脑静脉窦栓塞动物模型﹙猪﹚的建立

脑静脉窦栓塞动物模型猪的建立山东省医学影像学研究所唐军 武乐斌 王广彬 张琰 前 言 脑静脉窦栓塞引起的脑缺血梗死和脑出血是一种脑静脉窦栓塞引起的脑缺血梗死和脑出血是一种特殊类型的脑血管疾病，死亡率高。特殊类型的脑血管疾病，死亡率高。本病致病诱因众多，临床表现多种多样，缺乏特本病致病诱因众多，临床表现多种多样，缺乏特异异 性。性。探讨脑静脉窦栓塞的发病机理，病生理的演变过探讨脑静脉窦栓塞的发病机理，病生理的演变过程，影像学表现演化规律对临床治疗具有重要意义，程，影像学表现演化规律对临床治疗具有重要意义，这些研究有这些研究有 待动物实验加以证实。待动物实验加以证实。多数学者报道试验的动物以鼠，猫，兔等小型动多数学者报道试验的动物以鼠，猫，兔等小型动物，我们选用更为理想的动物猪，设计制作一物，我们选用更为理想的动物猪，设计制作一种新的静脉窦栓塞动物模型，旨在评价其有效性，种新的静脉窦栓塞动物模型，旨在评价其有效性，可行性和优缺点。可行性和优缺点。实验动物实验动物 山东农科院配育的健康幼猪9头，2-3月龄，体重302Kg，雌雄不限材料与方法材料与方法实验器材实验器材 器械：动脉穿刺针、动脉防漏套鞘、短导丝、4F多功能导管、4 F导管鞘、0.038英寸导丝、超滑导丝 COOK铂金弹簧圈，明胶海绵,自体血凝块材料与方法实验药物盐酸氯胺酮注射液3%戊巴比妥钠溶液硫酸阿托品注射液76%泛影葡胺2%利多卡因注射液10%福尔马林肝素钠注射液生理盐水地西泮针剂20%明胶包埋液机器：lLCV-PLUS大型DSA lMARK型高压注射器lMagnetom Sonata maestro class 1.5 T超导磁共振扫描仪l Sonatom sen sation cardiac 16 排螺旋CT扫描仪 材料与方法材料与方法实验步骤 实验前准备 动静脉插管 MR、CT检查 大体标本 病理学检查 统计学分析材料与方法实验前准备 手术室温度25左右 常规介入手术准备材料与方法实验前准备及麻醉 实验动物术前禁食12h，禁饮2h 麻醉，固定 建立静脉通道材料与方法实验步骤动脉插管1：在隐动脉搏动处切开皮肤，逐层分离皮下组织、筋膜，暴露隐动脉鞘 膜。2：分离出隐动脉，用血管钳轻轻挑起，结扎隐动脉远端。12材料与方法实验步骤动脉插管3：在直视下用手术刀尖将隐动脉挑开小口，送入短导丝。4：沿短导丝送入动脉防漏套鞘，将动脉鞘和隐动脉血管壁固 定在一起，防止动脉鞘脱落。341：触摸股动脉搏动2：在股动脉内侧利用穿刺针直接穿 刺股深静脉3：拔出穿刺针针芯，见静脉 血流后送入导引导丝静脉插管123图像分析材料与方法实验步骤 对照MRV与DSA 图像，比较 栓塞后脑静脉窦的栓塞情况 及各组浅深脑静脉的显示情况。大体标本的观察与病理分析 两周后处死猪 开颅取脑 标本固定、切割 做HE 染色切片材料与方法实验步骤结 果 1.1.实验动物的麻醉效果实验动物的麻醉效果 2.实验动物栓塞情况及相关表现实验动物栓塞情况及相关表现 3.