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肾上腺素对内毒素致雄性大鼠炎症性肝损害的保护作用,柴敏、姚渊、徐蓉、谢珊珊,前言:,我国肝炎发病率不断呈上升趋势,临床上对于治疗肝炎的新药物的研究也在不断发展,肾上腺素(EPI)作对于肝炎症性损伤的保护作用在临床上尚处于研发阶段,有很大的临床应用前景。本实验利用内毒素脂多糖(LPS)会造成小鼠肝脏炎症性损伤,比较是否给予EPI的不同组小鼠间的肝脏是否形成炎症性损伤及其损伤程度,不同剂量的EPI对肝脏的保护作用是否存在剂量关系。,实验材料与试剂,实验对象:50只SPF级SD大鼠(由实验室提供),实验动物介绍: SD大鼠:由美国的Sprague & Dawley农场的R.W.Dawley用杂合的雄性大鼠和Wistar雌性大鼠杂交后育成的一个白化封闭群大鼠。 SPF级动物:机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,但非特定的微生物和寄生虫是容许存在的。一般指无传染病的健康动物,是目前国外使用最广泛的实验动物。 筛选标准:体重为200g左右的雄性大鼠,实验仪器与试剂,实验仪器与器材:Beckman全自动生化分析仪CX-5型,静脉注射器,剪刀,镊子,自动分析天平,小试管,移液管 实验试剂:LPS(同一厂家生产,同批号),EPI (同一厂家生产,同批号),生理盐水,标记染料(苦味酸,品红),实验动物分组及处理方式,分组方法:分为5组,每组10只。采用完全随机分组法。,1、编号:按动物体重从小到大编号并标记。 2、取随机数:给每个编号一个随机数(查随机数表或从计算机获得)。 3、确定组别:根据受试对象获得的随机数决定受试对象的组别。,处理方式:,第一组:为空白对照组,先静脉注射生理盐水6mg/kg,再静脉点滴生理盐水2.4ml/kg/h,持续6小时。 第二组:为LPS组,先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴生理盐水2.4ml/kg/h,持续6小时。 第三组:为EPI低剂量组,先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴肾上腺素0.12g/kg/min,持续6小时。 第四组:为EPI中剂量组,先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴肾上腺素0.3g/kg/min,持续6小时。 第五组:为EPI高剂量组,先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴肾上腺素0.6g/kg/min,持续6小时。 备注:对照组所用生理盐水及其剂量为参考文献所得。,实验相关检测指标的取样及观察,1、于LPS注射前、注射后两小时采用内眦静脉取血法分别取适量血,检测血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 2、于LPS注射后六小时断头处死并取血,检测血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 3、对实验动物进行解剖,取肝脏,观察其组织病理学改变。,结果的分析方法,1、比较第一组与第二组的各项指标:LPS是否对大鼠肝脏造成炎症性损伤及其损伤程度。 2、比较第二组与第三、四、五的各项指标:EPI对LPS造成的大鼠肝脏炎症性损伤是否具有一定的保护作用。 3、对第三、四、五组的各项指标进行比较:不同剂量的EPI对大鼠肝脏炎症性损伤的保护作用是否存在剂量关系。 统计分析:采用SPSS软件作各组间的方差分析比较其差异性。,参考文献:,1、杨文敏,曾其毅中国循证儿科杂志2007年2卷四期 2、Bozkurt S, Ersoy E, Tekyn HE. The cytoprotective effect of iloprost against carbon tetrachloride induced hecrosis in rat liverJ. Res Common Mol Pathol Phannacol, 1997,95(3):343.,
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