现代猪人工授精技术

现代猪人工授精技术猪的人工授精技术（AI）AI就是人们利用器具或徒手将公猪精液采取，经一系列的处理，再授精到母猪子宫内以达到受孕和产仔的目的.Artificial inseminationNatural inseminationAI发展史*1932年试验成功*1954年中国广西*70-80年代中国处于世界领先水平*90年代随着规模化的普及而衰落人工授精在国外世界主要生产猪人工授精实施率挪威 85%比利时 80%西班牙 80 瑞典 50荷兰 70 加拿大 10法国 50 英国 20丹麦 70 捷克 72美国 70 日本 70人工授精在美国19917%(估计值)19949%(估计值)199513-25%(全部AI/部分)199732-40%(全部AI/部分)199845-52%(全部AI/部分)199950-56%(全部AI/部分)200065%(全部)200171%(全部)200580-85%(1995 预测)社会化的AI体系AI体系体系 猪场猪场 种猪场种猪场 种猪场种猪场 种猪场种猪场种猪测定站种猪测定站人工授精与自然交配的区别?提高优秀公猪利用率减少公猪饲养量减少疫病传播克服交配困难人工授精与种猪场提高育种效率降低引种成本降低引入疫病联合育种AI与商品猪场减少种猪饲养成本可以自己选留后备母猪，降低引种的疫病风险迅速提高商品猪生产性能提高商品猪整齐度精子的性别鉴定采用人工授精的优势加速遗传改良缩短时代间隔充分利用优秀种公猪基因发展联合育种的有效手段降低健康问题风险增加生产的机动性一般7月龄开始训练，每次调教不超过15-20分钟，每天可训练一次，直至爬跨成功。公猪的训练公猪的训练1、观摩法观摩法2、发情母猪引诱法发情母猪引诱法3、外激素喷洒假母猪台畜外激素喷洒假母猪台畜精液的采集方法1.假阴道采精法假阴道采精法2.徒手采精法（常用）徒手采精法（常用）采精的程序准备好集精杯、手套和纸准备好集精杯、手套和纸公猪的赶入公猪的赶入清洗包皮和排尽集尿清洗包皮和排尽集尿握住阴茎头并擦净阴茎握住阴茎头并擦净阴茎收集精液收集精液一般射精一般射精2次以上次以上收集乳白色的部分收集乳白色的部分采精的设备和要求照明良好的采精栏；有公猪或母猪气味假台畜；300-450毫升的集精杯；过滤纸；橡皮筋及乳胶手套；擦洗阴茎的纸巾；精液处理的程序预热采精杯配好的稀释液打开仪器电源（载物台、水浴槽等）精液处理的程序精液到达后，称量精液重量；精液到达后，称量精液重量；观察颜色和气味；观察颜色和气味；检查活力检查活力检查密度确定稀释份数；检查密度确定稀释份数；稀释稀释稀释后检查活力；稀释后检查活力；分装、封口分装、封口缓慢降温至室温后缓慢降温至室温后17 C保保存；存；设备和材料显微镜：显微镜：精子密度仪精子密度仪电子称电子称35-40C预热预热箱箱17 C恒温箱恒温箱蒸馏器蒸馏器干燥消毒柜干燥消毒柜精液检查处理注意事项(1)处理精液过程中要在无菌环境中处理精液过程中要在无菌环境中(2)避免精液降温过快避免精液降温过快(3)杜绝水或有毒、有害物质接触精液；杜绝水或有毒、有害物质接触精液；(4)避免阳光直接照射避免阳光直接照射,最好在蓝色光线下操作；最好在蓝色光线下操作；(5)搅拌应缓慢、均匀，不可激烈搅拌或震动；搅拌应缓慢、均匀，不可激烈搅拌或震动；(6)实验室内严禁抽烟和使用挥发性有害液体实验室内严禁抽烟和使用挥发性有害液体精液质量的评价直观检查直观检查 颜色：正常乳白色或灰白色；颜色：正常乳白色或灰白色；气味：气味较重表明精液有问题气味：气味较重表明精液有问题显微镜检查显微镜检查用用100、400倍显微镜观察倍显微镜观察精液剂量的确定一个剂量的标准：75100毫升20亿有效精子活力大于70%-太拥挤了！精液如何保存？缓慢降温至室温（21）-大约2h,保持-1/5m 17 恒温箱，1 平放 每天摇匀两次适宜的温度有利于精子的休眠有效的输精有效的输精1.授精量2.授精精子总数3.适时配种每次精液授精量每次精液授精量母猪一胎产母猪一胎产9-12头仔猪头仔猪排卵排卵18-25枚枚10万个精子就足够万个精子就足够本交射入母猪生殖道的精子数本交射入母猪生殖道的精子数800-1000亿亿母猪的生理受孕步骤1.发情期的定义是当母猪站立不动发情的时候。2.站立发情的母猪可能会推迟几个小时才被发现。3.发情后36-72个小时才开始排卵。