栓塞后栓塞后2DTOF MRV表现表现 实验动物的麻醉效果实验动物的麻醉效果结果1指标 戊巴比妥钠复合麻醉 氯胺酮复合麻醉 戊巴比妥钠 氯胺酮 氯胺酮安定给药途径腹腔注射静脉注射 肌肉注射肌肉注射注射部位左上腹腔耳缘静脉颈部肌肉颈部肌肉给药剂量30 mg/kg4 mg/kg 15 mg/kg0.7 mg/kg麻醉起效时间11 min立即起效 5 min 实验动物栓塞情况及相关表现 结果2动物编号栓塞部位栓塞材料DSA表现MRI表现PIG1右侧乙状窦自体血凝块及人为静脉夹层右侧乙状窦显示局部静脉夹层未见异常PIG2Rolandic静脉前12 cm明胶海绵SSS显影毛躁未见异常PIG3Rolandic静脉1个铂金弹簧圈栓塞部分充盈缺损，栓塞后方SSS显影不良，前方SSS显影清晰栓塞4 h后T2WI出现右顶叶脑回肿胀，信号增高PIG4Rolandic静脉2个铂金弹簧圈两弹簧圈间及其后方SSS显影中断，不连续T1WI右顶叶脑回肿胀、硬膜下出血PIG7Rolandic静脉1个铂金弹簧圈+明胶海绵栓塞后方SSS显影不连续，栓塞前SSS增粗，可见引流入海绵窦的侧支血管未见异常PIG5Rolandic静脉后12 cm2个铂金弹簧圈两弹簧圈间及其后方部分SSS显影不连续T1WI右顶叶脑回肿胀结果2栓塞前DSA 明胶海绵栓塞后DSA PIG2：Rolandic静脉前方明胶海绵栓塞123结果2PIG4：Rolandic静脉2个铂金弹簧圈栓塞栓塞前DSA 导管位置 栓塞后部分SSS不显影 231结果2PIG7：Rolandic静脉1个铂金弹簧圈+明胶海绵栓塞栓塞前DSA 栓塞后DSA 结果2PIG7：Rolandic静脉1个铂金弹簧圈+明胶海绵栓塞侧枝血管 结果2Rlandic静脉两个弹簧圈栓塞结果2Rlandic静脉弹簧圈加明胶海绵栓塞，弹簧圈后方见条状血栓形成。结果2Rlandic静脉弹簧圈栓塞后脑表面明显淤血 结果2大体标本左侧观 大体标本3mm层厚右面观 结果2HE染色，10 x40倍光镜 实验动物栓塞情况及相关表现 结果2动物编号栓塞部位栓塞材料 DSA表现MRI表现PIG6Rolandic静脉后12 cm2个铂金弹簧+明胶海绵两弹簧圈间及其后方SSS和部分横窦不显影T2WI右顶叶脑回肿胀信号增高，硬膜下出血PIG8直窦2个铂金弹簧圈+明胶海绵直窦不显影双顶叶、左脑干水肿，双顶叶出血PIG9直窦和窦汇2个铂金弹簧圈+明胶海绵直窦不显影，窦汇部分显示双顶叶脑水肿，脑出血结果2PIG9结果2Rolandic静脉后方栓塞组 直窦栓塞组 脑静脉窦栓塞的MR表现 T1WI、T2WI、FLAIR图像均无异常3例 T1WI图像有脑回肿胀，T2WI、FLAIR图像无异常信号，无脑室扩大2例 脑肿胀、脑室大小正常伴T2WI、FLAIR高信号1例 脑肿胀、脑室轻度扩大伴T2WI、FLAIR高信号3例 T2WI、FLAIR高信号伴脑出血2例 硬膜下出血2例 结果3.结果3.脑肿胀T1WIT2WI结果3.脑肿胀、脑室轻度扩大伴T2WI、FLAIR高信号T1WIFLAIRT2WI结果3.