肝脏病常用的实验室检查.ppt

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肝脏病常用实验室检测,中山大学附属第二医院消化科 李楚强,胆汁酸在肝脏由胆固醇合成,随胆汁分泌入肠道;(95%)再经胆汁酸的肠肝循环,经门静脉入肝;少量进入血循环 胆汁酸盐(bile salts)(胆盐)是胆汁的重要成分,在脂类物质的消化吸收及调节胆固醇代谢方面起重要作用 胆汁酸分游离胆汁酸、结合胆汁酸两类,胆汁酸(bile acid)代谢检查,胆汁酸分类 游离胆汁酸 初级胆汁酸:胆酸、鹅脱氧胆酸 次级胆汁酸:脱氧胆酸、石胆酸 结合胆汁酸:上述各种游离胆汁酸分别与甘氨酸或牛磺酸结合的产物,胆汁酸的测定意义 反映肝细胞合成、摄取及分泌功能,并与胆道排泄功能有关 对肝胆系统疾病诊断的灵敏度和特异性高于其它指标 可行空腹或餐后2小时测定,后者更灵敏(正常人餐后稍;肝细胞受损,不能有效地摄取肠道回吸收的胆汁酸,血清胆汁酸),参考值(mol/L) 总胆汁酸(酶法) 010 胆酸(气液相色谱法) 0.080.91 鹅脱氧胆酸 (气液相色谱法) 01.61 甘氨胆酸 (气液相色谱法) 0.051.0 脱氧胆酸(气液相色谱法) 0.230.89,临床意义 肝细胞损害 胆道梗阻 门脉分流(次级胆汁酸脱氧胆酸、石胆酸直接进入体循环) 生理现象(进食后血清胆汁酸一过性增高),染料摄取和排泄功能的检查,正常肝细胞有清除某些物质(如体内代谢产物及外来药物等)的作用,此作用有赖于肝细胞的摄取、代谢、运转、排泄等功能 肝脏发生病变,以上各个环节受累,则导致清除功能减低,靛氰绿滞留率试验(ICGR) 原理 靛氰绿(indocyanine green, ICG)注入血液 ICG与清蛋白结合,运转至肝 90%以上ICG被肝细胞摄取 ICG以原形排至胆道 随胆汁排泄(无肠肝循环、不从肾脏排出),方法 试验前ICG皮试(对本品及碘过敏者忌用 ) ICG 0.5mg/kg体重,以注射用水稀释(5mg/ml), 快速iv (30秒内) 每隔5分钟采血1次,共四次 分光光度计检测 计算出滞留率 参考值:15分钟血内ICG滞留率 010,临床意义 ICG滞留率增加 肝功能损害(肝炎、肝硬化等) 胆道梗阻 先天性黄疸的鉴别诊断 Rotor综合征ICG滞留率多50 Gilbert病正常,有时可轻、中度升高 Dubin-Johnson综合征ICG滞留率正常,利多卡因试验 原理 肝脏摄取利多卡因后,经细胞色素P450酶系作用,生成单乙基甘氨酰二甲苯(MEGX) 利多卡因肾脏清除率低,血清中MEGX浓度不受肾功能损害的影响 测定MEGX浓度可反映肝功能状态,方法 利多卡因1mg/kg体重 iv、计时 30分钟后测血中MEGX浓度 计算:测定值注射前MEGX的浓度 参考值 10018g/L,临床意义 肝功能损害时,肝利多卡因摄取率,血中MEGX浓度 作为进行肝移植的参考指标 MEGX10 g/L者需进行肝移植 肝移植时选择供肝的依据 预测移植肝存活状况,血清酶及同工酶检测,血清氨基转移酶及其同工酶测定 血清氨基转移酶 丙酮酸氨基转移酶(alanine aminotransferases, ALT)或称谷氨酸丙酮酸转移酶(GPT):主要在肝细胞浆中 天门冬酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferases, AST)或称谷氨酸草酰乙酸转移酶(GOT):主要在心肌,其次为肝脏(线粒体)、骨骼肌和肾脏等组织,参考值 比色法(Karmen法) 连续监测法(37) ALT 525卡门氏单位 1040 U/L AST 828卡门氏单位 1040 U/L ALT/AST 1,临床意义 