《肌糖原的酵解作用》PPT课件

实 验 八 肌 糖 原 的 酵 解 作 用 目 的 与 要 求n 了 解 糖 酵 解 作 用 在 糖 代 谢 中 的 地 位 和 生 理 意 义n 掌 握 鉴 定 糖 酵 解 作 用 的 原 理 和 方 法 。 n 动 物 淀 粉 ， 是 动 物 的 糖 贮 存 库 (体 内 能 源 库 )。糖 原 的 结 构 与 支 链 淀 粉 有 基 本 相 同 的 结 构 ， 只是 糖 原 的 分 支 更 多 。n 在 动 物 的 肝 脏 和 肌 肉 中 含 量 最 大 ， 当 动 物 血 液中 葡 萄 糖 含 量 较 高 时 ， 就 会 结 合 成 糖 原 储 存 于肝 脏 中 ， 当 葡 萄 糖 含 量 降 低 时 ， 糖 原 就 可 分 解成 葡 萄 糖 而 供 给 机 体 能 量 。糖 原 糖 酵 解 (EMP)途 径 是 指 细 胞 在 胞 浆 中 分 解 葡 萄 糖 生 成 丙 酮 酸 的 过 程 ，并 伴 有 少 量 ATP的 生 成 。 在 缺 氧 条 件 下 丙 酮 酸 被 还 原 为 乳 酸 (lactate)称 为糖 酵 解 。 有 氧 条 件 下 丙 酮 酸 可 进 一 步 氧 化 分 解 生 成 乙 酰 CoA进 入 三 羧 酸 循 环 ， 生 成 CO2和 H2O。 肌 糖 原 的 酵 解 作 用 ： 即 肌 糖 原 在 缺氧 的 条 件 下 ， 经 过 一 系 列 的 酶 促 反 应 ，最 后 转 变 成 乳 酸 的 过 程 。 肌 糖 原 的 酵 解 作 用 是 糖 类 供 给 组 织能 量 的 一 种 方 式 。 1. 糖 原 ( 糖 原 磷 酸 化 酶 ) 1- 磷 酸 - 葡 萄 糖 6- 磷 酸 葡 萄 糖 ， 进 入 糖 酵 解 。 n 1/n(C6H10O5)n+H2O 2CH3CHOHCOOH 无 O2 CH CHCOOH CH CH + HCOOH浓H SOOH2 3O4 2 2. 乳 酸 的 鉴 定 （ 灵 敏 度 1 5微 克 /毫 升 ） CH CH 3OHO + HOHOH C C H3 + H O2紫 红 色 催 化 酵 解 作 用 的 酶 系 统 全 部 存 在 于 肌肉 提 取 液 中 ， 而 催 化 呼 吸 作 用 （ 即 三 羧 酸循 环 ） 的 酶 系 统 ， 则 集 中 在 线 粒 体 中 ， 因此 可 用 淀 粉 代 替 糖 原 。 n 影 响 显 色 的 因 素 1. 糖 的 影 响 加 Ca(OH)2 和 CuSO4去 除 。 2. 蛋 白 质 加 三 氯 乙 酸 (TCA)沉 淀 。 3. 无 机 离 子 Mg2+是 许 多 酶 的 辅 助 因 子 , 必 定 影 响 酶促 反 应 速 度 。 Cu2+可 增 强 乳 酸 的 颜 色 反 应 。 试 剂 和 器 材n 试 剂 ： 0.5%淀 粉 溶 液 ； 20%TCA溶 液 ， 1/15M磷 酸 缓 冲 液 （ pH7.4） ， 氢 氧 化 钙 （ 粉 末 ),饱 和 硫 酸 铜 ； 浓 硫 酸 ； 对 羟 基 联 苯 试 剂 。 n 器 材 37 恒 温 水 浴 ， 沸 水 浴 ， 冰 水 浴 。 n 材 料 兔 肉 糜 。 注 意 事 项1. 加 入 少 许 液 体 石 蜡 隔 绝 空 气 ， 以 1毫 升 管 为 宜 ；2. 37 保 温 1小 时 ；3.为 使 糖 沉 淀 完 全 ， 放 置 30分 钟 并 不 时 振 荡 （ 封 口 膜 ） ；4.在 乳 酸 测 定 中 ， 试 管 必 须 洁 净 、 干 燥 ， 防 止 污 染 ； 4支试 管 洗 净 放 入 烘 箱 烘 干5.所 用 滴 管 大 小 尽 可 能 一 致 ， 减 少 误 差 。 若 显 色 较 慢 ， 则可 将 试 管 放 入 37 恒 温 水 浴 中 保 温 10min， 再 比 较 各 管颜 色 。6.第 二 次 过 滤 ， EP管 离 心 思 考 题n 人 体 和 动 植 物 体 中 糖 的 贮 存 形 式 是 什 么 ？实 验 时 ， 为 什 么 可 以 用 淀 粉 代 替 糖 原 ？n 试 述 糖 酵 解 作 用 的 生 理 意 义 ？