓毒性休克的鉴别诊断2023/7/247PCT的临床意义2024/5/248PCT 的实验室检测n免疫发光法免疫发光法(ILMA)法国梅里埃公司、美国罗氏法国梅里埃公司、美国罗氏 该方法敏感性高,特异性强，此法测定的低限值为0.1ng/ml,检测耗时约2h。nSPCT-Q-SPCT-Q-半定量快速实验半定量快速实验-德国评细替、武汉海特德国评细替、武汉海特 该方法操作简单、结果易观察的特点。其低限值为0.5ng/ml。检测耗时约0.5h。（无锡雷赛公司）n放射免疫学分析法 n透射免疫浊度法 2023/7/248PCT 的实验室检测免疫发光法(IL2024/5/249不同人群中血浆PCT的值2023/7/249不同人群中血浆PCT的值2024/5/2410PCT 与其它感染性指标的比较。与其它感染性指标的比较。nPCT PCT PSPS WBC WBC:特异性高特异性高：全身性感染既可导致白细胞升高,也可以引起白细胞减少。nPCT PCT PSPS CRPCRP：灵敏度好：灵敏度好：PCT可在感染后2个小时后检测；CRP在炎症过程开始812h 后，才能从血清中检测出。nPCT PCT PSPS IL-1IL-1、IL-6IL-6、TNF-TNF-:稳定性好：稳定性好：PCT 的半衰期较长(2024h)；IL半衰期很短(数分钟至几小时)。nE668511082023/7/2410PCT 与其它感染性指标的比较。PCT2024/5/2411 内毒素检测内毒素检测2023/7/2411 2024/5/2412内毒素研究背景内毒素研究背景内毒素研究背景内毒素研究背景1.据统计，我国每年各种感染病人达到据统计，我国每年各种感染病人达到2 2亿人次，亿人次，发热病人达到发热病人达到3 3亿人次，其中亿人次，其中G-G-菌感染占很大比例。菌感染占很大比例。由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。血症是目前临床上的主要死亡原因之一。早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量键，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。检测及相应的对症治疗就显得格外重要。内毒素的快速定量测定有助于对内毒素的快速定量测定有助于对G-G-菌感染的早期菌感染的早期诊断、治疗方法的选择及疗效的判断。诊断、治疗方法的选择及疗效的判断。2.3.4.2023/7/2412内毒素研究背景1.据统计，我国每2024/5/2413定义n n细菌内毒素细菌内毒素（EndotoxinEndotoxin ）是是是是GG-菌细胞壁上的特有结构，内毒素为外菌细胞壁上的特有结构，内毒素为外菌细胞壁上的特有结构，内毒素为外菌细胞壁上的特有结构，内毒素为外源性致热原，它可激活中性粒细胞等，源性致热原，它可激活中性粒细胞等，源性致热原，它可激活中性粒细胞等，源性致热原，它可激活中性粒细胞等，使之释放出一种内源性热原质，作用使之释放出一种内源性热原质，作用使之释放出一种内源性热原质，作用使之释放出一种内源性热原质，作用于体温调节中枢引起发热。内毒素的于体温调节中枢引起发热。内毒素的于体温调节中枢引起发热。内毒素的于体温调节中枢引起发热。内毒素的主要化学成分为主要化学成分为主要化学成分为主要化学成分为脂多糖脂多糖脂多糖脂多糖（LPSLPS）中的）中的）中的）中的类脂类脂类脂类脂A A。2023/7/2413定义细菌内毒素（Endotoxin 2024/5/2414ShwartzmanShwartzman现象现象5内毒素的生物学效应内毒素的生物学效应发热反应发热反应1白细胞反应白细胞反应2内毒素血症（内毒素血症（ETMETM）与内毒素休克（）与内毒素休克（ETSETS）3弥漫性血管内凝血（弥漫性血管内凝血（DICDIC）42023/7/2414Shwartzman现象5内毒素的生物2024/5/2415内毒素血症与临床疾病的相关性内毒素血症与临床疾病的相关性内毒素血症与临床疾病的相关性内毒素血症与临床疾病的相关性内毒素检测内毒素检测革兰阴性菌败血症的诊断革兰阴性菌败血症的诊断呼吸道感染呼吸道感染肝脏感染及肝硬化肝脏感染及肝硬化胆道疾病胆道疾病急性胰腺炎急性胰腺炎溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎细菌性感染的辅助性诊细菌性感染的辅助性诊断、治疗和预后判断断、治疗和预后判断原因不明的发热原因不明的发热外源性输注的内毒素血症外源性输注的内毒素血症的诊断的诊断2023/7/2415内毒素血症与临床疾病的相关性内毒素检测2024/5/2416 