正交设计法优选白子菜总黄酮提取工艺开题报告.docx

xxxx本科生毕业论文（设计）开题报告书题目正交设计法优选白子菜总黄酮提取工艺学生姓名Xx学号xxxxx专业班级中药学121班教师姓名xxxx职称教授研究目的意义及国内外研究状况和应用前景（附参考文献）：1.研究目的意义 菊科土三七属植物白子菜Gynura divaricata （L.） DC.Gynura ovalis DC.，是用全株入药。夏秋时候进行采集，洗净后切片，或鲜用或晒干。白子菜别名：白背三七、东方菜、白冬枫、白番苋、大肥牛、石三七。白子菜它喜欢生长在湿阴的土地里，现在很多都在这种条件下栽培。白子菜生性寒凉、味很淡、无毒副作用。内服可以清热解毒、凉血、止血。外用可以消炎、退肿。入肝脾经。主治急性、小儿高烧、结膜炎症、心肺积热等。外用枪伤、刀伤、伤口发炎处理、烫伤、疮疡肿毒、乌疱等症。研究发现白子菜中黄酮类成分对治疗糖尿病有不错的治疗效果。具有很好开发和利用前景。到目前为止，关于白子菜主要药用成分总黄酮类化合物含量的研究国内外还没有太多的报道。用正交的试验方法 ，为白子菜总黄酮的提取设计最佳方法和为生产提取白子菜总黄酮提供依据,以白子菜总黄酮提取物为有效成分，设计正交实验优选白子菜总黄酮，用聚酰胺对白子菜总黄酮进行纯化，确定提取条件化条件。2.国内外研究状况和应用前景植物化学的重要任务之一就是发现和分析药用植物所含的次生代谢物质，即所含的化学成分，然后进行提取、分离和纯化或化学结构修饰，进而开展动物药理试验，为植物资源的药物开发提供科学依据，因而其大部分研究成果与药物开发密切相关。 有文献报道，美国市场上有25%的医药品含有植物提取物或来自高等植物的活性成分，其消费市场超过200多亿美元，从90种药用植物中提取的119种化合物已成为许多国家常用的重要药物，其中74%是从传统药用植物中经活性成分分离和化学研究发现的。一些发达国家的大制药公司，如德国的赫司特、美国的默克、孟山都、杜邦、夏玛等制药公司都已系统地开展了植物活性成分的筛选。 研究发现白子菜总黄酮对糖尿病有一定的治疗效果，这对开发和利用白子菜总黄酮具有很好的前景。参考文献：1 卫强，彭如玉，翟永欢，等 滁菊中总黄酮的聚酰胺纯化工艺研究J 中药材，2008，31( 1) :147 1492 贾凌云，孙启时，黄顺旺 滁菊花中黄酮类化学成分的分离与鉴定J 中国药物化学杂志，2003，13( 3) :159 1613 洪伟，林业实验设计与方法M.北京：北京科学技术出版社，1993,314 陈孝东,曹勇军,王引明,等.参芍注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用J.国际脑血管病杂志,2006,14(4):270一274.5 许杜鹃,陈敏珠.黄茂多糖对小鼠免疫功能的影响J.安徽医药,2003,7(6):418一419.6 王志萍, 曾因明. 线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的研究进展J. 国外医学麻醉学与复苏, 2005,26(3): 144-146.7 张秋玲, 孙远标, 李金国, 等. 局灶性脑缺血及脑缺血再灌注动物模型的制作J. 中国临床康复, 2006, 38(10): 106-109. 8 俞 浩，毛斌斌，刘汉珍，周国梁，张孝林，杨剑婷 滁菊总黄酮提取纯化工艺研究J. 安徽科技学院报2012,26（6）：38-439 张红星,周利,张唐法.头针对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤的影响J.