4.排卵的时间通常会持续 4到 6个小时。5.卵子需要大约 30 到 45分钟到达壶腹，这是受孕的最佳地点6.卵子在壶腹的下端最多呆上8个小时，这个时候卵子的活力最强。5.精子成熟后其活力最多可以保持 24小时。4精子通过一个峡谷游到受孕的地点。3.精子在使卵子受精前需要 8个小时的成熟期。2.精子很快地被转移到子宫的顶端。1.精子在子宫顶端子宫颈口输入。其目的是使新鲜的精子和新鲜的卵子在最佳的时间和最佳地点相遇，实际上，其目的是使新鲜的精子和新鲜的卵子在最佳的时间和最佳地点相遇，实际上，最佳的受孕效果是在排卵前最佳的受孕效果是在排卵前12小时进行输精。小时进行输精。精子分布试验分别人工输入150亿、100亿、50亿、25亿、20亿个精子排卵前12小时、排卵中、排卵后12小时屠宰母猪用冲洗和电镜扫描来源Mbuin Einasso,1996输精后各部位精子的分布输精后各部位精子的分布输卵管部位排卵前组排卵期组排卵后组精子数%精子数%精子数%宫管接合部75923 96.04 2152774.471191687.34峡下段 26803.3963521.698836.47峡中段 2710.344311.444153.04峡后段 1810.236951.474293.14合 计 790552930913643到达受精部位的精子进入输卵管的最多为79055个到达受精部位的精子在输卵管中占检出精子的0.23-3.14%绝大部分精子死亡在子宫中试验说明试验说明无论开始在生殖道中有1000亿精子（NS）还是20亿（AI）,最终在母猪输卵管的分布和数量都无明显差别IMV公司的技术参数授精量(ml)经产100后备80精子数5-10亿授精方法 子宫深部授精Hotboar公司参数公司参数授精量：80-100ml精子总数：30亿有效精子数：25亿如何做母猪发情鉴定？外阴部观察乳房观察试情法激素测定法如何输精？输精前准备输精时间确定输精方法适时配种受精曲线接受公猪爬跨接受公猪爬跨（发情期发情期）静立压背静立压背1天天1020304050600102030高 适时配种受精力受精力低 不要配种低 下情期小小时时前情期前情期后情期后情期排卵发生在发情后排卵发生在发情后3642小时，在小时，在16小时内完成排卵，排卵前小时内完成排卵，排卵前12小时内交配或人小时内交配或人工授精可获得最佳受精。工授精可获得最佳受精。发情至排卵的时间间隔母猪发情至排卵的时间间隔大约36-50小时，后备母猪1830小时，经产母猪依断奶到再发情的间隔时间不同而不同。Missen（1997）对118头经产母猪的发情规律研究得出：（1）母猪断奶到再发情的间隔时间的长短与发情期长短呈负相关，即断奶后越早发情母猪的发情时间越长；（2）母猪发情期的长短与发情至排卵的时间呈正相关，即母猪的排卵时间总是在发情后期。公式推算：母猪发情至排卵的时间（小时）=84.20.46母猪断奶到再发情的时间（小时）（Missen，1997（该公式置信度95%，复相关系数R2=0.29，相关性属中等）据上式推算，离奶后第36天发情的母猪，其发情至排卵的时间为5118小时，由于配种时间应在排卵前10小时，故推算出配种时间应在发情后的418小时，按半天（12小时）为一个发情检查间隔单位，则最适配种时间应为发情后的3650小时。配种间隔由于后备母猪较经产母猪发情和排卵时间要短，后备母猪的配种间隔为1218小时，经产母猪为2436小时。精子在子宫内的存活时间精子在子宫内的存活时间约为36小时，进入子宫后需8小时的获能时间（该时间刚好为精子从子宫颈到输卵管受精点的时间），之后才有受精能力，故输精时间应提前810小时。精子实际具有授精能力的时间为28小时，故两次输精配种间隔最长为2428小时。当精液保存时间长（超过3天）或经冷冻保存后，精子存活力下降，具有受精能力的时间下降为1218小时，故此时两次输精配种间隔最长为812小时 站立反应正常站立反应正常 断奶母猪断奶母猪站立反应晚站立反应晚 断奶母猪断奶母猪 后备母猪后备母猪 重配母猪重配母猪/反情母猪反情母猪压背有反应压背有反应站立反应早站立反应早 断奶母猪断奶母猪站立反应晚的母猪发情期较短.一般最多持续两天。最佳的输精时间:第一次:检测后马上输精第二次:如果母猪用公猪试情有站立反应，12小时后再输一次站立反应正常的母猪断奶后5天进入发情期.