体液内毒素水平增高是严重细菌性感染（尤体液内毒素水平增高是严重细菌性感染（尤其是革兰染色阴性菌）的一个重要的特异性指其是革兰染色阴性菌）的一个重要的特异性指标，而且，也是脓毒血症和全身炎症反应综合标，而且，也是脓毒血症和全身炎症反应综合症的可靠指标。内毒素水平不仅可用于感染类症的可靠指标。内毒素水平不仅可用于感染类别的鉴别诊断，也可用于感染控制和病情转归别的鉴别诊断，也可用于感染控制和病情转归的参数。因此，建议在适当的时候可对内毒素的参数。因此，建议在适当的时候可对内毒素的水平作一系列连续动态的监测的水平作一系列连续动态的监测。内毒素检测的临床意义2023/7/2416 体液内毒素水平增高是严重细2024/5/2417n(13)-D-葡聚糖葡聚糖(G试验试验)n半乳甘露聚糖半乳甘露聚糖(GM试验试验)2023/7/24172024/5/2418当前侵袭性真菌感染当前侵袭性真菌感染(IFI)检测的现检测的现状状n发病率呈逐年上升趋势，且漏诊率居高不下。据尸检研究发现，75%的IFI病例在生前漏诊，主要原因是IFI的临床表现不典型易被基础疾病所掩盖，导致诊断困难。n目前常规微生物学检查（直接涂片镜检和真菌培养）耗时长，干扰因素多。而分子生物学检查（真菌DNA的检测）门槛过高，且不能提示现症感染。病理检查常因患者的病情所限难以实施。n因此寻找有效的感染性标志物对于快速诊断侵袭性真菌感染、制定正确的治疗方案、争取最佳治疗时间，意义重大。2023/7/2418当前侵袭性真菌感染(IFI)检测的现状2024/5/2419真菌感染的诊断真菌感染的诊断n深部真菌感染的临床表现 n深部真菌感染影像学特征 n微生物学检查 主要包括两方面:直接涂片镜检和真菌培养.n分子生物学检测-真菌DNA的检测 n真菌细胞壁组分检测(1,3)-D-葡聚糖(G试验)n真菌抗原检测 半乳甘露聚糖(GM试验)，分布于大多数曲霉属真菌胞壁中2023/7/2419真菌感染的诊断深部真菌感染的临床表现 2024/5/24201-3-葡聚糖的检测葡聚糖的检测(G试验试验)n真菌在自然界中分布很广真菌在自然界中分布很广,其细胞壁主要成分其细胞壁主要成分为为(1-3)-D-Glucan(1-3)-D-Glucan(葡聚糖葡聚糖).).n当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理，胞的吞噬、消化等处理，1-3-D葡聚糖可从葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液及其它体液（如胞壁中释放出来，从而使血液及其它体液（如尿、脑脊液，腹水，胸水等）中尿、脑脊液，腹水，胸水等）中1-3-D葡聚葡聚糖含量增高。糖含量增高。n浅部真菌感染中，浅部真菌感染中，1-3-D葡聚糖未被释放出葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高。来，故其在体液中的量不增高。2023/7/24201-3-葡聚糖的检测(G试验)真2024/5/2421n快速检测血液等体液中酵母菌、丝状真菌等细胞快速检测血液等体液中酵母菌、丝状真菌等细胞壁成分，不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、壁成分，不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属。镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属。n另据文献报道，检测葡聚糖含量不能用于隐球菌另据文献报道，检测葡聚糖含量不能用于隐球菌感染的诊断，可能因为隐球菌在免疫缺陷患者体感染的诊断，可能因为隐球菌在免疫缺陷患者体内生长缓慢，并形成厚荚膜。有体外实验表明，内生长缓慢，并形成厚荚膜。