三七总皂苷的纯化工艺探微

三七总皂苷的纯化工艺探微摘要】三七总皂苷中含有很多单体皂苷，对凝血时间的延长、血管的扩张、心 肌耗氧量的降低、自由基的清除、血小板凝集的抑制具有一定的药理作用。据我 国有关文献的报道，可以运用大孔吸附树脂法对富集的三七总皂苷进行纯化，但 是由于实际的操作过程中，缺乏较为全面系统的研究，使得三七总皂苷的纯化的 工艺参数和条件尚不明确，大孔吸附树脂法仅能够去除提取液中的淀粉、糖类等， 对三七总皂苷的色素去除效果并不理想，对具体的工艺参数和纯化条件还需要进 一步的完善。【关键词】纯化工艺 提取液 三七中皂苷【中图分类号】R94【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）11-0391-02 在我国的广西、云南和四川等地盛产三七。作为三七的主要活性成分，三七 总皂苷中含有很多单体皂苷，对凝血时间的延长、血管的扩张、心肌耗氧量的降 低、自由基的清除、血小板凝集的抑制具有一定的药理作用。下文试验中将通过 对三七材料的运用，以大孔吸附树脂法对三七提取液进行有效的分离和纯化，全 面系统的考察纯化过程中的影响因素，以得到高纯度的三七总皂苷。一、三七纯化工艺的实验原理及器材运用（一）纯化工艺所需材料、试剂及仪器（1）实验选取经某大学药学院鉴定后，确定总皂苷含量为 8.07%的三七药材 中国药制品鉴定所鉴定的人参皂苷 Re 的对照品；分析纯冰醋酸、香草醛和高氯 酸。（2）某生物科技有限公司提供的型号为W201B的恒温水浴锅，和旋转蒸发 器；河南太康科教器材厂提供的循环水式真空泵；军事医学实验仪器厂提供的冷 冻干燥剂；UV-9100型紫外可见分光光度计；某材料化工玻璃厂提供的色谱柱； D-101 型打孔吸附树脂；（二）对各种材料含量的测定及工艺条件的筛选（1）制备标准曲线对照品人参皂苷Re的精密称取量约为6.0mg,经甲醇定容后使其至10mL。对上述溶液进行适量的精密吸取，在常温的条件下使溶液挥干，将配置好的香兰素冰醋酸以0.2 mL5%的比例加入溶液中，同时要加入0.8 mL的高氯酸，在60的 水浴条件下进行 15 分钟， 2 分钟的流水冷却时间，最后精确加入 5mL 的冰醋酸 进行充分摇匀与 550nm 对吸光度进行检测。（2）测定三七总皂苷的方法称取质量约为20mg的三七中皂苷样品，经甲醇定容后使其至10mL。运用0.45um 的膜进行过滤，除去初滤液，对续滤液精密收集，在标准曲线制备样的规 定下，对吸收度认真测定，并对样品的含量进行计算。（3）称取8目40目的三七粉末，提取条件是：提取三次10倍量70%的乙 醇回流，每次提取要进行1.5h然后将滤液合并，在减压的条件下使其浓缩到一定 的体积，后对总皂苷的质量测定为 23.49mg/ mL。二、三七纯化工艺的实验步骤（1）确定吸附容量对三七样品液分别吸取30 mL上柱，水洗流出液至没有molish反应，以30%、50%、70%、90%的乙醇溶液120mL进行梯度洗脱，流速控制为1.5mL/min,分别收 集 4 份 30mL 的洗脱液，对共有的 16 份进行编号后，对总皂苷含量进行测定，得 出其吸附容量。实验结果分析如表 1:表1(2)洗脱溶媒作用对三七样品液分别吸取30 mL上柱，使用蒸馏水量分别为65mL、85 mL、105 mL,70%的 乙醇120mL洗脱，分段收集洗脱结果，减压浓缩后进行冷冻干燥，对总皂苷含量进行测定, 实验结果分析如表2:表2实验结果表明3中洗脱条件下，对解吸洗脱溶媒的确定为70%的乙醇用量90mL。 结语：大孔吸附树脂法对三七总皂苷的色素去除效果并不理想，具体的工艺参数和纯化 条件还需要进一步的完善。参考文献1 周家明,高明菊,赵爱,马妮,崔秀明,朱琳.鲜三七根茎中提取三七总皂苷的纯化及脱色工艺研 究J.科技创新导报.2011(14)2 郑军献，浦锦宝湖轶娟，梁卫青,魏克民大孔吸附树脂分离纯化白芍总皂苷的研究J.医学研 究杂志. 2010(11)3 陈新艳，牛泱平浙江七叶树种子中七叶皂苷的分离纯化J.中药新药与临床药理.2010(03)4 孟琼,陈治宇三七总皂苷提取分离及分析方法研究进展J.承德医学院学报.2010(02)