常用溶液的配制

常用试剂的配制1无Ca2+、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO3 0.175g Na2HPO412H2O 0.076g KH2PO4 0.03g 葡萄糖 0.5g 0.4%酚红 2.5ml 将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO3 调整 pH 值至7.4，4冰箱保存备用。2甲基红试剂 （1）成份 甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml 95乙醇 300ml （2）用途：测定甲基红反应。3Hanks液（原液） 原液甲： NaCl 160g KCl 8g MgSO47H2O 2g MgCl26H2O 2g 上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。 CaCl2 2.8g溶于100ml双蒸水 上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4保存。 原液乙： Na2NPO412H2O 3.04g KH2PO4 1.2g 葡萄糖 20g 加入800ml双蒸水，溶解。 0.4%酚红溶液100ml上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4保存。使用时甲,乙原液按下列比例配成 Hanks 液 使用液：原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过，8磅20min灭菌，放4冰箱保存，使用前用NaHCO3调整PH值。40.4%酚红溶液称取0.4g酚红置研钵中研碎，逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨，直到所有的颗粒几乎完全解，加入0.lmol/LNaOHl0ml，然后倒入容量瓶中，并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。 5pH7.2 Tris-NH4CI溶液(红细胞崩解液） Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g NH4Cl（氯化氨) 3.735g 加双蒸水至500ml，用浓HCl调pH=7.2，10磅15min灭菌后放4保存。 60.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 加蒸馏水 200ml 加热溶解 巴比妥纳 10.3g 叠氮纳 0.2g 加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。7磷酸盐缓冲液 (PB)A 液： 为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH2PO4 H2O 27.6g, 溶于蒸馏水中, 最后补加蒸馏水至 1000ml 。B 液：为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na2HPO4.7H2O 3.6g（或 Na2HPO412H2O71.6g, 或Na2HPO4 2H2O 35.6g ）, 加蒸馏水溶解，最后加水至 1000ml。若再加蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。80.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液（BBS） 硼酸钠（Na2B4O7.10H2O） 0.46g 硼酸（H2BO3） 0.51g 加蒸馏水至100ml 溶解。 9PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法一： 0.2mol/L Na2HPO4（ Na2HPO412H2O 71.6g加蒸馏水至1000ml） 0.2mol/L NaH2PO4（NaH2PO42H2O 35.6g加蒸馏水至1000ml）取0.2mol/L Na2HPO4 81.0ml 加0.2mol/L NaH2PO4 19ml,再加1900mlH2O和17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L PBS。PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。配制方法二：甲液（0.1mol/LKH2PO4溶液）：KH2PO413.608g，加蒸馏水至1000ml。乙液（0.1mol/L Na2HPO4溶液）：Na2HPO435.814g，加蒸馏水至1000ml。取甲液19ml，乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。100.05mol/L pH9.6碳酸缓冲液Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g加蒸馏水至1000ml。ELISA实验包被用。110.01mol/L pH7.4 PBS内含2%BSA（牛血清白蛋白）取BSA2ml加0.01mol/L pH7.4PBS至100ml即可。ELISA实验封闭用。12PH5.0磷酸-柠檬酸缓冲液。