急性病毒性肝炎 ALT与AST均,ALTAST、恢复期逐渐接近正常范围(ASTALT) 急性肝炎恢复期转氨酶不能降至正常或在上升,提示转为慢性 急性重症肝炎,病程初期以AST升高明显,若出现“胆酶分离”,提示肝细胞严重坏死,预后不佳,慢性病毒性肝炎 非活动性轻度升高或正常,ALTAST ASTALT,提示进入活动期可能 酒精性肝病、药物性肝炎、脂肪肝、肝癌等非病毒性肝病 转氨酶轻度升高或正常,ASTALT 酒精性肝病AST显著升高,ALT几近正常,肝硬化 取决于肝细胞进行性坏死程度 终末期转氨酶活性正常或降低 肝内、外胆汁淤积 转氨酶活性通常正常或轻度上升,急性心肌梗死 68H,AST,1824H达高峰 其他疾病 骨骼肌疾病(皮肌炎、进行性肌萎缩)、肺梗塞、肾梗塞、胰腺炎、休克、传染性单核细胞增多症,转氨酶轻度升高,AST同工酶( Isoenzyme of AST ) 分类(肝细胞中有两种AST同工酶) 存在于细胞浆组分者称为上清液AST(ASTs),占90% 存在于线粒体中者称为线粒体AST(ASTm),占10%,临床意义 轻、中度急性肝炎,以ASTS上升为主 重症肝炎、暴发性肝炎、酒精性肝病,血清中ASTm升高 氟烷性肝炎、Reye综合征、妊娠脂肪肝、肝A栓塞术后、AMI等,ASTm 相同类型的肝病,ASTm者较ASTm不者病情严重,碱性磷酸酶及其同工酶测定 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP) ALP主要来源于肝脏、骨骼、肾脏、小肠、胎盘,尤以肝脏胆管上皮为多 参考值 女性:112岁 500 U/L 15岁以上:40150 U/L 男性:112岁 500 U/L 1215岁 700 U/L 25岁以上:40150U/L,临床意义 肝胆系统疾病 肝内、外胆管阻塞: ALP,胆红色 累及肝实质细胞的肝胆疾病,ALP仅轻度,ALP和转氨酶同时测定,有助于黄疸的鉴别 胆汁淤积性黄疸 ALP,转氨酶轻度 肝细胞性黄疸 转氨酶,ALP正常或稍 肝内局限性胆道阻塞(肝癌、肝脓肿) 转氨酶无明显增高,ALP,胆红素多正常 骨骼疾病(骨癌,骨软化症,骨折愈合) ALP 生长中青少年儿童、妊娠中晚期 ALP生理性,血清碱性磷酸酶同工酶 种类(琼脂凝胶电泳) ALP1细胞膜组分和ALP2的复合物 ALP2来自肝脏(肝型) ALP3来自骨髓(骨型) ALP4来自胎盘(胎盘型) ALP5来自小肠(小肠型) ALP6IgG和ALP2的复合物,参考值 正常人以ALP2(肝型)为主,占90%,出现少量ALP3(骨型) 发育中儿童ALP3增多,占总ALP 60%以上 妊娠晚期ALP4增多,占总ALP40 65% 血型为B或O型者可有微量ALP5,临床意义 胆汁淤积性黄疸,尤其癌性梗阻时,100%出现ALP1,且ALP1ALP2 急性肝炎, ALP2,ALP1,ALP1ALP2 80以上肝硬化患者,ALP5明显增加,可达总ALP40%以上。不出现ALP1,-谷氨酰转移酶及同工酶测定 -谷氨酰转移酶(-glutamyl transferase ,GGT) 血清中GGT主要来自肝胆系统,肝内合成或胆汁排出受阻,GGT 参考值 男性 1150 U/L 女性 732 U/L,临床意义 胆道阻塞性疾病,GGT,与黄疸上升幅度平行 肝癌,GGT(肝内阻塞癌细胞合成),急性病毒性肝炎 GGT(中度) 恢复期若GGT为唯一升高的酶,提示肝炎未愈 慢性病毒性肝炎、肝硬化 非活动期GGT活性正常 病变活动或病情恶化, GGT持续性,急、慢性酒精性肝炎、药物性肝炎 GGT(3001000U/L),ALT、AST轻度 或正常 经常饮酒者-GT80U 酗酒者戒酒后GGT随之下降 其他 