《肺癌的基因治疗》PPT课件.ppt

肺癌的基因治疗 白春学张新复旦大学呼吸病研究所中山医院肺部肿瘤综合诊疗中心 复旦呼研所 基因治疗的定义 依靠遗传物质即基因 无论是人本身或外源的 来治疗疾病 包括纠正人自身基因的结构或功能上的错乱 阻止病变的进展 杀灭病变的细胞 或抑制外源病源体遗传物质的复制 从而达到治病目的 肺癌分子发病机制 通常观察到的遗传变化 烟草致癌物 对外界信号的异常反应丢失细胞周期控制丢失凋亡途径丢失抑制转移能力血管生成永生化自分泌生长环 非典型肺泡增生 前恶变腺瘤 肺癌 原位癌 发育不良 支气管花生 正常上皮 基因治疗的要素 确定目的基因选用基因载体目的基因在受体细胞中表达 恶性肿瘤基因治疗靶基因 目的基因 的选择 一 抑制癌细胞生长1 抑癌基因 1 p53 2 pRB 3 p15 p16 p21 恶性肿瘤基因治疗靶基因 目的基因 的选择 2 癌基因 反义基因 RNAi 1 N rasKi ras 2 IGFIR IGFIIR 3 c myc 恶性肿瘤基因治疗靶基因 目的基因 的选择 二 自杀基因 恶性肿瘤基因治疗靶基因 目的基因 的选择 二 增强免疫反应 Immuno GeneTherapy肿瘤免疫 癌细胞免疫原性降低 机体免疫系统缺陷1 增强免疫原性 1 B 7 2 肿瘤抗原基因 3 细胞因子IL 2 IL 3 GM CSFetc 4 B细胞融合 恶性肿瘤基因治疗靶基因 目的基因 的选择 2 过继免疫基因治疗TIL导入TNF 扩增导入体内IL 2 恶性肿瘤基因治疗的其它策略 抑制肿瘤血管生成 angiostatin endostain 诱导正常组织产生抗肿瘤物质 IL 2 INF 保护正常组织免受化疗的影响 谷胱甘肽合成酶 癌症基因治疗 113trialscurrentlyopeninUSinimmunotherapyofcancer 54 ofimmunotherapytrialsdedicatedtomelanoma Deliveryofthetumour suppressorgeneTP53accountsforthenextlargestgroup SuicideGT Inhumans Cancer69 基因治疗对肺癌有效吗 腺病毒载体转染野生型 53基因的临床试验 期临床试验1999年 Swisher等28例晚期 26例标本中有12例 46 被检出转导的特异性 53 有11例患者组织标本出现了细胞凋亡 期临床试验肺癌和头颈部肿瘤中有抗瘤活性 瘤内注射rAd 53试验 病例 12例气道阻塞而无法手术的肺癌患者剂量 1 106 1 1011pfu 28天注射1次 疗效 6例气道堵塞症状缓解3例肿瘤部分缓解 瘤内注射rAd 53联合放疗的 期临床试验 NSCLC83 的患者局部组织病理活检未见肿瘤组织16 的患者仍可观察到肿瘤病灶单独放疗的有效率不到20 免疫基因治疗临床试验 经GM CSF基因修饰的肿瘤疫苗治疗进展期NSCLC I II期 83例中 有3例患者达到完全缓解抑制TGF 表达反义RNA转染肺癌细胞株 然后将此细胞给59位IIIB或IV期的肺癌患者注射 结果有14例部分缓解 一年生存率达70 SCID Non CGTExample GeneTherapyforCancer SCIDmeans severecombinedimmunodeficiencydisease bubbleboydisease RecessivegeneticdisorderMutationingeneforbloodenzadenosinedeaminase ADA Precursorcellsgonesoimmsysgone NotherapytotreatthisdiseaseuntilGTNormalADAgeneistransplantedintopatientRestartsimmsysBesttoattackdiseaseatsourcePutwildgeneinstemcellsthatproduceimmsysusingavirulentretrovirusAtransgeneintegrateswithbodycells SCID Non CGTExample 基因治疗安全吗 NotherapytotreatthisdiseaseuntilGTNormalADAgeneistransplantedintopatientRestartsimmsysBesttoattackdiseaseatsourcePutwildgeneinstemcellsthatproduceimmsysusingavirulentretrovirusAtransgeneintegrateswithbodycells