浙江中西医结合杂志,2006,16(5):268一269.10.陶宗玉,李方成.大鼠局灶性脑缺血动物模型的研究进展J.中国微侵袭神经外科杂志,2004,9(8):377一37 11 江苏新医学院.中药大词典M.上册.上海：上海人民出版社，1997:756. 12 福建省科学技术委员会福建植物志编写组.福建植物志（第五卷）M. 福州：福建科学技术出版社，1992,393-394. 13 黄开珍，郝永靖，曾春晖，等 . 白子菜水提物对自发性高血压大鼠降血 压作用的实验研究 J. 中成药，2009，31(10) ：150-1508. 14 俞浩，毛斌斌，周国梁，等.白背三七总黄酮对糖尿病大鼠的降血糖作用 J.食品科学，2013,34（15）：295-298.主要内容、研究方法和思路：一 主要内容采用回流提取法提取白子菜总黄酮。设计4个因数3水平正交试验，优选白子菜总黄酮的最佳提取条件。二 研究方法设计正交实验有选白子菜总黄酮。三研究思路1、提取与纯化白子菜总黄酮 称取处理过的白子菜干燥粉末10g,加入100mL的提取溶剂混匀后放入70的恒温水浴锅中回流提取1h,然后进行过滤收集滤液，滤渣再用100mL溶剂进行重浸提，重复浸提3次，收集滤液然后合并在一起。在加热浓缩到总滤液的1/3，然后再进行一次过滤收集滤液后用提取溶剂定容到100mL，定容后的溶液就是总黄酮的提取液。提取溶剂分别为60%的乙醇、60%的甲醇和蒸馏水。得到3组黄酮提取液，留下备用。 用上述黄酮提取液5mL，加聚酰胺粉末200g充分搅拌均匀，然后装到装有400mg的聚酰胺粉末的层析住中，配置不同浓度的乙醇20L 从低浓度到高浓度进行洗脱：35%乙醇-55%乙醇-75%乙醇-95%乙醇-无水乙醇。收集各个浓度梯度的洗脱液，合并在一起后进行浓缩，最后用30%的乙醇定容到100mL,备用。2、芦丁标准曲线的绘制 精确配置0.1mg/mL 的芦丁标准液，分别取0、1.0、2.0、3.0、4.0、和5.0到6个10mL 标准容量瓶中，加入30%乙醇制成5mL,加入0.3mL 5%的亚硝酸钠溶液充分摇匀后放置6min后，加入0.3mL 10%的氢氧化铝溶液摇匀后放置6min后加入4mL 1mol/L 的配置氢氧化钠水溶液，然后用蒸馏水进行稀释到容量瓶的刻度即可，充分摇匀后，放置15min，然后用紫外分光光度计进行测定，波长为510nm，根据得出的吸光度和配置的浓度绘制出标准曲线。芦丁的浓度（/）0.10.20.30.40.5吸光度0.1040.2270.3060.4080.5093、优选总黄酮的最佳提取条件 准确称取3.0g经过处理过的样品，用乙醇作为提取溶剂进行提取，设计正交试验，正交试验为4个因数3个水平，4个因数分别为提取时间、提取温度、乙醇浓度、料液比例。然后根据芦丁的标准曲线，计算出样液中黄酮的含量，最后再根据总黄酮的质量分数的公式进行计算样品中的总黄酮的含量。进行的正交试验设计的出的数据如下表。 水平 因子乙醇浓度/%提取温度/提取时间/h 料液比 1 60 55 3 1:15 2 30 70 1 1:10 3 45 85 2 1:20 4、优选出最佳的提取条件总体安排和进度（包括阶段性工作内容及完成日期）：2015年9月-2015年10 月 选定题目2015年11月-2015年12 月 收集资料、撰写文献综述2016年1月-2016年2月 拟定论文提纲2016年3月- 2016年4月 完成开题报告2015年5月 做毕业论文实验指导教师意见（研究的意义、创新点、前期基础工作、存在的难点和困难、建议等）：指导教师签名： 年月日学院领导组意见：签名： 年月日