淋巴细胞亚群与临床.ppt

淋巴细胞亚群免疫表型与临床 主要内容 概念各类淋巴细胞的基础知识淋巴细胞亚群检测的临床意义 一 概念 淋巴细胞属白细胞的一种 由淋巴器官产生 是机体免疫应答功能的重要细胞成分 淋巴细胞的免疫表型淋巴细胞的膜表面分子 分化群抗原CD 可用于鉴定和区分其亚群和亚类 是研究淋巴细胞的重要工具 淋巴细胞亚群按其发生迁移 表面分子和功能的不同 可分为T细胞 B细胞和自然杀伤 NK 细胞 淋巴细胞的免疫表型淋巴细胞的膜表面分子 分化群抗原CD 可用于鉴定和区分其亚群和亚类 是研究淋巴细胞的重要工具 淋巴亚群在外周血中的比例 淋巴细胞 T淋巴细胞50 84 NK细胞7 40 B淋巴细胞5 18 各类淋巴细胞的基础知识 T淋巴细胞 概念来源于骨髓的淋巴样干细胞 在胸腺中成熟的淋巴细胞 故称胸腺依赖性淋巴细胞 thymus dependentlymphocyte 简称T细胞 功能负责细胞免疫功能 参与抗肿瘤 抗细胞内感染微生物 移植排斥 迟发型超敏反应 对部分体液免疫发挥辅助功能 免疫表型 CD3 与TCR形成复合体 是T细胞识别抗原和转导信号的主要单位 CD3 CD4 辅助性T细胞CD3 CD8 杀伤性T细胞 T淋巴细胞的分化发育 T细胞在胸腺中的发育T细胞在外周淋巴器官中的分化发育 T细胞在胸腺中的发育 三个阶段双阴性阶段 DN 双阳性阶段 DP 单阳性阶段 SP 三个重要事件TCR基因重排阳性选择阴性选择三个重要结果获得功能性TCR获得MHC限制性获得自身耐受 T细胞在外周淋巴器官中的分化发育 初始T细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后 最终分化为具有不同效应功能的T细胞亚群 效应T细胞和记忆T细胞 T淋巴细胞亚群 按T细胞所处的活化阶段初始T细胞 naiveTcell 效应T细胞 effectorTcell 记忆性T细胞 memoryTcell 按TCR的表型分类TCR T细胞TCR T细胞 按T细胞的CD4和CD8分子表型CD4 T细胞辅助T细胞CD8 T细胞杀伤T细胞按T细胞的功能分类Th helpTcell Tc CTL cytotoxicTcell Tr regulatoryTcell 初始T细胞 效应T细胞和记忆T细胞 初始T细胞表型 CD45RA CD62L CD25 IL 2R 特点 未接触抗原的成熟T细胞 有分化潜能效应T细胞表型 CD4 CD8 迁往炎症部位 执行细胞免疫效应记忆性T细胞表型 CD45RO CD25 IL 2R 特点 存活期长 再次接受抗原刺激后可迅速活化 TCR T细胞和TCR T细胞 TCR T细胞数量少 占5 多为CD4 CD8 DN细胞 少数为CD8 分布于皮肤 粘膜参与固有免疫 是抗感染的第一线细胞TCR T细胞数量多 CD4 或CD8 SP细胞 TCR识别谱广 是参与免疫应答的主要细胞群 Th CTL Ts和Treg细胞 辅助性T细胞 Th 主要表面标记 CD4 CD8 主要种类 TH1 TH2功能 具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答 促进和抑制 的作用细胞毒性T细胞 CTL 主要表面标记 CD4 CD8 CD28 功能 特异性直接杀伤靶细胞杀伤机制 释放穿孔素 颗粒酶杀伤靶细胞通过Fasl介导靶细胞的凋亡 抑制性T细胞 Ts 主要表面标志 CD4 CD8 CD28 功能 对免疫应答有重要的负调节功能 抑制性T细胞功能的异常 常与T自身免疫性疾病 第I型超敏反应等疾病发生有关 调节性T细胞 Treg 主要表面标记 CD4 CD25 功能 抑制免疫应答 小结 NK淋巴细胞 NK细胞 一种大颗粒淋巴细胞 英文全称为 naturalkillercell 也称作 自然杀伤细胞 它是一种能直接杀伤靶细胞效应的特殊的淋巴细胞系 具有抗肿瘤抗感染免疫调节的功能 且表现为速发效应 在医学上被称作是 人体抵抗癌细胞和病毒感染细胞的第一道防线 NK细胞的表型 NK细胞表面标志物 CD3 CD16 CD56 与T细胞 B细胞相比 NK细胞表面标志的特异性是相对的 人NK细胞mIg 部分NK细胞CD2 CD3和CD8阳性 表达IL 2受体 链 P75 CD122 CD11b CD18阳性 细胞因子诱导杀伤细胞 CIK CIK cytokine inducedKiller 细胞是由r IFN CD3 Ab IL 1 IL 2等细胞因子在体外诱导并大量扩增的具有杀伤肿瘤活性的细胞 是一种新型 高效 广谱的免疫细胞 是目前最新的肿瘤免疫治疗手段 CIK细胞 CD3 T细胞为主的异质性细胞群体 同时表达CD3 CD56 兼CTL强大的抗瘤活性 和NK细胞非MHC限制性杀瘤特点 目前所知杀伤活性最强的免疫效应细胞 CIK的表型及起源 表型 CD3 CD56 和CD3 CD56 两个亚群 主要效应细胞CD3 CD56 分布 优先分布肝脏 CD3 CD56 占肝脏CD3细胞的1 3 其次外周血 占 5 来源 