SCID Non CGTExample 基因治疗所致首例死亡 1999年9月 一例遗传性鸟氨酸氨甲酰转移酶 OTC 缺乏的患者 于接受以腺病毒为载体的OTC基因治疗4天后死亡 JesseGelsinger 他是5000多例临床试验者中因基因治疗副反应发生死亡的唯一例 四个主要问题 世界首个获准上市的基因治疗药物深圳市赛百诺基因技术有限公司 通用名 重组人p53腺病毒注射液注册商标名 今又生 Gendicine 英文名 RecombinantHumanAd p53Injection主要组成成分 重组人p53腺病毒颗粒 今又生临床疗效 联合放疗治疗中晚期头颈部鳞癌患者 CR率达64 是单纯放疗CR率的3 4倍联合常规放 化疗治疗非头颈部实体瘤 30种 包括主要实体瘤 CR32 PR27 NC41 单药治疗复发性晚期头颈部鳞癌患者的治疗结果 50 以上的病人肿瘤缩小 最大缩小率达95 今又生瘤内注射重组人腺病毒治疗晚期肺癌临床试验观察 例数 15用药方式 经皮肺穿刺剂量 1次 周X4 疗程疗效 缩小5例无变化7例增大3例 H101 H101复制型腺病毒治癌机制 H101的E1B蛋白缺失 P53蛋白行使职能 P53蛋白阻止腺病毒在细胞中复制繁殖 正常细胞存活 正常细胞 H101感染P53功能失常的癌细胞 H101在癌细胞中复制繁殖 H101选择性杀死P53功能失常的癌细胞 P53缺失的癌细胞 H101 我们还能做些什么 更好的载体 提高转染效率 治疗基因 Immunoliposomesforactivetargeting Antibodyagainsttumorspecificmoleculeswilltargetthemtotumors 更好的治疗策略 RNA干扰 RNAi现象的发现 RNA干扰特点 专一性高作用稳定效率高操作较简便 IRESSA治疗肺癌疗效 NSCLC40 80 Prostate40 80 Gastric33 74 Headandneck90 100 Breast14 91 Colorectal25 77 Pancreatic30 50 Ovarian35 70 高表达EGFR的肿瘤 荧光显微镜下观察siRNA EGFR的抑制效应 A549细胞 a空白对照bLF2000c无关siRNAdsiRNA EGFR 生长抑制试验 A549 85 0 SPC A1 78 3 集落形成实验 图15dsRNA EGFR抑制A549 左 SPC A1 右 细胞集落形成 a 对照组 b 空白载体组 c dsRNA unrelated组 d dsRNA EGFR组 63 3 66 8 化疗敏感性分析 图18RNAi抑制EGFR表达对A549 左 SPC A1 右 细胞化疗敏感性的影响 A549对照组 空白载体组 dsRNA unrelated组 dsRNA EGFR组IC50依次为2 67 g ml 2 30 g ml 2 19 g ml 0 50 g ml SPC A1IC50依次为3 67 g ml 3 11 g ml 3 07 g ml 0 43 g ml 化疗增敏4 7倍 肿瘤生长抑制率 图3各实验组肿瘤生长曲线图 空白载体组 dsRNA unrelated组 dsRNA EGFR组肿瘤生长抑制率依次为19 72 13 59 75 03 75 03 13 59 19 72 相关的课题及论文 课题 基于RNAi技术抗肿瘤新药研究04DZ19208 上海市科委重大项目用新方法提高肺癌化疗敏感性的研究02JC14027 上海市科委重点项目论文 ActaPharmacolSin2004 25 1 61注 本文已被CancerRes IF7 69 annualreviewofphysiology IF16 67 等杂志引用 GenetVaccinesTher 2005 3 5中华内科杂志2004 43 5 345RNABiology2004 1 1 1中华肿瘤杂志2004 26 12 713中华结核和呼吸杂志2005 28 5 337 申请临床试验 黄斑退化 AMD 糖尿病性视网膜病变 DR 儿童HIV感染高胆固醇血症 就象前二十多年对肿瘤分子生物学的大量研究 终于取得了分子靶向治疗重大突破一样 我们有理由相信 经过数十年的辛勤耕耘 肺癌基因治疗必将结出磊磊硕果 展望 谢谢