微生物的实验室培养ppt课件

专题专题2:2:微生物的培养与应用微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养专题2:微生物的培养与应用1 了解有关微生物及培养基的基础知识，了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。一、课题目标：一、课题目标：掌握掌握培养基的制备培养基的制备、高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌和和平平板划线法板划线法等基本操作技术，熟练、规范地等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。无菌技术的操作。二、课题重点和难点：二、课题重点和难点：三、技能目标：三、技能目标：了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操2微生物包括哪五类：微生物包括哪五类：病毒病毒细菌细菌放线菌放线菌真菌真菌原生动物原生动物特点：特点：结构都相当简单结构都相当简单,个体多数十分微小个体多数十分微小.通常通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素且体内一般不含有叶绿素.不能不能进行光合作用进行光合作用.原核生物原核生物界界 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界一、基础知识：一、基础知识：(一一)微生物微生物微生物包括哪五类：病毒特点：结构都相当简单,个体多数十分微小3 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做眠体，叫做芽孢芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3 3小时以后小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.芽孢 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆4菌落：菌落：n单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落形态结构的子细胞群体，叫做菌落。n菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉5菌落细菌的菌落特征细菌的菌落特征因种而异因种而异 菌落细菌的菌落特征因种而异 6细菌的营养类型细菌的营养类型 n根据细菌所利用的能源和碳源的不同，根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。将细菌分为两大营养类型。n自养菌自养菌:分类分类,举例举例?n异养菌异养菌:腐生菌腐生菌 寄生菌寄生菌 大部分病原菌大部分病原菌光合自养型光合自养型:光合细菌光合细菌化能自养型化能自养型:硝化细菌硝化细菌,铁细菌铁细菌,硫细菌硫细菌细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为7真菌真菌真菌8如图是酵母菌电子显微如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构镜下的形态结构酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青霉如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构酵母菌和霉菌青霉9微生物的实验室培养ppt课件10 合作探究合作探究（1010分钟）分钟）重点重点讨论讨论内容：内容：n1、培养基的概念、培养基的概念n2、微生物培养需要的无菌技、微生物培养需要的无菌技术n3、制、制备培养基的一般方法（固体）培养基的一般方法（固体）n4、接种培养与、接种培养与纯化大化大肠杆菌杆菌n5、菌落保藏方法、菌落保藏方法n6、区分无土栽培技、区分无土栽培技术、植物、植物组织培养技培养技术n与微生物的培养技与微生物的培养技术 合作探究（10分钟）重点讨论内容：11任任务展示展示非展示同学非展示同学1.写出写出培养基的定培养基的定义-培养基的种培养基的种类培养基的成分培养基的成分1，后后2，后，后3，后，后整理整理导学案学案A层做好做好总结，准准备拓展延伸；拓展延伸；B层落落实基基础知知识，提出，提出质疑；疑；C层落落实基基础知知识2.培养基的培养基的环境条件境条件什么是消毒及种什么是消毒及种类什么是什么是灭菌及种菌及种类4,后后5，后，后6，后，后3.写出写出制制备培养基的一般方培养基的一般方法步法步骤7，后，后任务展示非展示同学1.写出培养基的定义1，后2.培养124.平板划平板划线法的一般注意事法的一般注意事项有哪些？有哪些？8，后，后5、稀、稀释涂布平板法如何稀涂布平板法如何稀释？接种的培养基接种的培养基为何同何同时与不接种的培养基一与不接种的培养基一起培养？起培养？涂布的菌落平均有涂布的菌落平均有30个，稀个，稀释了了10倍，滴加倍，滴加了了0.1mL，则原菌液原菌液1mL有多少个有多少个细菌？菌？9 后后10 后后1 后后6、菌落保藏方法有哪些？、菌落保藏方法有哪些？3 后后5.区分无土栽培与植物区分无土栽培与植物组织培养，微生物培培养，微生物培养方法养方法5，后，后4.平板划线法的一般注意事项有哪些？8，后5、稀释涂布平板13一、基础知识：一、基础知识：（二）培养基（二）培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质配制出供其生长繁殖的营养基质。（1 1）按物理状态分：）按物理状态分：固体培养基固体培养基和和液体培养液体培养基基。其中固体培养基用于菌种保存及分离、鉴。其中固体培养基用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等，液体培养基常用于发酵定菌落、活菌计数等，液体培养基常用于发酵工业。工业。（2 2）按功能分：）按功能分：选择培养基选择培养基和和鉴别培养基鉴别培养基。（3 3）按成分分：）按成分分：天然培养基天然培养基和和合成培养基合成培养基。1.1.培养基的类型和用途培养基的类型和用途一、基础知识：（二）培养基 人们按照微生物14液体培养基：液体培养基：表面生长表面生长均匀混浊生长均匀混浊生长沉淀生长沉淀生长液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长15固体培养基：菌落，菌苔固体培养基：菌落，菌苔固体培养基：菌落，菌苔16选择培养基选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的从微生物群中选择具有特定表型的细胞细胞.使之进行繁殖所用的培养基使之进行繁殖所用的培养基,称为称为选择培养基选择培养基.加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物分离自养型微生物 选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞.使之进行繁殖17天然培养基有血清、天然培养基有血清、血浆、和组织提取液血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）（如鸡胚和牛胚浸液）。优点：优点：营养成分丰富，营养成分丰富，培养效果好培养效果好缺点：缺点：来源受限来源受限;成分成分复杂，影响对某些实复杂，影响对某些实验产物的提取和实验验产物的提取和实验结果的分析结果的分析;易发生支易发生支原体污染原体污染;根据细胞生存所需物质根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法的种类和数量，用人工方法模拟合成的。模拟合成的。合成培养基主要成分合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅合物、无机盐和其它一些辅助物质。助物质。优点：优点：标准化生产，组标准化生产，组分和含量相对固定分和含量相对固定;成本低成本低 缺点：缺点：缺少某些成分，缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长不能完全满足体外细胞生长需要。需要。合成培养基合成培养基:天然培养基：天然培养基：天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。