发情约持续2.5天。适宜的输精时间是:第一次:开始发情后的12-24小时第二次:第一次输精后12小时站立反应早的发情母猪发情期较长.通常断奶后3-4天开始出现发情症状，持续期可达3天以上.适宜输精的时间是:第一次:发情站立反应后的24-36小时第二次:第一次输精后12-16小时第三次:第二次输精后2-16小时，如仍在发情12345678公猪试情有反应公猪试情有反应精子的存活期精子的存活期排卵排卵最佳输精时间最佳输精时间天天资料来源:Dr.K.Weitze,德国,1994最佳的输最佳的输精时间精时间(每天两每天两次查情次查情)表12 各类母猪最适配种时间及间隔 母猪类型 后备母猪 离奶后第3天发情母猪 离奶后第4天发情母猪 离奶后第5天发情母猪 离奶后第6天以上发情母猪 复发情母猪 发情后至第1次配种间隔时间 036241200第2次配种与第1次间隔时间 122424242412第3次配种与第2次间隔时间 1212-2412-24121212配种制度断奶后的天数断奶后的天数 第一次站立反应第一次站立反应 配种制度配种制度 4 4 上午上午推迟配种推迟配种 下午下午 下午下午 上午上午 下午下午推迟配种推迟配种 上午上午 上午上午 下午下午 5 5 上午上午 上午上午 上午上午 下午下午 下午下午 下午下午 上午上午 下午下午 6 6 上午上午 上午上午 下午下午 上午上午 下午下午 下午下午 上午上午 下午下午 所有返情母猪、妊检阴性母猪所有返情母猪、妊检阴性母猪 上午上午 下午下午 下午下午 下午下午 上午上午 下午下午5-15 min45-55分钟分钟Approx.1 hourABCDE 站立反应开始站立反应开始A:Soon after stimulation,begin inseminationB-C:站立反应高峰，最佳输精时间站立反应高峰，最佳输精时间D:不太接受，非输精最佳时间不太接受，非输精最佳时间E:站立反应结束，不能输精站立反应结束，不能输精Source:Levis,1995 Nebraska Swine Report5-15 min45-55 分钟分钟Approx.1 hour 5-15 分钟5-15分钟约约1小时小时约约1小时小时 A.试情后马上输精A发情静立周期成功受孕的管理秘诀秘诀死精成熟的精子，可以受孕有顶体的精子，不能受孕有活力的卵子没活力的卵子小时小时-48-36-24-120+12+24+36+60+48+72阴户开始红肿爬跨特征未完全发情开始发情可以开始进行第一次输精可以开始进行第二次输精可以开始进行第三次输精排卵排卵可以开始进行第四次输精可以开始进行第五次输精太早低受胎率 输精时间输精时间OK高受胎率太迟低受胎率 排卵时间排卵时间 高 受胎率站立发情观察站立发情观察适时配种注意事项在母猪发情晚期AI或本交易造成对母猪的感染，恶露也会影响配种制度。配种后，母猪应尽可能保持安静和舒适，一旦母猪最后一次配种结束，就应立即赶到限位栏内。群养时不应同原来的断奶母猪放在一起，而应同刚配完种的母猪放在一起，组成新群。然而，配种后的母猪应尽可能地不要混养。总的来说，配种后730天的母猪不应被赶动或混群。进入配种间的所有母猪都必须认真检查，单独的记录应强调到第一次配种的平均天数和断奶后7天配种的百分率。配种时间对产仔力的影响 估计卵估计卵 子时龄子时龄 卵卵 子子 正常率正常率 25 天的天的 胚胎数胚胎数 小时小时%存活数存活数 0(控制控制)90.8 12.0 4 92.1 11.7 8 94.6 8.7 12 70.3 6.8 16 48.3 4.8 20 50.9 5.0 a 108头母猪头母猪注意在妊娠注意在妊娠25天时天时8小时这一组的排卵损失数小时这一组的排卵损失数.资料来源资料来源:R.H.F.Hunter,1988-40 25101520253035406 天天排卵后的天数排卵后的天数在子宫内在子宫内(游离）游离）(间距间距)(着床着床)吸附吸附Ref.Prof.ClausAI60595a胚胎发育的关键阶段3456789平均平均资料来源资料来源:Koenig,East Germany初初产产(%)经产经产(%)0.84.55.124.227.336.629.722.821.610.311.11.14.43.35.95.1输精时的刺激1.试情公猪试情公猪2.