中药抗肿瘤作用分子机制研究进展

中药抗肿瘤作用分子机制中药抗肿瘤作用分子机制研究进展研究进展从天然物质中寻找毒副作用小、安全有从天然物质中寻找毒副作用小、安全有效的抗肿瘤药物为近年的研究热点。中效的抗肿瘤药物为近年的研究热点。中药及其有效成分抗肿瘤作用的分子机制药及其有效成分抗肿瘤作用的分子机制研究取得较大进展研究取得较大进展,可通过诱导细胞凋亡、可通过诱导细胞凋亡、细胞毒性作用、调节细胞信号转导、诱细胞毒性作用、调节细胞信号转导、诱导细胞分化、逆转多药耐药、抑制端粒导细胞分化、逆转多药耐药、抑制端粒酶活性等机制发挥抗肿瘤作用。酶活性等机制发挥抗肿瘤作用。抗肿瘤药物发展的重点之一是从天然物抗肿瘤药物发展的重点之一是从天然物质中寻找活性成分。近年来质中寻找活性成分。近年来,人们将中药人们将中药及其提取成分用于抗肿瘤作用的研究及其提取成分用于抗肿瘤作用的研究,对对其分子机制有了不少新的发现。现综述其分子机制有了不少新的发现。现综述中药体外抗肿瘤作用分子机制的研究进中药体外抗肿瘤作用分子机制的研究进展展.1诱导细胞凋亡诱导细胞凋亡 已逐渐认识到线粒体是细胞凋亡的已逐渐认识到线粒体是细胞凋亡的“中中心执行者心执行者”,某些与凋亡相关的基因产物某些与凋亡相关的基因产物(蛋白质和酶蛋白质和酶)均可定位于线粒体。在细均可定位于线粒体。在细胞凋亡的诱导期胞凋亡的诱导期,线粒体的结构和功能就线粒体的结构和功能就开始发生一些特征性的变化。不少中药开始发生一些特征性的变化。不少中药成分是通过线粒体途径诱导细胞凋亡。成分是通过线粒体途径诱导细胞凋亡。等等1用人参皂甙的细菌代谢产物处用人参皂甙的细菌代谢产物处理人肝癌理人肝癌2细胞后细胞后,可见典型的可见典型的细胞凋亡现象细胞凋亡现象.检测到检测到-3及及-8活性升高活性升高;线粒体跨膜电位消减线粒体跨膜电位消减,细胞细胞色素释放色素释放;胞质因子如、裂胞质因子如、裂解解,转入线粒体转入线粒体.而此药不能诱导而此药不能诱导从大鼠分离的正常肝细胞凋亡。从大鼠分离的正常肝细胞凋亡。等等2报道报道,-常青藤素诱导鼠白血常青藤素诱导鼠白血病病388细胞凋亡的重要机制是降低细胞细胞凋亡的重要机制是降低细胞内谷胱甘肽和蛋白硫醇含量内谷胱甘肽和蛋白硫醇含量,增加活性氧的增加活性氧的产生产生,导致线粒体功能紊乱。导致线粒体功能紊乱。有些中药成分可通过其他途径诱导细胞有些中药成分可通过其他途径诱导细胞凋亡。白藜芦醇只诱导凋亡。白藜芦醇只诱导53表达阳性的表达阳性的2细胞凋亡细胞凋亡,而对而对53表达阴性表达阴性的的3细胞无此效应细胞无此效应,提示它可能提示它可能是通过是通过53途径诱导凋亡的。途径诱导凋亡的。等等3报道大黄素可诱导肝癌细胞凋亡报道大黄素可诱导肝癌细胞凋亡,并观察到凋亡相关因子并观察到凋亡相关因子53、21、-3水平升高。水平升高。等等4报道吴茱萸碱可破坏报道吴茱萸碱可破坏-2和基因表达的平衡和基因表达的平衡,通过通过途径诱导人宫颈癌细胞凋亡途径诱导人宫颈癌细胞凋亡.2细胞毒作用细胞毒作用2.1抑制、蛋白质合成抑制、蛋白质合成许多抗肿瘤和扶正中药是通过改变癌细胞许多抗肿瘤和扶正中药是通过改变癌细胞和蛋白质代谢来发挥作用的。冬凌和蛋白质代谢来发挥作用的。冬凌草甲素可抑制肿瘤细胞的、草甲素可抑制肿瘤细胞的、及蛋白质的合成及蛋白质的合成,其机制可能是抑制了其机制可能是抑制了聚合酶聚合酶的活性。等的活性。等5报道紫报道紫云英根水提液能抑制胃癌及云英根水提液能抑制胃癌及细胞生长细胞生长,并可观测到细胞的并可观测到细胞的合成受到抑制合成受到抑制,而未出现凋亡。