有体外实验表明，新生隐球菌产生的新生隐球菌产生的1-3-D葡聚糖量比念珠菌和葡聚糖量比念珠菌和曲霉菌少。曲霉菌少。n是早期真菌感染的敏感生物标志是早期真菌感染的敏感生物标志n可鉴别致病菌和定植菌可鉴别致病菌和定植菌1-3-葡聚糖的临床意义葡聚糖的临床意义2023/7/2421快速检测血液等体液中酵母菌、丝状真菌等2024/5/24221-3-葡聚糖（葡聚糖（G试验）试验）-北京金北京金山川山川n酵母菌、丝状真菌细胞壁成分；n 不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属；n 不能检测：隐球菌和接合菌；n 美国FDA已批准，欧洲部分国家已注册；n 敏感性、特异性：90左右2023/7/24221-3-葡聚糖（G试验）-北京金2024/5/2423半乳甘露聚糖半乳甘露聚糖(GM试试验验)n半乳甘露聚糖（半乳甘露聚糖（galactomannangalactomannan，GMGM）是曲霉菌细胞壁）是曲霉菌细胞壁的组成成分，当曲霉在组织生长时可释放进入血循环。的组成成分，当曲霉在组织生长时可释放进入血循环。n检测的是半乳甘露聚糖，主要适于侵袭性曲霉菌感染检测的是半乳甘露聚糖，主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。当菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的的早期诊断。当菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。GMGM释放量与菌量释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。连续检测成正比，可以反映感染程度。连续检测GMGM可作为治疗可作为治疗疗效的监测。疗效的监测。2023/7/2423半乳甘露聚糖(GM试验)半乳甘露聚糖（2024/5/2424GM检测的临床意义检测的临床意义nGMGM检测有助于检测有助于IPAIPA的早期诊断，而且还有助于抗曲霉治疗的早期诊断，而且还有助于抗曲霉治疗的疗效以及疾病转归的判断的疗效以及疾病转归的判断n血清中血清中GMGM的量伴随的量伴随IPAIPA的进展会增加，也会随着药物的有的进展会增加，也会随着药物的有效治疗而下降。如果在效治疗而下降。如果在IPAIPA的治疗期间，其的治疗期间，其GMGM抗原血症持抗原血症持续保持较高水平者，其预后则较差，此时试着更改治疗方续保持较高水平者，其预后则较差，此时试着更改治疗方案。相反，案。相反，GMGM抗原血症清除早且明显者，其预后则较理想，抗原血症清除早且明显者，其预后则较理想，应正确判定病情后及时撤药。应正确判定病情后及时撤药。n跟踪研究发现，肾功能严重受损也会影响跟踪研究发现，肾功能严重受损也会影响GMGM抗原血症的清抗原血症的清除。除。2023/7/2424GM检测的临床意义GM检测有助于IPA2024/5/2425半乳甘露聚糖（半乳甘露聚糖（GM试验）试验）-美国美国伯乐伯乐n曲霉菌细胞壁上一种多聚糖抗原n 可以从血清、脑脊业、胸水、BALF检测到n 方法：n ELISA（BioRad）：敏感性高1ng/mln Latex agglutination：15ng/ml2023/7/2425半乳甘露聚糖（GM试验）-美国伯乐曲霉2024/5/2426G试验与试验与GM试验试验比较比较2023/7/2426G试验与GM试验比较2024/5/2427G试验在以下情况可出现假阳性试验在以下情况可出现假阳性n使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；他含有葡聚糖的材料；n静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；使用多糖类抗癌药物。服用多粘菌素使用多糖类抗癌药物。服用多粘菌素B,厄他培能厄他培能,头孢噻肟头孢噻肟,吡肟吡肟,优力欣优力欣,磺胺等药物磺胺等药物n链球菌血症；链球菌血症；n操作者处理标本时存在污染、标本溶血；操作者处理标本时存在污染、标本溶血；n放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等菌经胃肠道进入血液等2023/7/2427G试验在以下情况可出现假阳性使用纤维素2024/5/2428G试验在以下情况可出现假阴性试验在以下情况可出现假阴性n之前使用过抗真菌药物、之前使用过抗真菌药物、n标本放置时间过长，导致分解代谢。