脂肪肝、胰腺炎、胰腺肿瘤、前列腺肿瘤等,GGT轻度,-GT同工酶 分类及临床意义 -GT1(高分子质量形式),存在于正常血清、胆道阻塞及恶性浸润性肝病中 -GT2(中分子质量形式) 主要成分存在于肝脏疾病中,对肝癌(尤其是AFP阴性者)诊断有一定敏感性与特异性, 另一种存在于胆道阻塞性疾病 -GT3(低分子质量复合物),尚无重要意义 有人认为GGT不同形式只是蛋白质翻译的变体,而非通常意义上的同工酶,-L-岩藻糖苷酶(-L-fucosidase, AFU ) AFU是一种溶酶体酸性水解酶,广泛分布于机体的组织细胞,血液和体液内,参与含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂的分解代谢 AFU:岩藻糖苷水解反应受阻,引起岩藻糖苷蓄积病 参考值 27.112.8 U/L(分光光度法),临床意义 岩藻糖苷蓄积病的诊断 遗传性岩藻糖苷酶缺乏症患儿AFU降低,出现岩藻糖苷蓄积,多于56岁死亡 肝细胞癌与其他肝占位性病变的鉴别诊断 肝细胞癌时AFU显著增高,其他肝占位性病变时AFU增高阳性率远低于肝癌 肝细胞癌手术切除后AFU降低,复发时又升高,谷氨酸脱氢酶(glutamine dehydrogenase, GLDH) GLDH为仅存在于细胞线粒体内的特异性酶,肝脏含量最高(主要分布于肝小叶中央区肝细胞线粒体中),其次为心肌和肾脏等 肝细胞坏死时GLDH可进入血液 参考值 男性:08U/L 女性:07U/L,临床意义 肝细胞坏死 卤烷致肝细胞中毒坏死,GLDH 酒精中毒伴肝细胞坏死,GLDH(敏感) 慢性肝炎、肝硬化 GLDH 急性肝炎 GLDH反映肝小叶中央区坏死 肝癌、阻塞性黄疸 GLDH,5-核苷酸酶( 5- nucleotidase, 5-NT) 5-NT是一种碱性单磷酸酯水解酶,能专一水解核苷酸(特异性的水解5-核苷酸连于戊糖的5-磷酸,生成核苷酸和磷酸) 参考值:011U/L,临床意义 5-NT和ALP的测定结果在胆道梗阻、肝内占位性病变或浸润性病变有高度相关性 黄疸鉴别诊断(阻塞性?肝细胞性?) 5-NT 2 3倍以上:阻塞性 妊娠: 5-NT 骨病:正常,单氨氧化酶(monoamine oxidase, MAO) MAO存在于线粒体中,能促进体内结缔组织增生,与肝脏纤维化密切相关。肝脏有假小叶形成时,几乎皆有MAO 参考值 0 3 U/L,临床意义 肝脏疾病 急性肝炎MAO大多正常; 伴有急性肝坏死(亚急性和重症肝炎)时,MAO 轻度慢性肝炎MAO大多正常;中、重度慢性肝炎(活动性慢性肝炎),50%病例MAO,表明有肝细胞坏死和纤维化形成 失代偿期肝硬化(80%以上)MAO,但MAO对早期肝硬化反应不敏感 肝癌伴有肝硬化,MAO,肝外疾病 慢性心衰,MAO 糖尿病,MAO 甲亢,MAO 系统硬化症,MAO,脯氨酰羟化酶(prolyl hydroxylase, PH) PH是胶原纤维合成的关键酶,在脏器发生纤维化时,血清PH增高 血清PH可作为肝脏纤维化的指标 参考值 39.511.87g/L,临床意义 肝脏纤维化的诊断 肝硬化及血吸虫性肝纤维化,PH 原发性肝癌,PH,转移性肝癌不升高 急性肝炎、轻型慢性肝炎,PH多正常;肝细胞坏死加重伴胶原纤维合成,PH 慢性中、重度肝炎,PH 酒精性肝炎PH,随病变的发展继续升高 肝脏病变随访及预后判断,其他检查,型前胶原氨基末端肽(PP)检测 参考值 均值 100ng/L,150ng/L为异常,临床意义 肝炎 急性病毒性肝炎,PP(300ng/L),炎症消退后恢复正常;若PP持续存在提示转为慢活肝 鉴别诊断慢性持续性肝炎与慢性活动性肝炎(慢活肝,PP300ng/L) 酒精性肝炎,PP(与PH活性相关),肝硬化 