主要是CD3 CD56 的T细胞 多数是CD4 CD8 及CD4 CD8 B淋巴细胞 B淋巴细胞是免疫系统中的抗体产生细胞 产生的抗体可与抗原起特异性的结合 如中和细菌的外毒素使其失去毒性作用 抗体与抗原结合后形成的复合物易被吞噬细胞清除 抗体与抗原结合后再结合补体清除病原体 B细胞特异性标志物 CD19 CD20等B淋巴细胞检测时 多用CD3 CD19 来作为检测标志 B细胞的亚群 周围淋巴器官中的B细胞具有异质性可依据CD5是否表达分为B1和B2两亚群 淋巴细胞亚群与临床 淋巴细胞亚群的检测内容 目前常做以下项目的检测 淋巴细胞亚群分析T细胞亚群分析T淋巴细胞 CD3 辅助T细胞 CD3 CD4 杀伤 抑制T细胞 CD3 CD8 CD4 CD8 的比值B细胞 CD3 CD19 NK细胞 CD3 CD16 56 活化淋巴细胞的检测 TBNK检测的适用人群 肿瘤病人化疗过程中 抗癌药物对同样处于增殖状态的 对肿瘤敏感的活化淋巴细胞也有杀伤作用 甚至免疫功能严重损毁 活动期的自身免疫病患者 必然表现为淋巴细胞亚群绝对值和活化淋巴细胞百分比的明显异常 怀疑有免疫缺陷的病人器官移植患者术后监测中更具有不可或缺的作用 淋巴细胞亚群的正常参考值 淋巴细胞群 NK细胞 CIK细胞 B细胞 淋巴细胞亚群的临床意义 淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标 它总体反映机体当前的免疫功能 状态和平衡水平 并可以辅助诊断某些疾病 如自身免疫病 免疫缺陷病 恶性肿瘤 血液病 变态反应性疾病等 分析发病机制 观察疗效及检测预后有重要意义 当某种细胞亚群所占百分比过高或过低 都提示存在免疫功能紊乱 但一般情况下对疾病的诊断和鉴别无特异性 淋巴细胞亚群测定的结果解释 T细胞异常CD4细胞异常CD8细胞异常CD4 CD8比值异常B细胞异常NK细胞异常 总T 总B NK细胞可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病 也可以用于监测移植后得免疫重建 T细胞减少 见于先天性免疫缺陷病 例如DiGeorge综合症 胸腺发不发育 以及肾脏和心脏移植后接受预防排斥的免疫调节药物OKT 3的患者也常见于恶性肿瘤 自身免疫性疾病 SLE和RA等 先天性免疫缺陷病 艾滋病 接受放疗 化疗或者使用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂资料的患者 T细胞增多 见于慢性活动性肝炎 重症肌无力等自身免疫病活动期 CD4淋巴细胞减少 见于恶性肿瘤 遗传性免疫缺陷病 艾滋病 应用免疫抑制剂患者 CD4淋巴细胞增加 可能有过强的细胞免疫反应 或某些免疫增强药物的有效结果 CD8淋巴细胞增多 见于自身免疫性疾病 如SLE 艾滋病初期 慢性活动性肝炎 肿瘤及病毒感染等 CD8淋巴细胞减少 见于机体对各种病毒感染的免疫反应 肿瘤患者具有抗肿瘤免疫反应时 CD8细胞与CD4细胞同时减少 见于各种严重的免疫缺陷以及肿瘤患者晚期或免疫系统严重损伤后 CD4 CD8比值异常 CD4 CD8 2 5表明细胞免疫功能处于 过度活跃 状态 容易出现自体免疫反应 见于类风湿性关节炎 I型糖尿病等 CD4 CD8 1 0称为 免疫抑制 状态 常见于 1 免疫缺陷病 如艾滋病时的比值常显著小于0 5 2 恶性肿瘤 当发生癌转移时 CD3 CD4细胞数明显减少的同时CD8细胞数明显增多 CD4 CD8比值明显降低 提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫功能更低 预后更差 3 再生障碍性贫血 白血病 4 某些病毒感染 CD4 CD8降到1 0以下为 倒置 是较为明显的异常 5 用于器官移植后监测机体的免疫状态 用药剂量的调整 抑制排斥反应的发生 若移植后CD4 CD8较移植前明显增加 则可能发生排斥反应 比值持续减低表明移植后感染 若比值 0 2时应停用免疫抑制剂 以免继发严重感染而导致移植失败 注意分清主要是CD8细胞增多还是CD4减少 B细胞的异常 B细胞明显增加 见于淋巴组织增生失调 例如慢性淋巴细胞白血病 也见于病毒感染早期 B细胞缺如 见于原发性B细胞缺陷病 如性联无丙种球蛋白血症 和重症联合免疫缺陷 T细胞同时缺如 体液免疫功能不良者则减少 在生命垂危时可呈现极度减少 NK细胞异常 NK细胞增多 见于病毒感染 肿瘤早期患者 尚有抗肿瘤免疫反应时 NK细胞减少 免疫功能低下 免疫抑制药物使用后 肿瘤晚期 活化淋巴细胞的检测 CD69 HLA DR CD71 活化淋巴细胞的标志有CD25 IL 2R CD69 CD71 CD38 CD95 HLA DR 它们在T细胞活化的不同时期表达 活化标志一般选择CD69 CD25 HLA DR等结合淋巴细胞亚群绝对值 可评估免疫功能失调临床上将活化的CD3细胞数目过低 即视作机体免疫功能极度缺失 提示有可能继发全身感染 应当立即调整治疗方案 THANKS