而未出现凋亡。2.2拓扑异构酶抑制剂拓扑异构酶抑制剂真核细胞的拓扑结构由两种关键真核细胞的拓扑结构由两种关键拓扑异构酶调节拓扑异构酶调节,它们在复制、转它们在复制、转录、重组录、重组,以及在形成正确的染色体结构、以及在形成正确的染色体结构、染色体分离、浓缩中发挥重要作用染色体分离、浓缩中发挥重要作用,如喜如喜树碱化合物即为拓扑异构酶树碱化合物即为拓扑异构酶抑制剂抑制剂,鬼鬼臼毒素类药物为拓扑异构酶臼毒素类药物为拓扑异构酶抑制剂。抑制剂。研究证实绿茶中提取的表没食子儿茶精研究证实绿茶中提取的表没食子儿茶精-3-没食子酸没食子酸(-)-3-,可抑制拓扑异构酶可抑制拓扑异构酶、的活的活性。性。有些中药成分阻断肿瘤细胞有丝分裂过程有些中药成分阻断肿瘤细胞有丝分裂过程,或是通过抑制微管蛋白聚合使细胞分裂停或是通过抑制微管蛋白聚合使细胞分裂停滞于有丝分裂中期。紫杉醇即为此类药物。滞于有丝分裂中期。紫杉醇即为此类药物。等等66用丹参中分离的用丹参中分离的处理多种人类肿瘤细胞株后处理多种人类肿瘤细胞株后,可观察到细胞周期受阻于有丝分裂期可观察到细胞周期受阻于有丝分裂期,免免疫化学研究显示细胞内微管网络发生改变疫化学研究显示细胞内微管网络发生改变,实验表明它能够抑制微管聚合。实验表明它能够抑制微管聚合。等等77报道紫花牡荆素能使报道紫花牡荆素能使细胞停滞于细胞停滞于2 2期期,可观测到纺锤体断裂可观测到纺锤体断裂,提示此药具有抗有丝分裂活性的作用。提示此药具有抗有丝分裂活性的作用。3 3调节细胞信号转导调节细胞信号转导3.13.1蛋白偶联受体信号转导途径蛋白偶联受体信号转导途径蛋白接受信号蛋白接受信号,通过胞内第二信使激活通过胞内第二信使激活蛋白激酶引起一系列生理效应。蛋白激酶蛋白激酶引起一系列生理效应。蛋白激酶包括依赖性的蛋白激酶包括依赖性的蛋白激酶()、依赖的蛋白激酶等。、依赖的蛋白激酶等。蛋白与鸟苷三磷酸蛋白与鸟苷三磷酸()结合后还可激结合后还可激活磷脂酶活磷脂酶,水解磷酸肌醇为三磷酸肌醇水解磷酸肌醇为三磷酸肌醇(3)3)和二酰基甘油和二酰基甘油(),),作用于作用于2+2+和蛋白激酶和蛋白激酶()。一一般般认认为为-与与-途途径径为为一一种种动动态态的的调调控控关关系系,前前者者对对细细胞胞增增殖殖起起负负调调节节作作用用,促促进进其其分分化化,而而后后者者相相反反。白白龙龙片片可可使使人人胃胃癌癌细细胞胞内内水水平平和和活活性性升升高高、含含量量与与活活性性下下降降。等等 8用用植植物物 的的水水提提液液和和提提纯纯的的主主要要成成分分去去甲甲二二氢氢煎煎创创木木脂脂酸酸作作用用于于淋淋巴巴瘤瘤-5147细细 胞胞,结结果果显显示示水水提提液液能能升升高高细细胞胞内内水水平平,同同时时还还阻阻断断了了通通路路和和 2+的的内内流流,抑抑 制制细细胞胞增增殖殖,而而去去甲甲二二氢氢煎煎创创木木脂脂酸酸的的抗抗肿肿瘤瘤作作 用用 只只 与与 的的 抑抑 制制 相相 关关。3.2酶偶联受体信号转导途径酶偶联受体信号转导途径酶偶联受体信号通路主要通过蛋白质特酶偶联受体信号通路主要通过蛋白质特定氨基酸残基的磷酸化级联反应来传递定氨基酸残基的磷酸化级联反应来传递信息信息,一些受体具有酪氨酸激酶活性一些受体具有酪氨酸激酶活性,而而且有些原癌基因成员本身就是蛋白激酶。且有些原癌基因成员本身就是蛋白激酶。在大多数肿瘤中在大多数肿瘤中,酪氨酸激酶活性升高酪氨酸激酶活性升高,许多研究发现黄酮类化合物能抑制此类许多研究发现黄酮类化合物能抑制此类激酶活性。丝裂原激活的蛋白激酶激酶活性。