诊断肝纤维化和早期肝硬化的良好指标 伴有肝硬化的肝癌,PP 与原发性血色病患者的肝纤维化无相关性 用药监护与预后判断 检测PP可用于免疫抑制剂(如MTX)治疗慢活肝的疗效检测 作为慢性肝炎的预后指标,型胶原(CIV)及其分解片段(7S、NC1) 参考值 血清CIV NC1参考值 5.31.3g/ml 临床意义 反映肝细胞坏死和纤维化发展趋势方面优于PP,CIV合成增多是肝纤维化的早期指标之一 血清CIV还可预测干扰素、抗丙型肝炎病毒抗体的疗效(CIV250g/ml,干扰素治疗无效),肝纤维化的检查 MAO PH 型前胶原N末端肽检测(P-P) 型胶原(CIV)及其分解片段(7S、NC1),血清铁测定 参考值 成人 1130umol/L 儿童 927umol/L 临床意义 肝细胞损害,如急性肝炎,慢活肝、活动性肝硬化时,血清铁 黄疸鉴别诊断:肝细胞性黄疸,溶血性黄疸,胆汁淤积性黄疸或正常,血清铜测定 人体铜主要分布于肝、肾、脑等器官组织中,肝脏是含铜量最大的器官 95%血清铜与2球蛋白 结合成为铜蓝蛋白,其余为游离铜或与清蛋白结合 参考值 成人 1122umol/L,临床意义 血清铜 肝胆系统疾病,如肝内、外胆汁淤积、转移性肝癌、肝硬化等 风湿性疾病,如SLE、类风湿关节炎活动期、RF、强直性脊柱炎等 其他,如贫血、甲亢、各种感染、心肌梗塞、妊娠妇女及注射雌激素等 血清铜 肝豆状核变性、肾病综合症、烧伤、营养不良等,铁/铜比值有助于黄疸鉴别 病毒性肝炎、肝细胞性黄疸,铁/铜1 胆汁淤积性黄疸,铁/铜1,病毒性肝炎血清标志物检测,庚型肝炎 RNA 同丙肝、致病力弱,慢丙肝、慢乙肝者阳性率高 TTV DNA 非经口,甲型肝炎病毒标志物检测 甲型肝炎病毒抗原和RNA测定 参考值 HAVAg(粪便) ELISA法为阴性 HAV-RNA (粪便) RT-PCR法为阴性 临床意义 HAVAg阳性 发病前2周粪中排出,发病2周后消失,急性感染证据 HAV-RNA阳性 特异性诊断、早期诊断,甲型肝炎病毒抗体测定 抗HAVIgM 发病后1周内出现,2周阳性率100,是早期诊断甲肝的特异指标 抗HAVIgA 早期和急性期粪便呈阳性反应,是甲肝早期诊断指标之一 抗HAVIgG 提示既往感染,作流行病学调查指标,乙型肝炎病毒标志物检测,乙型肝炎病毒标志物检测 乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg ) 参考值:阴性 亚型:adw、adr、ayw、ayr 意义: HBsAg 阳性为HBV感染的金标准 不能反映有无病毒复制、传染性、预后 存在3M(6M):慢性 常见于:急性乙型肝炎潜伏期和急性期;无症状HBsAg携带者;慢性乙型肝炎;HBV相关的肝硬化和原发性肝癌,乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs) 参考值:阴性 意义:表明机体对HBV具有一定的免疫力 既往感染过HBV(可伴抗-Hbe、抗-HBc) 接种乙肝疫苗产生或特异性高效价(乙肝)免疫球蛋白注射后出现的中和抗体 抗-HBs阳性并不能完全除外慢性乙肝 HBsAg和抗-HBs均阴性:“窗口期” HBsAg和抗-HBs同时阳性 抗-HBs产生早期 HBV的S基因变异或为两种不同亚型,乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg) 参考值:阴性 意义: 患者肝脏中有HBV复制,具有较强的传染性;阳性孕妇可引起垂直传播 持续阳性,表明乙肝处于活动期、肝细胞损害较重,易转为慢肝、肝硬化 急性HBV感染者,HBeAg消失早于HBsAg;若其持续存在3M预示趋向慢性,乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe) 