标本放置时间过长，导致分解代谢。n试验操作过程中离心时间过长。试验操作过程中离心时间过长。2023/7/2428G试验在以下情况可出现假阴性之前使用过2024/5/2429GM试验在以下情况可出现假阳性试验在以下情况可出现假阳性n饮用牛奶或高蛋白食物；饮用牛奶或高蛋白食物；n血液透析；血液透析；n自身免疫性肝炎等；自身免疫性肝炎等；n食用污染的大米等。食用污染的大米等。2023/7/2429GM试验在以下情况可出现假阳性饮用牛奶2024/5/2430GM试验在以下情况可出现假阴性试验在以下情况可出现假阴性n释放入血循环中的曲霉释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；并不持续存在而是会很快清除；n以前使用了抗真菌药物；以前使用了抗真菌药物；n粒细胞缺乏的患者。粒细胞缺乏的患者。2023/7/2430GM试验在以下情况可出现假阴性释放入血2024/5/2431G试验、试验、GM试验结果与临床诊断试验结果与临床诊断不符合时的原因分析不符合时的原因分析n患者是不是粒缺的状态患者是不是粒缺的状态n患者饮食或药物的干扰患者饮食或药物的干扰n操作是否规范操作是否规范(分析前分析前,分析中分析中,分析后等分析后等)n试剂和仪器是否状态良好试剂和仪器是否状态良好2023/7/2431G试验、GM试验结果与临床诊断不符合时2024/5/2432仪器检测原理：仪器检测原理：GG试验、内毒素试验、内毒素 北京金山川北京金山川北京金山川北京金山川-MB-80MB-80检测仪（检测仪（动态比浊法）动态比浊法）动态比浊法）动态比浊法）动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原（脂多糖）动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原（脂多糖）动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原（脂多糖）动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原（脂多糖），真菌可溶性抗原（，真菌可溶性抗原（，真菌可溶性抗原（，真菌可溶性抗原（1-31-31-31-3）-D-D-D-D葡聚糖，通过葡聚糖，通过葡聚糖，通过葡聚糖，通过连续检测浊度变化建立时间（连续检测浊度变化建立时间（连续检测浊度变化建立时间（连续检测浊度变化建立时间（T T T T）与微生物含）与微生物含）与微生物含）与微生物含量（量（量（量（C C C C）关系的标准曲线，再经过光电转换原）关系的标准曲线，再经过光电转换原）关系的标准曲线，再经过光电转换原）关系的标准曲线，再经过光电转换原理，由软件系统分析得出样品中含真菌可溶性理，由软件系统分析得出样品中含真菌可溶性理，由软件系统分析得出样品中含真菌可溶性理，由软件系统分析得出样品中含真菌可溶性抗原或内毒素含量。抗原或内毒素含量。抗原或内毒素含量。抗原或内毒素含量。2023/7/2432仪器检测原理：G试验、内毒素 北京2024/5/2433PCTPCT，GG试验，试验，GMGM试验，内毒素检测试验，内毒素检测n n早期诊断早期诊断早期诊断早期诊断n n快速诊断快速诊断快速诊断快速诊断n n指导用药指导用药指导用药指导用药n n评价效果评价效果评价效果评价效果n n动态观察动态观察动态观察动态观察2023/7/2433PCT，G试验，GM试验，内毒素检测早2024/5/2434呼吸道病毒呼吸道病毒7项检测（直接免疫项检测（直接免疫荧光）荧光）2023/7/2434呼吸道病毒7项检测（直接免疫荧光）2024/5/2435呼吸道病毒感染概述n呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为入侵门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。n据统计，90%以上的急性上呼吸道感染由该类病毒引起。