动物微生物病毒的增殖和培养

病毒的增殖和培养 学习目标 知识目标 理解复制的定义 理解病毒复制的基本过程 掌握病毒的人工培养方式及应用 能力目标 具备病毒分离培养及利用培养特性进行病毒鉴 定的理论基础 主要内容 病毒的增殖 复制的概念 复制的基本过程 病毒的培养 动物接种 禽胚接种 组织培养 重点与难点 重点 病毒复制的基本过程 病毒的人工培养方式 难点 病毒的复制过程 病毒的增殖方式 复制 复制概念 是指病毒利用宿主细胞内的原料、 能量、酶与场所，来合成病毒的核 酸和蛋白质，然后装配成熟并释放 到细胞外的过程，称为复制。 病毒复制的基本过程 吸附 穿入 脱壳 生物合成 装配与释放 吸附 静电吸附 非特异吸附 可逆 与受体结合 病毒与宿主细胞之间 有选择性和有特殊亲 和力的特异性吸附 不可逆 穿入 有囊膜病毒的穿入 囊膜与细胞膜融合 吞饮作用 无囊膜病毒的穿入 直接穿入 吞饮作用 脱壳 多数病毒的脱壳与穿入同时进行的。 不同病毒的脱壳又各有特色，例如： 新城疫病毒经溶酶体酶的作用脱壳。 痘病毒的脱壳分为两个阶段进行。 呼肠孤病毒只脱去外层衣壳，内层衣壳不脱去，形成 亚病毒颗粒。 小 RNA病毒在吸附的同时，就发生衣壳蛋白消失，即 吸附的同时就发生了脱壳。 生物合成 生物合成即病毒遗传信息的控制下合成病 毒的各种组成成分。 早期 :病毒特异性酶的合成 病毒核酸复制 病毒结构蛋白质合成 装配 新合成的病毒核酸和 病毒蛋白在感染的细 胞内组装成新的子代 病毒。 成熟与释放 成熟 由新合成的病毒成分装配成完整的病毒。 释放 无囊膜的病毒：细胞完全裂解释放 有囊膜的病毒：出芽释放 成熟与释放 有囊膜病毒的释放 囊膜来自于细胞膜 有囊膜病毒的释放 囊膜来自于细胞核 核膜 无囊膜病毒的释放 塞里基森林病毒的出芽释放 HIV 的出芽与成熟 艾滋病毒的出芽释放 正常的 T.C 艾滋病毒感染的 T.C 艾滋病毒的出芽释放 病毒复制的过程 有囊膜病毒的复制 病毒的培养方式 动物接种 禽胚接种 组织培养 动物接种 动物选择 本动物 实验动物 最理想的是 GF动物或 SPF动物。 病毒增殖结果观察 动物死亡、症状、病变等。 动物接种的用途 病原学检查，传染病诊断，疫苗生产及疫苗 效力检验等。 禽胚培养 禽胚选择 最好选择 SPF胚 病毒增殖结果观察 常见病变有死亡，充血、出血或出现坏死灶， 禽胚畸形， 绒毛尿囊膜上出现痘斑。 接种途径 禽胚接种的用途 家禽传染病的诊断、病毒病原性的研究以及生 产诊断抗原和疫苗等方面。 组织培养 组织培养 细胞培养 细胞选择 增殖结果观察 优缺点 应用于病毒研究、疫苗生产和病 毒病诊断的良好方法 谢 谢！