18血清中含有：血清中含有：多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等）铁蛋白等）多种金属离子；多种金属离子；激素；激素；促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。球蛋白、胶原等。各种生长因子各种生长因子转移蛋白转移蛋白不明成分不明成分 人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。血清中含有：人工合成培养基只能维持细胞生存，要192.2.不同的微生物往往需要采用不同的培养不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方基配方(参考教材附录内容参考教材附录内容)3.3.不管哪种培养基，一般都含有不管哪种培养基，一般都含有水水、碳源碳源、和、和氮源氮源、无机盐无机盐、等等营养物质，营养物质，另外还需要满足微生物生长对另外还需要满足微生物生长对pHpH、特殊营特殊营养物质养物质,例如例如:生长因子生长因子(即细菌生长必需，而即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶酸、嘌呤、嘧啶)以及以及氧气氧气等等的要求。的要求。2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录20微生物的实验室培养ppt课件21二、无菌技术二、无菌技术1.1.无菌技术的概念无菌技术的概念 无菌操作泛指无菌操作泛指在培养微生物的操作中，在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。所有防止杂菌污染的方法。无论是随后将要无论是随后将要学到的学到的倒平板倒平板、平板划线平板划线操作，还是操作，还是稀释涂稀释涂布平板法布平板法，其操作中的每一步都需要做到，其操作中的每一步都需要做到“无菌无菌”，即防止杂菌污染。只有熟练、规范，即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。二、无菌技术1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培22（）（）消毒定义：消毒定义：指使用较为温和的物理或化学方法仅指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物微生物。（。（不包括芽孢和孢子）不包括芽孢和孢子）2.2.消毒与灭菌的概念及两者的区别消毒与灭菌的概念及两者的区别（）消毒定义：2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 23（2 2）灭菌的定义：）灭菌的定义：使用强烈的理化因素杀死物体内外使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达微生物，包括芽孢和孢子，而达到到完全无菌完全无菌之过程。之过程。灭菌消毒技术是微生物有关工作中最灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。普通也是最重要的技术。（2）灭菌的定义：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有241 1、煮沸消毒法煮沸消毒法:100100煮沸煮沸5-6min5-6min2 2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：70-75 70-75 下煮下煮30min30min或或 80 80 下煮下煮15min15min3 3、化学药剂消毒法、化学药剂消毒法:用用75%75%酒精进行皮肤酒精进行皮肤消毒消毒;氯气消毒水源氯气消毒水源4 4、紫外线消毒、紫外线消毒(1)消毒的方法：消毒的方法：3.3.常用的消毒与灭菌的方法常用的消毒与灭菌的方法1、煮沸消毒法:100煮沸5-6min(1)消毒的方法：3251 1、灼烧灭菌、灼烧灭菌2 2、干热灭菌：、干热灭菌：160-170 160-170 下加热下加热1-2h1-2h。3 3、高压蒸气灭菌：、高压蒸气灭菌：100kPa100kPa、121 121 下下维持维持15-30min.15-30min.(2)灭菌的方法：灭菌的方法：1、灼烧灭菌(2)灭菌的方法：26 最常用的灭菌方法是最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌，它可，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。坏。有些玻璃器皿也可采用有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌高温干热灭菌。为了。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。气通过，而空气中的其他微生物不能通过。最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所271.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？外来微生物污染外，还有什么目的？2.2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。如果需要，请选择合适的方法。（1 1）培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿（2 2）玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管（3 3）实验操作者的双手实验操作者的双手答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（答：（1）、（）、（2）需要灭菌；（）需要灭菌；（3）需要消毒。）需要消毒。1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外28三、实验操作三、实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）三、实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）291 1计算计算2 2 称量称量3 3溶化溶化4 4灭菌灭菌5 5倒平板倒平板操作步骤操作步骤1计算操作步骤30倒平板技术倒平板技术倒平板技术倒平板技术倒平板技术31 1.1.培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到50 50 左右左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？的温度？答：答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。以进行倒平板了。2.2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。污染培养基。1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能323.3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4.4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？还能用来培养微生物吗？为什么？答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。板培养微生物。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4.在倒平板的过程中，如332 2、纯化大肠杆菌、纯化大肠杆菌接种方法有：接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法平板划线法:通过接种环在琼脂固体通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面种逐步稀释分散到培养基的表面.在数次划线后在数次划线后,可以分离到由一个细可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这这就是菌落就是菌落.