Karin M et al.Cell.2006 Feb 24;124(4):823-35.2023/7/2435呼吸道病毒感染 2024/5/2436呼吸道病毒感染病毒分类呼吸道病毒包括：正粘病毒科：流感病毒副粘病毒科：副流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒其他病毒科：腺病毒、风疹病毒、鼻病毒、冠状病毒、呼肠病毒2023/7/2436呼吸道病毒感染 病毒分类2024/5/2437呼吸道病毒感染病毒分类2023/7/2437呼吸道病毒感染 病毒分类2024/5/2438呼吸道病毒感染流行病学流感病毒感染发生高峰期在北半球一般是从11月到4月腺病毒出现在深冬到夏初RSV通常是在冬天到早春，持续5个月流行副流感病毒爆发会持续一年。2023/7/2438呼吸道病毒感染 流行病学2024/5/2439呼吸道病毒检测临床意义Byington,C.L.,H.Castillo,et al.(2002).“The effect of rapid respiratory viral diagnostic testing on antibiotic use in a childrens hospital.”Arch Pediatr Adolesc Med 156(12):1230-4.n为临床合理用药指导依据，防止抗生素的滥用。n减少耐药菌的产生，节省病人开支。2023/7/2439呼吸道病毒检测 临床意义By2024/5/2440呼吸道病毒检测方法n分离培养需要专业技能，时间长，成本高。nPCR成本高，实验室条件要求高nEIA低敏感性，假阴性高，IgM&IgG nIF快速，稳定，敏感，特异性强2023/7/2440呼吸道病毒检测 方法分离培2024/5/2441检测解决方案D3 Ultra TMn1983年成立，Ohio University，230名员工。n年销售额超过4亿美元。n呼吸疾病，疱疹&衣原体感染，甲状腺疾病等nAthens,Ohio&Cleveland,Ohion全球最大细胞株和病毒株供应商n江苏省代理：无锡赛拓基因生物科技有限公司2023/7/2441检测解决方案 D3 U2024/5/2442检测解决方案检测原理nFITC标记的某病毒特异性单克隆抗体与细胞中相应的病毒抗原结合后，形成抗原抗体复合物，荧光显微镜下细胞内显示苹果绿荧光。而未发生抗原抗体特异性反应的细胞，被Evans蓝复染成红色。2023/7/2442检测解决方案 检测原理2024/5/2443检测解决方案产品特点n直接免疫荧光快速检测和鉴定种常见的呼吸道病毒（RSV，ADV，FLUA/B,PIV1/2/3）；n高敏感性、特异性和稳定性；n可作为其他快速检测的确认试验，减少假阴性结果；n2010年注册上市2023/7/2443检测解决方案 产品特点2024/5/2444检测解决方案临床验证n苏州大学附属儿童医院 n温州医学院附属第二医院n上海市儿童医院超过1000例样本2023/7/2444检测解决方案 临床验证2024/5/2445检测解决方案检测流程阳性结果判断：阳性结果判断：n显示苹果绿荧光的细胞，为阳性细胞。n当放大倍数为200倍时，在视野中找到2个阳性细胞，判为标本阳性。振荡，离心，去除上清，制成细胞悬液振荡，离心，去除上清，制成细胞悬液把细胞涂抹在板上，风干，丙酮固定，把细胞涂抹在板上，风干，丙酮固定，D3D3抗抗体反应，封闭，盖玻片体反应，封闭，盖玻片 液体样本观察细胞内部，病毒特异性染色观察细胞内部，病毒特异性染色观察细胞内部，病毒特异性染色观察细胞内部，病毒特异性染色在在在在FITCFITC显微镜下观察成苹果绿显微镜下观察成苹果绿显微镜下观察成苹果绿显微镜下观察成苹果绿2023/7/2445检测解决方案 检测流程2024/5/2446总结n1、降钙素原（细菌感染降钙素原（细菌感染)n2、内毒素内毒素(革兰氏阴性杆菌革兰氏阴性杆菌)n3、(13)-D-葡聚糖（真菌葡聚糖（真菌感染感染）n4、半乳甘露聚糖（半乳甘露聚糖（真菌真菌感染）感染）n5、呼吸道病毒、呼吸道病毒7项检测（病毒感染）项检测（病毒感染）2023/7/2446总结1、降钙素原（细菌感染)2024/5/2447谢谢大家!2023/7/2447谢谢大家!