丝裂原激活的蛋白激酶()磷酸化级联反应是一条重要的信号磷酸化级联反应是一条重要的信号转导通路转导通路,与细胞的增殖、分化密切相关。与细胞的增殖、分化密切相关。包括包括3组组:-端激酶端激酶()、细胞外信号调节激酶、细胞外信号调节激酶()和和38激酶。可抑制肿瘤细激酶。可抑制肿瘤细胞酪氨酸激酶和的活性胞酪氨酸激酶和的活性,同时降同时降低原癌基因和的水平。低原癌基因和的水平。等等9报道紫草素能抑制人表皮报道紫草素能抑制人表皮样癌细胞生长样癌细胞生长,其机制与降低表皮生长因其机制与降低表皮生长因子受体子受体()、蛋白酪氨、蛋白酪氨酸激酶磷酸化水平酸激酶磷酸化水平,升高的水平有升高的水平有关。本身无酶活性的酪氨酸激酶偶联受关。本身无酶活性的酪氨酸激酶偶联受体偶联并激活胞内蛋白激酶体偶联并激活胞内蛋白激酶继续作用于下游的信号蛋白继续作用于下游的信号蛋白,其中最重要其中最重要的为信号转导和转录激活的为信号转导和转录激活()。等等10报道葫芦报道葫芦素素能快速降低能快速降低-转化的转化的33细胞和人类肺腺癌细胞和人类肺腺癌549细胞中的磷细胞中的磷酸酪氨酸酸酪氨酸3的水平的水平,也能够降低也能够降低磷酸化水平磷酸化水平,但不抑制其他信号分但不抑制其他信号分子子,如或如或,表明葫芦素表明葫芦素为为-3途径的选择性抑制剂。途径的选择性抑制剂。4诱导细胞分化诱导细胞分化恶性肿瘤细胞在形态、功能等方面都类似恶性肿瘤细胞在形态、功能等方面都类似于未分化的胚胎细胞于未分化的胚胎细胞,分化诱导剂可使肿分化诱导剂可使肿瘤细胞向正常成熟方向逆转瘤细胞向正常成熟方向逆转,一般不直接一般不直接杀伤肿瘤细胞。已发现有多种中药成分可杀伤肿瘤细胞。已发现有多种中药成分可诱导肿瘤细胞分化。人参成分可促使肝癌诱导肿瘤细胞分化。人参成分可促使肝癌-7721细胞分化细胞分化,使其细胞形态使其细胞形态和超微结构趋于正常和超微结构趋于正常,分泌减少分泌减少 谷氨酰转肽酶谷氨酰转肽酶(-)及耐热性碱性磷及耐热性碱性磷酸酶酸酶()活性降低活性降低,白蛋白分泌白蛋白分泌增加且碱性磷酸酶增加且碱性磷酸酶()活性升高活性升高,并并使使211和和164表达升表达升高。高。等等11报道茯苓中的多糖片段可报道茯苓中的多糖片段可使使66.6%的人淋巴瘤的人淋巴瘤937细胞和细胞和49.4%的人早幼粒白血病的人早幼粒白血病-60细胞诱导分化细胞诱导分化为成熟的单核细胞和巨噬细胞为成熟的单核细胞和巨噬细胞,表现出正表现出正常的生理功能且表达标志性表面抗原常的生理功能且表达标志性表面抗原11、68和和14;同时可检测到同时可检测到-和和-水平升高。水平升高。等等12用黑豆中提取的多糖成分加入用用黑豆中提取的多糖成分加入用单核细胞制备而成的条件培养基单核细胞制备而成的条件培养基,可诱导可诱导937细胞分化细胞分化,同时测得、白介同时测得、白介素等水平升高素等水平升高,而单独用多糖或条件培养而单独用多糖或条件培养基处理细胞无此效果基处理细胞无此效果,说明多糖成分可能说明多糖成分可能是在条件培养基中激活了单核细胞的免疫是在条件培养基中激活了单核细胞的免疫反应反应,从而抑制从而抑制937细胞增殖和诱导分细胞增殖和诱导分化。化。5逆转多药耐药逆转多药耐药肿瘤细胞的多药耐药肿瘤细胞的多药耐药()是导致肿是导致肿瘤化疗失败的主要原因之一。的瘤化疗失败的主要原因之一。的发生机制非常复杂发生机制非常复杂,多药耐药基因多药耐药基因-1(-1)编码的编码的-糖蛋白糖蛋白(-)高表高表达被认为是产生最主要的原因。达被认为是产生最主要的原因。