0.2mol/L Na2PO4(28.4g/L) 25.7ml 0.1mol/L柠檬酸(19.2g/L) 24.5ml 加蒸馏水至100ml即为pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液。13底物溶液pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液加入邻苯二胺1mg/ml，再加入30%的H2O2 (1l/ml)溶解后即为ELISA底物液，临用前配制，避光保存。142mol/L硫酸浓H2SO4（36N）取 1ml36N的H2SO4缓缓加入18 ml蒸馏水内即为2mol/L，用于ELISA实验终止反应。15清洁液的配制清洁液分高、中、低液三种。低浓度清洁液重铬酸钾 100g 水 750ml 硫酸 250ml中浓度清洁液 重铬酸钾 60g 水 300ml 硫酸 460ml高浓度清洁液 重铬酸钾 100g 水 200ml 硫酸 800ml先将重铬酸钾倒入自来水中，然后加入浓硫酸，边加硫酸边用玻璃棒搅拌。由于加入浓硫酸后产生高热，故加酸时要慢，溶器应用耐酸耐高温塑料或陶器制品。配制好的清洁液，应存于有盖的玻璃溶器内。需要浸泡的玻璃器皿一定要干燥，如果清洁液经过长期使用已呈黑色，表明已经失效，不宜再用。由于清洁液有强腐蚀性，故操作时要十分注意。 16PH6.4 l/l5mol/ml磷酸盐缓冲盐水（PBS）：（1）l/l5mol/ml 磷酸二氢钾溶液 KH2PO4 9.04g 蒸馏水 加至1000ml（2）l/l5mol/ml 磷酸氢二钠溶液 Na2HPO42H2 O 11.87g （或 Na2HPO4l2H2 O 23.86g 蒸馏水 加至1000ml（3）PH6.4 l/l5mol/ml 磷酸盐缓冲盐水（PBS） l/l5mol/ml磷酸二氢钾溶液 73ml l/l5mol/ml磷酸氢二钠溶液 27ml NaCl 0.5g 混匀溶解即可。17柯氏试剂(靛基质试剂) （1）成份纯戊醇 150ml 浓盐酸 50ml 对二甲基氨基苯甲醛 10g（2）制法：将对二甲基氨基苯甲醛加入纯戊醇内，使其溶解。将浓盐酸一滴滴慢慢加入，边加边摇，不能加得太快，以致温度升高溶液颜色变深。 （3）用途：测定细菌能否产生吲哚。一、玻璃仪器的洗涤方法 1.洁净剂及其使用范围 最常用的洁净剂有肥皂、合成洗涤剂（如洗衣粉）、洗液（清洁液）、有机溶剂等。 肥皂、合成洗涤剂等一般用于可以用毛刷直接刷洗的仪器，如烧瓶、烧杯、试剂瓶等非计量及非光学要求的玻璃仪器。 肥皂、合成洗涤剂也可用于滴定管、移液管、量瓶等计量玻璃仪器的洗涤，但不能用毛刷刷洗。 洗液多用于不能用毛刷刷洗的玻璃仪器，如滴定管、移液管、量瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗、凯氏烧瓶等特殊要求与形状的玻璃仪器；也用于洗涤长久不用的玻璃仪器和毛刷刷不下的污垢。 2.洗液的配制及说明 铬酸清洁液的配制： 处方1 处方2 重铬酸钾（钠） 10g 200g 纯化水 10ml 100ml（或适量） 浓硫酸 100ml 1500ml 制法：称取处方量之重铬酸钾，于干燥研钵中研细，将此细粉加入盛有适量水的玻璃容器内，加热，搅拌使溶解，待冷后，将此玻璃容器放在冷水浴中，缓慢将浓硫酸断续加入，不断搅拌，勿使温度过高，容器内容物颜色渐变深，并注意冷却，直至加完混匀，即得。 说明：（1）硫酸遇水能产生强烈放热反应，故须等重铬酸钾溶液冷却后，再将硫酸缓缓加入，边加边搅拌，不能相反操作，以防发生爆炸。 （2）清洁液专供清洁玻璃器皿之用，它能去污去热原的作用的原因为本品具有强烈的氧化作用。重铬酸钾与浓硫酸相遇时产生具有强氧化作用的铬酐： K2CrO7H2SO4H2CrO7K2SO4 2CrO3H2OCr2O33O 浓硫酸是一个含氧酸，在高浓度时具有氧化作用，加热时作用更为显著： H2SO4H2OSO2O K2CrO73SO2H2SO4Cr2（SO4）3K2SO4H2O （3）铬酸的清洁效力之大小，决定于反应中产生铬酐（CrO3）的多少及硫酸浓度之大小。铬酐越多，酸越浓，清洁效力越好。 （4）用清洁液清洁玻璃仪器之前，最好先用水冲洗仪器，洗取大部分有机物，尽可能仪器空干，这样可减少清洁液消耗和避免稀释而降效。 （5）本品可重复使用，但溶液呈绿色时已失去氧化效力，不可再用，但能更新再用。 更新方法：取废液滤出杂质，不断搅拌缓慢加入高锰酸钾粉末，每升约68g，至反应完毕，溶液呈棕色为止。静置使沉淀，倾取上清液，在160以下加热，使水分蒸发，得浓稠状棕黑色液，放冷，再加入适量浓硫酸，混匀，使析出的重铬酸钾溶解，备用。 （6）硫酸具有腐蚀性，配制时宜小心。 （7）用铬酸清洁液洗涤仪器，是利用其与污物起化学反应的作用，将污物洗去，故要浸泡一定时间，一般放置过夜（根据情况）；有时可加热一下，使有充分作用的机会。3.洗涤玻璃仪器的方法与要求 （1）一般的玻璃仪器（如烧瓶、烧杯等）：先用自来水冲洗一下，然后用肥皂、洗衣粉用毛刷刷洗，再用自来水清洗，最后用纯化水冲洗3次（应顺壁冲洗并充分震荡，以提高冲洗效果）。 计量玻璃仪器（如滴定管、移液管、量瓶等）：也可用肥皂、洗衣粉的洗涤，但不能用毛刷刷洗。 （2）精密或难洗的玻璃仪器（滴定管、移液管、量瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗等）：先用自来水冲洗后，沥干，再用铬酸清洁液处理一段时间（一般放置过夜），然后用自来水清洗，最后用纯化水冲洗3次。 （3）洗刷仪器时，应首先将手用肥皂洗净，免得手上的油污物沾附在仪器壁上，增加洗刷的困难。 （4）一个洗净的玻璃仪器应该不挂水珠（洗净的仪器倒置时，水流出后器壁不挂水珠）。5