透析袋处理及透析操作

透析袋处理及透析操作透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生 物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分 子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到 袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为保 留液，袋(膜)外的溶液称为渗出液或透析液。透析的动力是扩散压，扩 散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲 透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是 4C透析，升高温度可加快透析速度。透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜， 目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生 产的各种尺寸的透析管，截留分子量MwCO (即留在透析袋内的生物大分子的 最小分子量，缩写为MwCO)通常为1万左右。商品透析袋制成管状，其扁平 宽度为23 mm50 mm不等。为防干裂，出厂时都用10%的甘油处理过， 并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋 白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。透析袋的处理：可先用50%乙醇煮沸1小时，再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。 实验证明，50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。(也可先在大 体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分 钟，用蒸馏水彻底清洗后，再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分 钟。)使用后的透析袋洗净后可存于4C蒸馏水中，确保透析袋始终浸没在溶液 内。若长时间不用，可加少量NaN2，以防长菌。从此时起取用透析袋必须戴手 套。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。新透析袋如不作如上的特殊处理，则可用沸水煮五至十分钟，再用蒸馏水洗 净，即可使用。使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹 夹紧，由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通常要 留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水 和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增 加50%是正常的。为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅 拌。透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的 透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入 液面以下。检查透析效果的方法是：用1% BaCl2检查(NH4)2SO4，用1% AgNO3检查NaCI、KCl等。透析袋预处理方法(1) 将透析管剪成适当长度，10-20cm的小段，即形成透析袋(2) 在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和Immol/LEDTA (PH8.0)中将透析袋煮沸 10min( 3)将透析袋用蒸馏水彻底漂洗(4) 将透析袋置 Immol/LEDTA (PH8.0)中煮沸 10min(5) 将透析袋冷却，存放于4摄氏度，应确保透析袋始终浸没在液体中。 重要：从此步起用透析袋时一定要带手套操作( 6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。 用过的透析袋保存前需要怎么处理？ 用生理盐水浸泡以去掉蛋白，并用蒸馏水清洗干净，然后置 50%乙醇中保存即可；用完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以保存在 0.1%叠氮钠(可防止 微生物生长)里；0.05%-0.1%叠氮钠，或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保 存，公司的人建议前两种保存比较好！透析袋和透析膜处理方法圈BlMooney 发表于 2006-3-11 11:28:00；使用前处理：1. 把透析袋聖成适当长度（10-20cm）的小段口2. 在犬体积的2%网碳酸氢钠和1 mmol/L EDTA（pH乩0）中将透析袋 煮沸1 0分钟口M 用慕石水彻底清洗透析袋口4.放在1 mmol/L EDTA（pH 8.0）中将之煮沸1 0分钟口5冷却后存放于4度必须确保透析袋始终很没在溶液内口从此时起取用透析袋是 必须戴手套口：6用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干浄口透析膜前处理方法如下）:10 mM sodium bicarbonate 中并加热至 8CTC 一边搅拌至少 30 minn :1. 戴手套把透析膜聖成适当长度，很在慕慵水中1 min泡软口2. if A1 0 mM Na2EDTA中很泡30 min ,以新鲜的EDTA同样方法处理三次口：4再用创龙慕慵水洗30 min,然后换到20%酒藉中,放在4龙冰箱中保存口摘自百度