粉防已碱是目前报道最多的中药单体逆粉防已碱是目前报道最多的中药单体逆转剂转剂,可增加抗肿瘤药物在耐药细胞内积可增加抗肿瘤药物在耐药细胞内积聚聚,而对敏感细胞作用不明显。等而对敏感细胞作用不明显。等13报道人参皂甙报道人参皂甙(3)能促进耐长春能促进耐长春新碱的人口腔上皮癌新碱的人口腔上皮癌20细胞内细胞内123的积聚的积聚,逆转细胞对多种抗肿瘤逆转细胞对多种抗肿瘤药物的耐药。药物的耐药。实验显示人参皂甙实验显示人参皂甙(3)不是通过抑制不是通过抑制r-1基因表达和基因表达和-水平发挥作水平发挥作用用,而是与抗肿瘤药物竞争性结合而是与抗肿瘤药物竞争性结合-,从而阻止药物流出。等从而阻止药物流出。等14用用20种自然黄酮类处理乳腺癌耐药种自然黄酮类处理乳腺癌耐药蛋白过度表达的蛋白过度表达的-7细胞细胞,大多黄酮大多黄酮类能增加类能增加-7细胞内的蒽类药物积细胞内的蒽类药物积聚聚,逆转蒽类耐药。大量研究证实许多中逆转蒽类耐药。大量研究证实许多中药复方及一些有效单药还可作用于谷胱药复方及一些有效单药还可作用于谷胱甘肽转硫酶、拓扑异构酶等逆转肿瘤细甘肽转硫酶、拓扑异构酶等逆转肿瘤细胞耐药胞耐药,起到增效减毒的作用。起到增效减毒的作用。6抑制端粒酶活性抑制端粒酶活性端粒酶具有逆转录酶活性端粒酶具有逆转录酶活性,能以自身能以自身亚单位为模板合成端粒亚单位为模板合成端粒,维持细维持细胞染色体端粒长度胞染色体端粒长度,从而稳定染色体。端从而稳定染色体。端粒酶在分化的体细胞中检测不到粒酶在分化的体细胞中检测不到,但是在但是在绝大多数肿瘤细胞中端粒酶则重新被激活绝大多数肿瘤细胞中端粒酶则重新被激活,使细胞永生化。一些中药可作用于端粒酶使细胞永生化。一些中药可作用于端粒酶,如复方健脾理气方、扶正抑癌汤等如复方健脾理气方、扶正抑癌汤等,淫羊淫羊藿苷也可抑制端粒酶活性藿苷也可抑制端粒酶活性,同时上调同时上调-21、下调、下调-的表达水平。还有研的表达水平。还有研究表明可抑制多种肿瘤细胞的端究表明可抑制多种肿瘤细胞的端粒酶活性。粒酶活性。等等15用苦参碱作用于人髓用苦参碱作用于人髓样红白血病样红白血病562细胞数天后细胞数天后,检测到细检测到细胞端粒酶活性显著降低胞端粒酶活性显著降低,同时伴随着细胞同时伴随着细胞的明显分化的明显分化,推测苦参碱可能抑制了端粒推测苦参碱可能抑制了端粒酶的模板或蛋白质亚单位等组分酶的模板或蛋白质亚单位等组分的一个或多个基因的表达。等的一个或多个基因的表达。等16用蒜素作用于人胃癌用蒜素作用于人胃癌 7901细胞细胞,结果显示端粒酶活性被抑制结果显示端粒酶活性被抑制,并且并且出现细胞凋亡。出现细胞凋亡。7结语结语中药抗肿瘤作用具有多靶点、多环节、中药抗肿瘤作用具有多靶点、多环节、多效应的特点多效应的特点,同时其毒副作用低同时其毒副作用低,能提能提高机体免疫力高机体免疫力,不易产生耐药性不易产生耐药性,为近年为近年来研究的热点。中药抗肿瘤作用的分子来研究的热点。中药抗肿瘤作用的分子机制研究虽有较大进展机制研究虽有较大进展,但仍有待进一步但仍有待进一步深入研究深入研究,如中药诱导凋亡、分化及抑制如中药诱导凋亡、分化及抑制端粒酶活性的研究大部分停留在对现象端粒酶活性的研究大部分停留在对现象的观察及个别指标的检测上的观察及个别指标的检测上;中药逆转中药逆转的研究作用靶点较单一的研究作用靶点较单一,主要集中在主要集中在谷胱甘肽及其相关酶活性和谷胱甘肽及其相关酶活性和-表达表达上。抗肿瘤中药的开发和研究应与现代上。抗肿瘤中药的开发和研究应与现代细胞与分子生物学结合起来细胞与分子生物学结合起来,进一步探明进一步探明其作用机制和靶点。其作用机制和靶点。