参考值:阴性 意义: 大部分病毒被消除,复制减少,传染性减低 急性期即出现抗-Hbe者,易进展为慢肝 慢活肝出现抗-Hbe者可进展为肝硬化 与甲胎球蛋白阳性相关,警惕原发性肝癌; HBeAg与抗-Hbe均阳性,且ALT升高时可进展为原发性肝癌,乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg) 参考值:阴性 意义: 提示有HBV复制,传染性强 有助于HBsAg暂时阴转或乙肝早期HBsAg含量太低而呈阴性时的诊断 HBV-DNA检测:定性、定量 HBVDNA多聚酶检测 Dane颗粒抗体检测,乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc) 参考值:阴性 意义: 检出率比HBsAg敏感,可在血清中长期存在(几年几十年),HBV感染的敏感指标 HBsAg、抗-HBs “窗口期” 或HBV感染伴抗-HBs消失时,可能是唯一HBV特异性指标 高滴度常与HBsAg并存,表示现行感染;低滴度常与抗-HBs并存,表示既往感染,抗-HBc 分类 抗-HBc IgG:基本同抗-HBc (总抗体) 抗-HBc IgM: 早期出现,90出现在发病第一周,个别可在一个月之后,有助HBV( HBsAg阴性者)诊断 慢性乙肝HBcAg长期存在,可检出低水平抗-HBc IgM 类风湿因子可致假阳性 抗-HBc IgA:HBV肝内复制后排入消化道,刺激产生抗-HBc IgA,再吸收入血,乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1(Pre-S1)和前S1抗体(抗Pre-S1) 参考值 阴性 临床意义 非常重要的传染性指标 作为病毒复制指标较HBeAg敏感,可避免HBeAg阴性、仍有病毒复制者误诊和漏诊 Pre-S1转阴越早、抗Pre-S1转阳越早,患者病程越短,预后越好,乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2(Pre-S2)和前S2抗体(抗Pre-S2) 参考值 阴性 临床意义 Pre-S2阳性提示HBV复异常活跃,有传染性 抗Pre-S2阳性见于乙肝急性期及恢复早期(康复早期先于抗-HBs出现,保护性抗体) 抗Pre-S2阳性提示HBV已被清除,预后较好,乙型肝炎病毒DNA测定 HBV-DNA检测:定性、定量 HBVDNA多聚酶检测 Dane颗粒抗体检测 意义 诊断乙型肝炎,表明HBV复制及有传染性 监测应用HBsAg疫苗后垂直传播阻断效果,乙型肝炎病毒YMDD变异测定 常用方法 PCR-RELP、基因芯片分析、焦磷酸测序法和基因克隆与测序方法 YMDD(酪-蛋-天-天门冬氨酸)是HBV逆转录酶发挥催化活性所必需的关键结构 M可突变为I(异亮氨酸)或V(缬氨酸) YMDD发生突变,可使目前常用的胞苷类似物拉米夫定等抗HBV药物产生耐药性,丙型肝炎病毒标志物检测 丙型肝炎病毒RNA测定 阳性提示HCV复制活跃,传染性强;转阴提示HCV复制受抑,预后较好 抗-HCVIgM测定 发病后24天出现,持续13个月。(6个月内痊愈者抗-HCVIgM转阴,反之将转为慢性丙型肝炎) 抗-HCVIgG测定 表明已有HCV感染,丁型肝炎病毒标志物检测 丁型肝炎病毒RNA测定 确诊指标 HDVAg 出现较早,仅持续12周。 