食品中三聚氰胺的检测方法

食品中三聚氰胺的检测方法n化 学 名：1,3,5-三氨基-2,4,6-三嗪 俗称“蛋白精”n主要用途：n三聚氰胺甲醛树脂的原料n涂料化工上交联剂n阻燃剂、清洁剂等 一、关于三聚氰胺一、关于三聚氰胺 三聚氰胺三聚氰胺二、理化性质二、理化性质n无色单斜棱结晶 无气味 低毒低毒n常温下在水中的溶解度为 3.1 g/Ln三聚氰胺呈弱碱性 pH 值为 8 能与各种酸反应生成三聚氰胺盐n在强碱或强酸液中能发生水解 氨基逐步被羟基取代 生成三聚氰酸 三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺三、毒奶粉事件三、毒奶粉事件n1、为什么奶粉中加入三聚氰胺？、为什么奶粉中加入三聚氰胺？n蛋白质的含量是奶粉质量的主要标志之一n奶粉中加入三聚氰胺（含氮量66.6%）可以在检测蛋白质的时候显示其氮含量很高n1公斤稀释奶中自然溶入的3.3克三聚氰胺 成本仅为4分钱n1公斤的牛奶的市场收购价约3.0元2、长期摄入三聚氰胺的危害、长期摄入三聚氰胺的危害n动物长期摄入会造成生殖 泌尿系统的损害 肾部结石 并可进一步诱发膀胱癌n添加到牛奶中后会产生三聚氰酸 与三聚氰胺结合在一起后形成网络状结晶 微溶于水 遇胃酸溶解 在肾小管中再次结晶 长期会形成肾结石3、人体能承受三聚氰胺最大量、人体能承受三聚氰胺最大量n美国食品及药品监督管理局的标准：三聚氰胺每日可容忍摄入量为0.63毫克/公斤体重n也就是说一个60公斤的成年人每日可容忍摄入量为37.8毫克 n三鹿的问题奶粉则达到了2563毫克/公斤3、为什么会“大头娃娃”？n婴幼儿的营养主要摄入是奶粉 蛋白质 糖类 脂肪n奶粉中含有大量的三聚氰胺n营养不良，身体小，脑袋大四、三聚氰胺的检测方法n1、色谱检测法n2、离子色谱法n3、红外光谱法n4、容量分析法n5、毛细管电泳法 等等红外光谱检测n优点：n无需分离提取n样品快速无损n结果直观准确n分析精度高红外光谱仪n傅里叶变换红外光谱仪结构图红外光谱检测红外光谱检测n仪器检测原理迈克尔逊干涉仪 l 0 -lBM光程差光程差=0BMBF=BF迈克尔逊干涉仪Detector l 0 -lBM光程差光程差=1/4 BM-1/8 BF=BF红外光谱检测n原理：n在红外线照射下每种分子都有其结构和组成决定的独有的红外吸收光谱n对纯奶粉与加入少量三聚氰胺的奶粉样品绘制红外透过率光谱图，通过比较，定性判断聚氰胺特定官能团及特征峰红外光谱检测n仪器设备：n日本岛津 傅里叶变换红外光谱仪IRPrestige-21型n天津市科器高新技术公司 压片机n电子天平n玛瑙研钵n样品准备：n全脂奶粉 三聚氰胺 溴化钾红外光谱检测n样品压片制备样品压片制备：n将纯度为99溴化钾150mg通过玛瑙研体进行研磨。研磨后压制成本底透明薄片。n取奶粉1mg与150mg溴化钾进行混合研磨，研磨后压制成奶粉透明薄片。红外光谱检测n三聚氰胺1mg与150mg溴化钾进行混合研磨压制成三聚氰胺透明薄片。n取奶粉lmg、三聚氰胺0.001mg和150mg溴化钾进行混合研磨，压制透明薄片红外光谱检测n谱图采集：谱图采集：n红外光谱仪预热30min以上n扫描范围4400500cm 分辨率4cm-1n每个样品扫描32次 求平均值n以溴化钾作为本底，获取样品谱图。红红外光谱外光谱图认识图认识：纵坐标为透过率，横坐标为波长（m）或波数（cm-1）例1：Octane（辛烷）红外光谱图红外光谱检测纯奶粉红外透过率光谱三聚氰胺红外光谱图n二聚氰胺主要官能团峰值n 3467cm 3419cm NH2反对称伸缩振动 n1651cm N-H扭曲振动n1551cm 三嗪环芳香族C=N伸缩振动n3419cm-1和l 551cm-1处为三聚氰胺的NH2和三嗪环芳香族C=N伸缩振动特征吸收峰 n2924cm-1 2852cm-1和1745cm-1 为奶粉甲基 氨基酸的特征吸收峰含有0.1三聚氰胺奶粉红外谱图。纯奶粉a 三聚氰胺b 含有0.1%三聚氰胺的奶粉c谱图叠加奶粉与三聚氰胺红外特征吸收峰实验结论：n若样品在傅里叶红外光谱图中3467m-1 3419cm-1、1551cm-1和814cm-1处有明显特征吸收峰n则可判断该奶粉样品中含有三聚氰胺。n高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC)n测定原料乳和乳制品中三聚氰胺采用HPLC 以三氯乙酸乙腈为提取液，经混合型阳离子交换固相萃取柱富集净化后采用 C18 或 C8 柱，以乙腈和柠檬酸辛烷磺酸钠缓冲液为流动相 n采用二极管阵列检测器或紫外检测器检测，在添加量为 2.0010.00 mg/kg 的浓度范围内回收率在 80%110%，定量限为 2.00 mg/kg液相色谱质谱联用仪超高效液相色谱超高效液相色谱质谱联用质谱联用法法 利用超高效液相色谱电喷雾串联三重四级杆质谱技术可测定食品中的三聚氰胺，利用三氯乙酸溶液提取蛋白中的三聚氰胺并形成蛋白络合物沉淀，乙酸铅溶液结合含有 SO42-、SO32-等离子的杂质形成沉淀，进一步提高了提取效率，三氯乙酸可作为离子对试剂进行液相色谱质谱分析。拉曼光谱仪n拉曼光谱法拉曼光谱法n 以拉曼效应为基础的分子结构表征技术，其信号来源于分子振动和转动，是分子极化率变化诱导产生的，其谱线强度取决于相应的简正振动过程中极化率变化的大小，用来鉴定分子中存在的官能团。核磁共振仪n核磁共振法核磁共振法（NMR）n 根据三聚氰胺分子核磁共振氢谱的特性，采用 400 Hz 下氢的核磁共振模式可分析出奶粉中的三聚氰胺，通过图谱叠加也可作为定量手段。采用固相萃取液质分析三聚氰胺污染的配方奶粉和蛋糕时，所得结果与 NMR 分析相同。电位滴定仪n 电位滴定法电位滴定法n 以硫酸标准溶液滴定含三聚氰胺的溶液，然后根据等当量点时消耗硫酸标准溶液的体积计算三聚氰胺含量的方法。该方法多用于化工产品中三聚氰胺的检测，属常量检测。利用电位滴定法测定溶液中三聚氰胺的含量，RSD 不大于 0.5%结语结语 由于三聚氰胺对食品安全构成的威胁，迫切要求开发更快速、低成本的检测方法，从而使三聚氰胺的检测向着更经济、更快速、更方便的方向发展。以上内容全面分析了目前三聚氰胺的检测方法，为三聚氰胺的检测研究提供了参考。