背部按压背部按压3.腹部按摩腹部按摩精液进入受精部位子宫平滑肌收缩子宫平滑肌收缩精液进入子宫精液进入子宫向子宫角移动向子宫角移动在宫缩作用下在宫缩作用下到达受精部位到达受精部位受精精子获能：在精卵结合前，精子需要3-8小时获能配种时间对产仔力的影响 估估计计卵卵 子子时时龄龄 卵卵 子子 正正常常率率 25天天的的 胚胚胎胎数数 小小时时%存存活活数数 0(控控制制)90.8 12.0 4 92.1 11.7 8 94.6 8.7 12 70.3 6.8 16 48.3 4.8 20 50.9 5.0 a 108头母猪头母猪注意在妊娠注意在妊娠25天时天时8小时这一组的排卵损失数小时这一组的排卵损失数.资料来源资料来源:R.H.F.Hunter,1988AI影响繁殖性能的主要因素主要因素发生频率分娩率(%)产活仔数精液质量51/120-17.0-1.2输精50/120-11.0-0.5输精后处理19/120-5.0-1.5输精对繁殖性能的影响问题发生频率 分娩率(%)产活仔数查情不准确15/50-15.0-0.6输精次数少10/50-8.0-0.3配种时间不理想8/50-7.0-0.4输精技术差5/50-8.0-0.5输精数量少6/50-7.0-0.5输精容量少6/50-5.0-0.5精液质量对繁殖性能的影响问题发生频率 分娩率(%)产活仔数老化精液14/51-18.0-1精液保存不当8/51-7.0-0.7稀释水质量差8/51-7.0-0.6稀释液质量差8/51-17.0-1.2稀释水比例不当5/51-10.0-1.0精子形态不好5/51-11.0-1.0公猪生育力差3/51-51.0-5.8五种配种方案的受胎结果方案发情当天发情第二天 发情第三天 受胎率（%）A(n=187)上午上午83.4B(n=248)下午上、下午81.85C(n=178)上、下午上午83.70D(n-96)上、下午上午95.80E(n=49)上、下午93.80查返情查返情所有配种母猪都必须经常查情，直到在60天左右能明显看出妊娠为止。在配种后着床（1223天）前胚胎全部死亡，母猪会返情，有规律地间隔为1824天。在配种后3040天即着床后到钙化前的胚胎死亡，会导致返情推迟或返情不规则。骨胳钙化开始后，胎儿的死亡会造成木乃伊，如果全窝都是木乃伊可能与伪狂犬病有关。整个妊娠期都可能发生流产，流出510天后会出现发情或保持乏情状态。查返情时必须考虑以下情况查返情时最好用公猪，公猪在母猪栏前走，并与母猪鼻对鼻的接触。群养时可把公猪赶到母猪栏内，饲养员要注意发现3周外的不规则返情。查返情时，饲养员要注意查看正常的返情征状，即压背，竖耳、鸣叫、阴户肿胀、红肿。栏养时发情的母猪会在其他母猪躺下时独自站着。可用姆指测阴户温度，翻查阴户是很有用的：清晰的、粘性分泌物，阴户温度增加。有清晰的粘性分泌物及发情的其它症状、对公猪感兴趣的母猪，应赶到靠近公猪栏的地方观察。子宫或阴道有炎症返情前有些母猪会流出象脓一样的、绿色的或黄色的恶露。这说明子宫或阴道有炎症，因此应注射抗生素并给予特殊照顾。如果分泌物是化脓的、难闻的，应淘汰该母猪。这类母猪的配种只能采用人工授精。怀孕诊断怀孕诊断改善怀孕诊断率比改善分娩率容易的多，怀孕诊断对于所有猪来说都是基本的程序。训练有素的操作者能在25天左右检测出怀孕。Doppler检测仪和超声波能在21天返情前检测出怀孕。配种后的28天着床结束，所以所有早期诊断都必须在配种后30天重新确认。配种后2535天进行两次怀孕诊断是理想的，以便在42天返情时对阴性和问题母猪采取相应的措施。视觉评估对所有母猪进行有规律的视觉评估是很重要的，即使在诊断确定后少数母猪也有胚胎再吸收和流产的可能。超声波检查器超声波检查器有多种超声波检查器都可用来检测怀孕母猪子宫内充盈的羊水，然而不正确的测定位置可能会检测到充盈的膀胱，而误以为是子宫，结果产生错误的诊断。因此怀孕检测最好在母猪排尿、吃食喝水后进行，另外在羊水少时也不可能确定怀孕。AI 格言:做个公猪成功的途径和方法发情鉴定和确定输精时间注意细节 每一个人/小时/天/周/月合理的饲养管理人员卫生条件差卫生条件差圈栏圈栏猪体猪体阴户阴户配种员配种员输精管输精管失败的原因精液的贮存精液的贮存检测样品检测样品检测温度检测温度每天摇动两次每天摇动两次精液随意放置在猪舍精液随意放置在猪舍