脑肿胀、T2WI、FLAIR高信号、脑出血T1WIFLAIRT2WI结果3.硬膜下出血T1WICT结果3.上矢状窦、直窦、窦汇完全栓塞组 ADCT2WI栓塞后 MRV表现结果4 2例MRV表现与栓塞前无明显变 化；4例在栓塞部位表现为充盈缺 损，栓塞后方上矢状窦血流信号 减弱，或血流信号不连续模糊。栓塞后 MRV表现结果4栓塞后 MRV表现结果4 3例完全栓塞组显示栓塞部 位及其后方的上矢状窦、直 窦和部分窦汇不显影。栓塞后 MRV表现结果4讨 论 1.动物选择动物选择 2.猪入路血管及猪颅脑应用解剖猪入路血管及猪颅脑应用解剖 3.脑静脉窦栓塞部位与方法脑静脉窦栓塞部位与方法 4.实验方法的优缺点、有效性、可行实验方法的优缺点、有效性、可行 性及临床应用价值性及临床应用价值 动物的选择动物的选择讨论1.鼠 猫 兔 猪猪入路血管及猪颅脑应用解剖猪入路血管及猪颅脑应用解剖 动脉入路 静脉入路 脑静脉窦讨论2应用解剖应用解剖 一侧隐动脉一侧股动脉一侧髂外动脉腹主动脉胸主动脉升主动脉主动脉弓臂头动脉一侧颈总动脉颈内动脉。讨论2.应用解剖应用解剖 一侧股深静脉一侧股深静脉一一侧髂外静脉侧髂外静脉一侧一侧髂总静脉髂总静脉后腔静后腔静脉脉右心房右心房前腔前腔静脉静脉一侧颈内静一侧颈内静脉脉 讨论2.应用解剖应用解剖 猪脑位于颅腔内，分为延髓、脑桥、中脑、小脑、间脑和端脑6部分。讨论2.T2WI应用解剖应用解剖 猪的颅内静脉窦解剖特点在某些方面与人非常相似，主要有矢状窦、直窦、海绵窦、基底窦。讨论2.DSA脑静脉窦栓塞部位与方法脑静脉窦栓塞部位与方法 栓塞部位 栓塞方法 优缺点讨论3.实验方法的优缺点实验方法的优缺点优点 不破坏动物的正常生理状态 可以在DSA下准确选择栓塞部位 可以通过不同的栓塞材料不同程度的闭塞脑静脉窦 可以用MRI 各种常规和功能序列检测脑实质信号变化 实验重复性强 讨论4.实验方法的优缺点实验方法的优缺点缺点 对介入操作技术要求比较高 需要非常清楚的了解猪的血管和神经解剖 铂金弹簧圈等栓塞材料价格昂贵 实验周期比较长 讨论4.实验方法的有效性、可行性实验方法的有效性、可行性及临床应用价值及临床应用价值 9例实验动物中栓塞材料放置到静脉窦指定位置的成功率是100%种系和个体差异 动物实验与临床差异 临床价值讨论4.经皮穿刺静脉插管脑静脉窦内弹簧圈、明胶海绵植入致脑静脉窦急性栓塞动物模型的实验方法有效可行，此方法不开颅，脑组织无人为损伤，更加接近实际发病状况，而且可适用于MRI检查。结论1.单纯明胶海绵栓塞脑静脉窦可再通；单纯弹簧圈栓塞只能达到静脉窦部分栓塞的效果；弹簧圈加明胶海绵栓塞能达到静脉窦完全栓塞的效果。结论2.Rolandic静脉后方矢状窦、直窦完全栓塞后可出现脑颅内压增高、硬膜下出血和脑实质静脉性梗死。结论3.脑静脉窦完全栓塞组在栓塞后30 min即可表现为双顶、枕叶静脉窦引流区T2WI、DWI高信号和ADC值的减低。结论4.脑静脉窦栓塞后磁共振脑静脉血管成像可以清楚显示静脉窦栓塞情况，与DSA相比符合率为88%。结论5.谢 谢！