HDVAg HBsAg,易迅速发展为慢性或急性重肝 丁型肝炎病毒抗体测定 抗-HDVIgG阳性 只能在HBsAg阳性的血清中测得,是诊断丁型肝炎的可靠指标 抗-HDIgM出现较早,一般持续220周,可用于丁型肝炎早期诊断 HDV与HBV 联合感染时,抗HDIgM一过性;重叠感染时,抗HDIgM持续性,戊型肝炎病毒标志物检测 HEV-RNA:早期诊断、确诊依据 HEVAg 阳性可诊断戊肝 抗-HEVIgM 95急性期病人阳性 抗-HEVIgG 恢复期急性期滴度4,提示HEV新近感染,庚型肝炎病毒标记物检测 HGV-RNA:阳性表明HGV存在 抗-HGV阳性:表示曾感染过HGV,多见于输血后肝炎或使用血液制品引起HGV合并HCV感染的患者,常见肝脏病监测指标变化特点,急性肝损伤 短时间内迅速发生的肝细胞损伤 病因 病毒性、缺血性、(中)毒性,急性肝损伤实验室检查 转氨酶显著升高 蛋白合成代谢变化不大 常伴胆红素升高 ALP可升高(3) PT延长可预示肝损伤严重,急性肝损伤转归 急性甲、乙肝多为自限性 丙肝则多数转为慢性 极少数患者可发展为急性肝功能衰竭 PT延长4s,STB257 严重肝损伤 PT延长20S 死亡危险性高,慢性肝损伤 较长时间内( 6M)肝细胞发生持续性损伤 主要病变 慢性病毒性肝炎 自身免疫性肝炎 Wilson病(豆状核变性) 血色素沉着症 原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎 1-抗胰蛋白酶缺乏症 常伴有纤维化,可发展为肝硬化及肝癌,慢性肝损伤实验室检查 转氨酶4 常ALTAST 酒精肝ASTALT 慢肝肝硬化 可ALT正常、AST 胆红素、ALP常于正常范围内 病毒血清学检查及其他有关病因学检查,肝硬化 临床-病理表现 肝纤维化 进行性肝功能不全、门脉高压 实验室检查 胶原产生及降解的血清标志物 肝纤维化非创伤性诊断模型,胶原产生及降解的血清标志物 MAO(单胺氧化酶) PH(脯氨酰羟化酶) PP (型前胶原氨基末端肽) 型胶原(CIV)及其分解片段(7S、NC1) HA(透明质酸) LN(层黏连蛋白),肝纤维化非创伤性诊断模型 Fibrotest参数 2-巨球蛋白(2-MG) 总胆红素(T-BIL) -谷氨酰转肽酶(GGT) 载脂蛋白A1(apo A1) 结合珠蛋白 年龄 性别,ELF-test参数 组织金属蛋白酶抑制剂-1(Tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP-1) PP (型前胶原氨基末端肽) 透明质酸( Hyaluronic acid, HA ),Hepascore参数 胆红素 GGT 2-MG HA 性别 年龄,Wai-score 参数(APRI) ALT AST PLT(血小板计数),肝脏病检查项目的选择与应用,健康体检 ALT、AST、GGT、A/G及肝炎病毒标志物。必要时增加ALP、STP及血清蛋白电泳。 怀疑为无黄疸性肝炎 急性 ALT、胆汁酸、尿内尿胆原及肝炎病毒标志物 慢性 加查AST、ALP、GGT、STP、A/G及血清蛋白电泳,黄疸患者的诊断与鉴别诊断 STB、CB、尿内尿胆原与胆红素、ALP、GGT、LP-X、胆汁酸 疑为先天性非溶血性黄疸时加查ICGR 怀疑原发性肝癌 除一般肝功能(如ALT、AST、STB、CB)外,加测AFP、GGT及其同工酶,ALP及其同工酶,怀疑肝脏纤维化活肝硬化 筛选检查 ALT、AST、STB、 A/G、蛋白电泳、ICGR 进一步检查 MAO、PH、PP及CIV 疗效及病情随访 急性肝炎 ALT、AST、前清蛋白、ICG、STB、CB、尿内尿胆原和胆红素 慢性肝炎 ALT、AST、STB、CB、PT、STP、A/G及蛋白电泳,必要时查MAO、PH及PP 原发性肝癌 AFP、GGT、ALP及其同工酶,
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