化学发光免疫分析技术.ppt

小组成员：陈海霞 张雅妹 朱颖 祝路燕 化学发光免疫分析技术 Page 2 一、基本原理 1.1 引言 1977年 Halman将化学反应系统与免疫系统相结合创建了化 学发光免疫分析方法 (chemiluminescence immunoassay,CLIA)， 以检测抗原或抗体。 该方法既有免疫反应的特异性，又具有化学发光反应的高 敏感性。以化学发光物质为示踪物，简便、快速、重复性好， 无放射性污染， 30年来得到广泛的应用。 Page 3 化学发光免疫分析 化学发光分析系统 ： 利用化学发光物质经 催化剂的催化和氧化剂的氧化 , 形成一个激发态 的中间体 , 当这种激发态中间体回到稳定的基态 时 , 同时发射出光子 , 利用发光信号测量仪器光 量子产率。 免疫反应系统 ： 将标记物质直接标记在抗原 或抗体上 , 经过特异性反应后 ,形成抗原 - 抗 体复合物，然后进行相应标记物的检测方法进 行检测。 Page 4 化学发光 ( Chemiluminescence, CL) 是化学物质在 特定化学反应中产生的光辐射。通过高能中间体的分 解在化学反应中激发单态分子形成 , 分子被激发后是 不稳定的 , 它要释放出多余的能量而回到基态 , 其中 部分的能量以发光形式释放出来。 因此 , 任何一个化学发光反应包括两个过程 : 激 发和发光过程。一些激发态分子能量也会通过系间串 跃和系内串跃而消失 , 如图 1 所示。 化学发光基本原理 Page 5 图 1：化学发光产生的光物理过程示意图 （其中， A、 B分别代表反应物和生成物； B*是 B的激发态。 S0、 S1分别是 电子的基态和激发单线态， T1、 T2为单重及二重激发三线态。） Page 6 化学发光之所以能够用于分析测定，是因为化学发光强度与化学发光 速率相关联，因而一切影响反应速率的因素都可以作为建立测定方法的 依据。即一个化学发光过程也包括了一个化学发光反应的过程。 所以化学发光强度（ ICL）取决于化学反应的速率、激发态产物的效 率和激发态物质的发光效率。 ICL=CLdc/dt=EXEMdc/dt 对于一定的化学发光反应， CL为一定值，但化学发光测定易受化学 反应条件，如 pH值、离子强度、溶液组成、温度等的影响，影响反应速 率或任意一个量子效率的因素都会改变发光强度。 因此，在一定化学反应条件下，通过测定化学发光强度就可以测定 反应体系中某种物质的浓度。 Page 7 免疫分析基本原理 感谢您的关注