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微 生 物 基 础 知 识 一 微 生 物 :( microorganism,microbe ) 是 一 切 肉 眼 看 不 见 或 看 不清 的 微 小 生 物 的 总 称 。 它 们 都 是 一 些 个 体 小 (0.1mm)、构 造 简 单 的 低 等 生 物 。 原 核 类 : 细 菌 , 放 线 菌 , 蓝 细 菌 , 支 原 体 , 立 克 次 氏 体 , 衣 原 体 等 。真 核 类 : 真 菌 (酵 母 菌 , 霉 菌 , 蕈 菌 )非 细 胞 类 : 病 毒 , 亚 病 毒二 按 进 化 地 位 分 三 微 生 物 的 特 点 : 体 积 小 ,面 积 大 : 单 位 体 积 所 占 有 的 表 面 积 称 为 比 面值 。 吸 收 多 , 转 化 快 : Escherichia coli( 发 酵 乳 糖 的 细 菌 )在 1小 时 内 可 分 解 其 自 重 1000 10000倍 的 乳 糖 ; Candida utilis (产 朊 假 丝 酵 母 ) 合 成 蛋 白 质 的 能 力 比 食 用 公 牛 强 10万倍 生 长 旺 , 繁 殖 快 : ( 二 分 裂 为 主 ) 微 生 物 有 惊 人的 繁 殖 速 度 , 大 多 数 微 生 物 几 十 分 钟 内 就 可 以 繁 殖 一 代 分 布 广 ,种 类 多 : 自 然 界 中 到 处 都 有 , 达 到 无 孔 不入 的 地 步 , 只 要 条 件 合 适 , 他 们 就 可 以 “ 随 遇 而 安 ” , 如 水 、空 气 、 土 壤 等 , 土 壤 中 的 数 量 最 多 。 适 应 性 强 , 易 变 异 : 是 良 种 选 育 和 防 止 菌 种 衰 退 的理 论 依 据 。 菌 落 ( colony ) : 由 单 个 菌 细 胞 或 几 个 同 种 菌 细 胞 在 培 养 基 上 长成 肉 眼 可 见 的 菌 落 , 每 个 菌 落 就 是 1CFU。四 细 菌 (bacteria): 狭 义 的 细 菌 是 指 一 类 细 胞 细 短 ( 直 径 0.5m,长 度 0.5-5m) , 结 构 简 单 、 胞 壁 坚 硬 、 多 以 二 分 裂方 式 繁 殖 和 水 生 性 较 强 的 原 核 生 物 ; 广 义 的 细 菌 则是 指 所 有 原 核 生 物 。 菌 落 单 位 CFU 细 菌 按 形 态 分 类球 形 杆 状 弧 形 或 螺 旋 形 菌 落 特 征 : 包 括 菌 落 大 小 , 形 状 , 隆 起 形 状 ,边 缘 情 况 , 表 面 状 态 , 表 面 光 泽 , 颜 色 , 透 明 程 度 等 。 影 响 菌 落 特 征 的 因 素 : 同 一 种 微 生 物 菌 落有 着 相 似 的 菌 落 特 征 , 取 决 于 菌 落 的 细 胞 结 构 和生 长 行 为 。 细 菌 按 结 构 ( 革 兰 氏 染 色 ) 分 类G+ G- 革 兰 氏 染 色 法 : 初 染 ( 结 晶 紫 1min) 媒染 ( 碘 液 1min) 脱 色 (酒 精 15-20s) 复 染 ( 沙黄 1min) 细 菌 的 一 般 结 构 细 菌 的 特 殊 结 构 : 荚 膜 鞭 毛 纤 毛 芽 孢 五 获 得 单 个 菌 落 的 方 法 : 倾 注 平 板 法 、 涂 布 法 、 平 板 划 线 、 富 集 培养 法 六 液 体 接 种 培 养 七 影 响 微 生 物 生 长 的 主 要 因 素 : 温 度 是 微 生 物 生 长 的 重 要 因 素 , 最 适温 度 并 不 等 于 生 长 率 最 高 的 培 养 的 温 度 。 氧 气 把 微 生 物 分 成 好 氧 菌 、 厌 氧 菌 、兼 性 厌 氧 菌 PH 八 常 用 灭 菌 消 毒 方 法 1、 干 热 灭 菌 法火 焰 灼 烧 法 、 烘 箱 内 热 空 气 灭 菌 法 (160-170 ) 常 压 下加 压 下2、 湿 热 灭 菌 法 巴 氏 消 毒 法煮 沸 消 毒 法间 歇 灭 菌 法常 规 加 压 灭 菌 法连 续 加 压 灭 菌 法LTH 法HTST法 九 培 养 基 根 据 微 生 物 对 营 养 物 质 需 要 , 经 过 人 工 配 制 适 合 微生 物 生 长 繁 殖 和 积 累 代 谢 产 物 的 营 养 基 质 。 ( 为 微 生 物生 长 繁 殖 提 供 必 要 营 养 物 质 的 物 质 ) 。 分 类 : 按 原 料 来 源 a.天 然 培 养 基 b.合 成 培 养 基 c.半 合 成 培 养 基 根 据 物 理 性 状 a.液 体 培 养 基 b.固 体 培 养基 c.半 固 体 培 养 基 根 据 用 途 a.基 础 培 养 基 b.厌 氧 培 养 基 c.加 富 培 养 基 d.特 殊 培 养 基 e.鉴 别 培 养 基 f.生 化实 验 培 养 基 g.选 择 培 养 基 h.增 菌 培 养 基 十 涂 抹 和 空 气 沉 降 试 验 方 法 涂 抹 采 样 方 法 用 5cm 5cm灭 菌 规 格 板 放 在 被 检 物 体 表 面 , 用 浸 有 无菌 的 生 理 盐 水 采 样 液 的 棉 拭 子 1支 , 在 规 格 板 内 横 竖 往 返个 涂 抹 5次 , 并 随 之 转 动 棉 试 子 , 连 续 采 样 14个 规 格 版 面子 直 接 涂 抹 物 体 采 样 , 若 采 样 物 体 表 面 有 消 毒 剂 残 留 时 ,采 样 时 含 相 应 的 中 和 剂 。 采 样 面 积 : 取 100cm2 空 气 沉 降 通 过 自 然 沉 降 原 理 收 集 在 空 气 中 的 生 物 粒 子 于 培 养 基平 皿 , 在 适 宜 的 条 件 下 让 其 繁 殖 到 可 见 的 菌 落 进 行 计 数 ,以 平 板 培 养 皿 中 的 菌 落 数 来 判 断 洁 净 环 境 内 的 微 生 数 ,并 以 此 来 评 定 洁 净 室 的 洁 净 度 。 十 一 食 品 中 大 肠 菌 群 计 数 ( GB 4789.3-2010) 大 肠 菌 群 coliforms: 在 一 定 条 件 下 能 发 酵乳 糖 、 产 酸 产 气 的 需 氧 和 兼 性 厌 氧 革 兰 氏 阴 性无 芽 孢 杆 菌 。 2.检 验 方 法 : 9管 发 酵 法 3.操 作 步 骤 : 样 品 的 稀 释 初 发 酵 实 验 复 发 酵 实 验 4.大 肠 菌 群 最 可 能 数 (MPN)的 报 告 : 检 索 MPN表 谢 谢 !
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