分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量

分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量 （湖北中医药大学药学院 药学（2）班 ）一、实验综述 摘要：以邻二氮菲为显色剂用分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量。研究表明，在pH=29的溶液中，铁（）可用盐酸羟胺还原至铁（），生成的铁（）与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，其最大吸收波长为506nm,铁浓度在0.3116.00mg/L范围内与溶液吸收光度呈良好的线性关系，线性回归方程为A= _ 相关系数r=_，检出限为_ mg/L，相对标准差RSD=_，表观摩尔吸收系数=_L（mol-1cm-1） 关键词：邻二氮菲；分光光度法；铁铁元素是人体内重要的元素之一。人体缺铁容易导致一些贫血症状甚至一些疾病，所以适当补铁对人体健康有着非常重要的意义。如果人体缺铁，可影响血红蛋白、肌红蛋白的合成，使某些酶的活性降低，引起人体生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低和机体抵抗力下降等引起的各种疾病的产生。测定新血宝胶囊中的铁含量对于人体的健康有着十分重要的意义。测定铁的含量由很多方法。本文采用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量，该法具有操作简单、灵敏度高等特点，结果令人满意。 二、 实验目的1.了解分光光度法侧铁的选择2.熟悉显色反应条件与测量条件的选择方法3.熟悉实验设计的基本内容与方法4.掌握分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量三、 实验原理 亚铁离子与邻二氮菲反应生成橘红色络合物，其反应式为：332+橘 红色 lmax邻二氮菲四、实验仪器和试剂 仪器： 721(722)分光光度计、50ml容量瓶、刻度吸管（1ml、5ml），pH精密试纸。 实验试剂：铁标准储备液(Fe2+=100.0 g/ml). 0.15%邻二氮菲水溶液(显色剂). 10%盐酸羟胺溶液(还原剂) 醋酸缓冲溶液. 3mol/ml HCl. 1mol/ml NaOH.五、实验设计方案（一）测定波长的选择：在50m L容量瓶中，准确加入040m L 铁标准溶液( I ) ，分别加入1 m L 10 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2m i n后，再加入2m L 015邻二氮菲溶液、5 m L10m o l L醋钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。用l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，在不同波长( 从440一560nm ) 下测定一次吸光度。绘制吸收曲线。 表1/nm440450460470480490492494A/nm496498500502504506508510A/nm520530540550560A 绘制A曲线 A /nm 图1 由图1可以看出，随着波长的增加，吸光度值逐渐增加，在_nm处有最大吸收，此后随着波长的增加，吸光度值降低。因此选择_nm为最佳吸收波长。 （二）邻二氮菲的用量对吸光度的影响 取6个50 m L 容量瓶，各加1 0- 3m ol L 标准铁溶液2 m L 及1 m L 10N H 20H H C I 溶液，摇匀，放置2m i n后，再分别加入010 m L、0 30 m L、0 50m L、10 m L、2 0 m L 及4 0 m LO 15邻二氮菲溶液，和5 m L l m ol L C H 3C O O N a 溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在722型分光光度计上用l c m 吸收池，在选定的波长_nm ，测定溶液的吸光度( A ) 。绘制吸光度一显色剂用量曲线。 表2 邻二氮菲用量的不同对吸光度的影响V邻二氮菲0.100.300.501.02.04.0A根据实验数据绘制AV曲线 A /nm 图2 根据表2和图2可知邻二氮菲的用量在1.0, 4.0范围时，溶液的吸光度最大且恒定不变，故选2.0m L作为其最佳用量。 （三）显色反应的时间 取一个50 m L 容量瓶，加入2m L 10 qm o l L标准铁溶液，及l m L 10N H 20H H C I 溶液，摇匀放置2m i n后，再加2 m L 01 5邻二氮菲溶液，5 m L1.0mol/L 醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长_nm 下，用l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，测定吸光度以后每隔半小时再测定一次。 表3 不同显色时间对溶液吸光度的影响 时间0h0.5h1h1.5h2.0h2.5h3.0h3.5h4.0hA 根据实验数据绘制At 曲线 A t/h图3 根据实验结果，为了实现快速并且准确分析，本实验选择室温下最佳测定时间为显色后_h。 （四）溶液pH的选择 取6 个50m L 容量瓶，每个加入2 m L 10- 3mol/L标准铁溶液，及l m L 10N H ：O H H C I 溶液，摇匀放置2r a i n后，再加2 m L 015邻二氮菲溶液，摇匀。分别从滴定管中加入10 m L 、12 m L 、14 m L、16m L、18 m L、20 m L 01m o l L N a O H 溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在选定波长_nm 下，用1c m 吸收池。以去离子水为空白，测定各溶液的吸光。 表4 不同酸度对吸光度的影响V/mL101214161820ApH 根据实验数据绘制ApH曲线 A pH 图4 由图4中可知，在pH 值为_范围内吸光度最大并基本恒定，故本实验取pH 为_作为最佳显色pH 。所以我们就可以得出加入_m ol LN aO H 溶液时为最适宜用量。 （五）标准曲线的绘制 取5个50m L容量瓶，用刻度移液管分别加入000 m L 、040 m L、0 80 m L 、120 m L、1 60 m L 、180 m L ( I I ) 标准铁溶液注( 含铁100 ugm L) 。在分别加入1m L 10N H 20 H H C l 溶液，摇匀放置2m i n后，再加2 m L 015邻二氮菲溶液，5 m L 1 0m o l L 醋酸钠溶液，以去离子水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长_nm 下，用l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，测定各溶液吸光度。以含铁量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，绘制出工作曲线。 表5 标准曲线 V/mL0.400.801.21.601.80A 由标准铁溶液( I I ) 在波长_nm 处测定吸光度，做标准曲线。数据见表5 和图5，其线性较好。回归方程为：A =_，r =_。根据实验数据，以含铁量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，绘制曲线 A C/ug/L 用移液管量取20mL新血宝样品溶液于5 0 m L容量瓶中，加入l m L 10N H ：O H H C l 溶液，摇匀放置2min后，再加2 m L015邻二氮菲溶液，5m L 10m o l L 醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长_nm 下，用l cm 吸收池，去离子水为空白溶液作参比溶液，放置_h后，测邻二氮菲的用量，图4不同显色时间对溶液吸光度的影响定吸光度。测得吸光度为A =_，由回归方程为：A=_ ，得C = _ug/m L，则自来水中铁的含量_ug/m L：六、实验结论：本实验的最佳实验条件是：最大吸收波长为_nm ，显色剂最佳用量为_m L ；选择在室温下_h为最佳时间。最适宜的pH值范围为_；参考文献1胡小明，潘自红 分光光度法测定发样中的微量铁J 广州化工 2012,40（6）：1661672李建雄 自来水中铁含量测定的实验研究J 内蒙古石油化工 2011，6：563李咏梅，施鹏飞，李人宇 双波长分光光度法测定饲料中铁的含量J 中国饲料 2012，23：3334