微生物的接种技术微生物的接种技术微生物的接种技术微生物的接种技术2、纯化大肠杆菌接种方法有：平板划线法:通过接34微生物的实验室培养ppt课件35平板划线时不能划破培养基的原因平板划线时不能划破培养基的原因n一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；菌落的目的；n二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。菌落。平板划线时不能划破培养基的原因36 1.1.为什么在操作的第一步以及每次划线之为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。免细菌污染环境和感染操作者。问题讨论 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧37 2.2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？却后再进行划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。答：以免接种环温度太高，杀死菌种。3.3.在作第二次以及其后的划线操作时，在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划38稀释涂布平板法稀释涂布平板法稀释涂布平板法39微生物的实验室培养ppt课件40 涂布平板的所有操作都应在火焰附涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第要求，想一想，第2 2步应如何进行无菌操作？步应如何进行无菌操作？应从操作的各个细节保证应从操作的各个细节保证“无菌无菌”。例。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。围等等。问题讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。41微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养42微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养43菌种的保存菌种的保存菌种的保存菌种的保存 1 1、临时保藏：、临时保藏：接种到固体斜面培接种到固体斜面培养基，菌落长成后养基，菌落长成后置于置于44冰箱保存。冰箱保存。2 2、长期保存：、长期保存：甘油冷冻管藏法甘油冷冻管藏法菌种的保存 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长44四、课题成果评价四、课题成果评价 （一）培养基的制作是否合格（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温1 12 d2 d后后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。新制备。（二）接种操作是否符合无菌要求（二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。再次练习。（三）是否进行了及时细致的观察与记录（三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养培养12 h12 h与与24 h24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同明显不同四、课题成果评价 （一）培养基的制作是否合格45本课题知识小结本课题知识小结:本课题知识小结:46【典例解析典例解析】例例1 1关微生物营养物质的叙述中，正确的关微生物营养物质的叙述中，正确的A.A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量C.C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D.D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量 解析：解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于要针对微生物的具体情况分析。对于A A、B B选项，它的表达是选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如同时是氮源，如NH4HCO3NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C C选项，选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；作为自养型微生物的碳源；NaHCO3NaHCO3，可作为自养型微生物的，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而碳源和无机盐；而NaClNaCl则只能提供无机盐。对于则只能提供无机盐。对于D D选项，无选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3NH3可为硝化细菌提可为硝化细菌提供能量和氮源。供能量和氮源。答案：答案：D【典例解析】例1关微生物营养物质的叙述中，正确47例例2 2下面对发酵工程中灭菌的理解下面对发酵工程中灭菌的理解不正确不正确不正确不正确的是的是A.A.防止杂菌污染防止杂菌污染 B.B.消灭杂菌消灭杂菌C.C.培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D.D.灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前答案：答案：B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A A说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；所以是正确的；B B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。全部微生物。C C是正确的，因为与发酵有关的所有设备是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。所接菌种也杀死。例2下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是答案：B 48编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫10g10g（NHNH4 4）2 2SOSO4 40.4g0.4gK K2 2HPOHPO4 44.0g4.0gMgSOMgSO4 49.25g9.25gFeSOFeSO4 40.5g0.5gCaClCaCl2 20.5g0.5gH H2 2O O100ml100ml例例3 3右表是某微生物培右表是某微生物培养基成分，请据此回答：养基成分，请据此回答：（1 1）右表培养基可培养）右表培养基可培养的微生物类型是的微生物类型是 。（2 2）若不慎将过量）若不慎将过量NaClNaCl加入培养基中。加入培养基中。如不想浪费此培养基，如不想浪费此培养基，可再加入可再加入 .用于培养用于培养 。自养型微生物自养型微生物 含碳有机物含碳有机物 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 编号成分含量粉状硫10g（NH4）2SO40.4gK249（3 3）若除去成分）若除去成分，加入（，加入（CH2OCH2O），），该培养基可用于培养该培养基可用于培养 。（4 4）表中营养成分共有）表中营养成分共有 类。类。（5 5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是 。（6 6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是 。（7 7）若右表培养基用于菌种鉴定，应）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分该增加的成分 。固氮微生物固氮微生物 3 调整调整pHpH 依微生物的生长需要确定依微生物的生长需要确定 琼脂（或凝固剂）琼脂（或凝固剂）（3）若除去成分，加入（CH2O），该培养基可用于培养 50